中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一部分 文献综述 植物黄萎病菌研究进展 | 第14-31页 |
1.生物学特性 | 第14-15页 |
2.生理分化 | 第15-17页 |
3.致病机理的研究 | 第17-18页 |
4.植物感病后的生理变化与抗病性的关系 | 第18-21页 |
5.黄萎病菌鉴定研究现状 | 第21-27页 |
5.1 形态学鉴定 | 第21-22页 |
5.2 营养亲和性鉴定 | 第22-23页 |
5.3 同工酶鉴定 | 第23-24页 |
5.4 免疫鉴定技术 | 第24页 |
5.5 RFLP鉴定 | 第24-25页 |
5.6 PCR鉴定 | 第25页 |
5.7 RAPD鉴定 | 第25-26页 |
5.8 ITS鉴定 | 第26-27页 |
6.ISSR技术的诞生及其应用 | 第27-31页 |
6.1 ISSR标记技术在育种中的应用 | 第28-29页 |
6.2 DNA指纹库的建立 | 第29页 |
6.3 遗传图谱的构建和基因定位 | 第29页 |
6.4 亲缘关系和遗传多样性研究 | 第29-31页 |
第二部分 研究报告 | 第31-77页 |
第一章 茄子黄萎病菌的收集及形态学鉴定 | 第31-41页 |
1.材料与方法 | 第32-34页 |
1.1 供试菌株及来源 | 第32页 |
1.2 分离纯化 | 第32-33页 |
1.3 单孢分离 | 第33页 |
1.4 菌落形态观察 | 第33页 |
1.5 生长温度测定 | 第33页 |
1.6 不同寄主致萎力的接种试验 | 第33页 |
1.7 分级标准及病情指数的计算方法 | 第33-34页 |
1.8 病原菌的形态观察 | 第34页 |
2.结果与分析 | 第34-39页 |
2.1 菌株的鉴定 | 第34-37页 |
2.1.1 病原菌菌落形态观察结果 | 第34-36页 |
2.1.2 温度试验与培养性状观察 | 第36页 |
2.1.3 不同寄主致萎力接种试验 | 第36-37页 |
2.2 培养性状和形态 | 第37-39页 |
2.2.1 菌株的性状差异的观察 | 第37-38页 |
2.2.2 对14个菌株的形态的差异的观察 | 第38-39页 |
3.讨论 | 第39-41页 |
第二章 茄子黄萎病菌致病力的鉴定 | 第41-52页 |
1.材料与方法 | 第42-44页 |
1.1 供试菌株及其来源 | 第42页 |
1.2 植物材料 | 第42页 |
1.3 孢子悬浮液的制备和接种 | 第42-43页 |
1.3.1 孢子悬浮液的制备 | 第42-43页 |
1.3.2 供试植株准备 | 第43页 |
1.3.3 接种方法 | 第43页 |
1.4 粗毒素制备和接种 | 第43-44页 |
1.4.1 粗毒数制备 | 第43页 |
1.4.2 粗毒素含量测定 | 第43-44页 |
1.4.3 供试植株的准备 | 第44页 |
1.4.4 粗毒素接种方法 | 第44页 |
1.5 数据处理 | 第44页 |
2.结果与分析 | 第44-50页 |
2.1 孢子悬浮液接种结果 | 第44-47页 |
2.2 毒素接种结果 | 第47-49页 |
2.3 茄子黄萎病菌的致病力与地理来源、形态、落叶与否的相关性 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
第三章 黄萎病菌粗毒素接种对感病和抗病茄子品种的一些酶类活性和光合特性的影响 | 第52-59页 |
1.材料与方法 | 第52-54页 |
1.1 植物材料的准备 | 第53页 |
1.2 粗毒素的制备与接种 | 第53页 |
1.2.1 粗毒素的制备 | 第53页 |
1.2.2 粗毒素接种 | 第53页 |
1.3 酶活的测定 | 第53-54页 |
1.3.1 SOD与POD酶液提取 | 第53页 |
1.3.2 PPO酶液提取 | 第53页 |
1.3.3 PAL酶液提取 | 第53页 |
1.3.4 酶活测定 | 第53-54页 |
1.4 净光合速率、细胞内CO_2浓度、蒸腾速率和气孔导度的测定 | 第54页 |
2.结果与分析 | 第54-58页 |
2.1 粗毒素接种对茄子抗感品种的叶片酶活性的影响 | 第54-56页 |
2.1.1 超氧化物歧化酶活性的变化 | 第54页 |
2.1.2 过氧化物酶活性的变化 | 第54页 |
2.1.3 苯丙氨酸解氨酶活性的变化 | 第54-55页 |
2.1.4 多酚氧化酶活性的变化 | 第55-56页 |
2.2 粗毒素接种对茄子抗感品种的叶片光合特性的影响 | 第56-58页 |
2.2.1 叶片蒸腾速率的变化 | 第56页 |
2.2.2 胞间CO_2浓度的变化 | 第56页 |
2.2.3 气孔导度的变化 | 第56页 |
2.2.4 净光合速率的变化 | 第56-58页 |
3.讨论 | 第58-59页 |
第四章 茄子黄萎病菌基因组ISSR指纹图谱分析 | 第59-77页 |
1.试验材料 | 第60-61页 |
1.1 供试材料 | 第60页 |
1.2 供试试剂 | 第60页 |
1.3 试验仪器 | 第60-61页 |
2.方法 | 第61-64页 |
2.1 菌丝体的培养 | 第61页 |
2.2 大丽轮枝菌DNA的提取 | 第61页 |
2.3 引物的配制 | 第61页 |
2.4 大丽轮枝菌ISSR-PCR最佳体系的建立 | 第61-63页 |
2.4.1 PCR反应体系的正交试验 | 第62页 |
2.4.2 模板DNA浓度的筛选 | 第62页 |
2.4.3 退火温度和反应循环次数的筛选 | 第62-63页 |
2.5 大丽轮枝菌基因组DNA的ISSR-PCR扩增 | 第63页 |
2.6 ISSR扩增产物的电泳检测 | 第63-64页 |
2.6.1 琼脂糖凝胶的制备 | 第63-64页 |
2.6.2 DNA的ISSR扩增结果检测 | 第64页 |
2.7 电泳结果的计算公式和统计分析方法 | 第64页 |
3.结果与分析 | 第64-75页 |
3.1 茄子黄萎病菌的DNA提取 | 第64-65页 |
3.2 茄子大丽轮枝菌的ISSR-PCR最佳体系的建立 | 第65-68页 |
3.2.1 ISSR-PCR反应体系的正交优化直观分析 | 第65-66页 |
3.2.2 模板DNA浓度对ISSR扩增结果的影响 | 第66-67页 |
3.2.3 退火温度和循环次数对扩增结果的影响 | 第67-68页 |
3.3 茄子大丽轮枝菌的ISSR分析 | 第68-75页 |
3.1.1 ISSR引物的筛选及对黄萎病菌的指纹扩增结果 | 第68-71页 |
3.3.2 ISSR扩增的位点与鉴别率的分析 | 第71页 |
3.3.3 茄子黄萎病菌基于ISSR的遗传多样性分析 | 第71-72页 |
3.3.4 茄子大丽轮枝菌基于ISSR的多态性和地理来源、形态类型、落叶型、致病力之间的相关性 | 第72-75页 |
4.讨论 | 第75-77页 |
4.1 茄子大丽轮枝菌的基因组DNA提取 | 第75页 |
4.2 ISSR的稳定性与可行性 | 第75-76页 |
4.3 ISSR多态性与表型分类的相关性 | 第76-77页 |
全文结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-87页 |
发表文章 | 第87-88页 |
致谢 | 第88页 |