| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-20页 |
| ·漆酶的研究概况 | 第8-12页 |
| ·漆酶的理化性质 | 第8-9页 |
| ·漆酶分子生物学研究进展 | 第9-12页 |
| ·漆酶的应用 | 第12页 |
| ·基因克隆的一般方法 | 第12-14页 |
| ·基因克隆技术概述 | 第12-13页 |
| ·反转录PCR(RT-PCR)技术简介 | 第13页 |
| ·差异显示PCR(DDRT-PCR)技术简介 | 第13-14页 |
| ·其它基因克隆技术 | 第14页 |
| ·随机引物在分子生物学研究中的应用 | 第14-16页 |
| ·随机引物的应用与发展 | 第14-15页 |
| ·随机引物在基因表达多态性上的应用 | 第15页 |
| ·随机引物的技术特点 | 第15-16页 |
| ·生物信息学的应用 | 第16-17页 |
| ·数据库查询和数据库搜索 | 第16-17页 |
| ·生物信息学的主要应用领域 | 第17页 |
| ·白腐菌漆酶结构基因克隆方法的确定 | 第17-18页 |
| ·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 白腐菌氧化酶系的检测及其漆酶诱导产生的研究 | 第20-28页 |
| ·材料和方法 | 第20-21页 |
| ·菌种采集分离方法 | 第20页 |
| ·丁香醛连氮法定性检定木素氧化酶系 | 第20页 |
| ·苯胺蓝平板脱色法定性检定木素氧化酶系 | 第20-21页 |
| ·种子母液的培养 | 第21页 |
| ·发酵液的培养方式 | 第21页 |
| ·漆酶活性的定量测定 | 第21页 |
| ·结果与分析 | 第21-27页 |
| ·丁香醛连氮法定性测定木素氧化酶的结果 | 第21-22页 |
| ·苯胺蓝平板脱色法测定木素氧化酶的结果 | 第22-24页 |
| ·各菌种木素氧化酶检测结果 | 第24-25页 |
| ·4种培养方式白腐菌漆酶活性变化 | 第25-27页 |
| ·结论与讨论 | 第27-28页 |
| 3 白腐菌总RNA提取方法的建立 | 第28-33页 |
| ·材料和方法 | 第28-29页 |
| ·菌种及培养方式 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-29页 |
| ·RNA质量的检验 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-31页 |
| ·RNA纯度及完整性检验 | 第29-30页 |
| ·总RNA提取方法的确立 | 第30-31页 |
| ·结论与讨论 | 第31-33页 |
| 4 白囊耙齿菌基因差显条件的优化 | 第33-41页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·RNA提取试剂 | 第33页 |
| ·cDNA第一链合成试剂 | 第33页 |
| ·PCR反应试剂 | 第33-34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·RNA的提取 | 第34页 |
| ·cDNA第一链合成条件的优化 | 第34页 |
| ·RT-PCR程序的优化 | 第34-35页 |
| ·引物的确定 | 第35-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-39页 |
| ·cDNA第一链合成条件的优化 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR程序的优化 | 第37页 |
| ·引物的确定 | 第37-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 5 白囊耙齿菌(Irpex lacteus)差异基因片段的克隆与序列分析 | 第41-60页 |
| ·材料与方法 | 第41-48页 |
| ·实验材料与试剂 | 第41页 |
| ·菌种培养及菌丝收集 | 第41-42页 |
| ·丝状真菌RNA的提取 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·RT-PCR反应程序的建立 | 第42页 |
| ·差异基因片段的克隆 | 第42-48页 |
| ·结果与分析 | 第48-57页 |
| ·回收条带的二次PCR扩增 | 第48-49页 |
| ·基因重组体的构建及初步筛选 | 第49页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定结果 | 第49-50页 |
| ·阳性重组体的测序 | 第50-53页 |
| ·各差异基因片段测序结果的同源性检索 | 第53页 |
| ·差异基因片段序列同源性分析 | 第53-57页 |
| ·结论与讨论 | 第57-60页 |
| ·白腐菌总RNA提取方法的建立 | 第57-58页 |
| ·随机引物的应用与DDRT-PCR反应程序的建立 | 第58-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87页 |