中文摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
前言 | 第13-18页 |
参考文献 | 第16-18页 |
第一部分 大鼠骨髓间质干细胞的分离培养和鉴定 | 第18-31页 |
实验一、大鼠骨髓间质干细胞的分离和培养 | 第18-22页 |
1、实验动物 | 第18页 |
2、实验试剂 | 第18页 |
3、实验设备 | 第18页 |
4、实验步骤 | 第18-19页 |
5、培养结果 | 第19-22页 |
实验二、大鼠骨髓间质干细胞的鉴定 | 第22-26页 |
1、试剂 | 第22页 |
2、方法 | 第22页 |
3、结果 | 第22-26页 |
讨论 | 第26-28页 |
参考文献 | 第28-31页 |
第二部分 腺病毒和慢病毒载体感染骨髓间质干细胞的比较 | 第31-44页 |
材料和方法 | 第31-33页 |
结果 | 第33-38页 |
讨论 | 第38-42页 |
参考文献 | 第42-44页 |
第三部分 人骨形态发生蛋白2基因(hBMP2)的慢病毒载体构建 | 第44-53页 |
材料和方法 | 第45-46页 |
结果 | 第46-49页 |
讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-53页 |
第四部分 携带hBMP2基因的慢病毒载体的包装和体外表达 | 第53-65页 |
实验一、慢病毒载体的包装和滴度测定 | 第53-58页 |
一、病毒包装 | 第53-54页 |
1、实验材料 | 第53页 |
2、实验试剂 | 第53页 |
3、实验步骤 | 第53-54页 |
二、慢病毒载体系统的病毒滴度测定 | 第54-58页 |
1. 目的 | 第54页 |
2. 材料 | 第54-55页 |
3. 仪器设备 | 第55-56页 |
4. 操作步骤 | 第56-58页 |
实验二、hBMP2体外表达的间接免疫荧光分析 | 第58-60页 |
目的 | 第58页 |
材料及试剂 | 第58页 |
实验步骤 | 第58-59页 |
结果 | 第59-60页 |
实验三、hBMP2体外表达的Western Blotting分析 | 第60-62页 |
目的 | 第60页 |
材料及试剂 | 第60页 |
实验步骤 | 第60-61页 |
结果 | 第61-62页 |
讨论 | 第62-64页 |
参考文献 | 第64-65页 |
第五部分 携带hBMP2基因的慢病毒感染骨髓间质干细胞的定向分化 | 第65-75页 |
实验一、慢病毒载体感染细胞后碱性磷酸酶(ALP)活性测定 | 第65-68页 |
实验材料 | 第65页 |
实验步骤 | 第65-66页 |
结果 | 第66-68页 |
实验二、慢病毒载体感染细胞后钙沉积的定量检测 | 第68-69页 |
1、测定方法 | 第68页 |
2、钙的定量测定结果 | 第68-69页 |
实验三、慢病毒载体感染细胞后的Ⅰ型胶原蛋白免疫组化分析 | 第69-71页 |
实验试剂和材料 | 第69页 |
实验步骤 | 第69页 |
实验结果 | 第69-71页 |
讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-75页 |
综述 | 第75-89页 |
致谢 | 第89-90页 |