| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-17页 |
| ·猪瘟和猪瘟病毒 | 第11页 |
| ·E2 蛋白及其功能 | 第11-12页 |
| ·RACK1 蛋白及其功能 | 第12-14页 |
| ·RACK1 蛋白简介 | 第12页 |
| ·RACK1 和 PKC | 第12-13页 |
| ·RACK1 和天然免疫 | 第13-14页 |
| ·RACK1 在病毒感染中的作用 | 第14页 |
| ·蛋白质相互作用的研究方法 | 第14-16页 |
| ·体外研究蛋白质相互作用的方法 | 第14页 |
| ·细胞内研究蛋白质相互作用的方法 | 第14-15页 |
| ·基于成像技术研究蛋白质相互作用的方法 | 第15-16页 |
| ·研究的背景和目的 | 第16-17页 |
| 第二章 猪瘟病毒 E2 蛋白和猪 RACK1 蛋白相互作用的鉴定 | 第17-37页 |
| ·材料和方法 | 第17-25页 |
| ·质粒、细胞、文库和菌株 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·PK-15 细胞 cDNA 的制备 | 第17-19页 |
| ·基因的扩增与克隆 | 第19-21页 |
| ·酵母菌 Y2H 感受态制备 | 第21页 |
| ·酵母菌转化 | 第21页 |
| ·诱饵质粒 pGBK-E2 的自激活和毒性检测 | 第21-22页 |
| ·酵母双杂交筛选与 E2 蛋白相互作用的宿主蛋白 | 第22页 |
| ·酵母质粒的提取 | 第22-23页 |
| ·阳性 PCR 鉴定及测序分析 | 第23页 |
| ·E2 和 RACK1 相互作用共转化验证 | 第23页 |
| ·GST-CD46 和 GST-E2 的诱导表达 | 第23页 |
| ·Western blot 检测 GST 融合蛋白的可溶性表达 | 第23-24页 |
| ·GST 融合蛋白琼脂糖珠的制备 | 第24页 |
| ·细胞培养和转染 | 第24页 |
| ·GST pull-down 试验 | 第24页 |
| ·Western blot 检测 | 第24页 |
| ·激光共聚焦检测 E2 和 RACK1 在 HEK293T 细胞内的定位 | 第24-25页 |
| ·截短表达的 RACK1 和 E2 共转化试验 | 第25页 |
| ·CSFV 感染对 PBMC 中 RACK1 蛋白表达的影响 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-34页 |
| ·基因的扩增及克隆结果 | 第25-29页 |
| ·诱饵质粒 pGBK-E2 自激活和毒性检测结果 | 第29页 |
| ·酵母双杂交筛选结果 | 第29页 |
| ·阳性克隆 PCR 鉴定和测序结果 | 第29页 |
| ·E2 和 RACK1 酵母共转化结果 | 第29-30页 |
| ·GST-E2、GST-CD46 可溶性表达鉴定 | 第30-31页 |
| ·GST 融合蛋白琼脂糖珠的制备 | 第31页 |
| ·GST pull-down 结果 | 第31-32页 |
| ·激光共聚焦结果 | 第32页 |
| ·截短的 RACK1 和 E2 共转化结果 | 第32-33页 |
| ·CSFV 感染下调 PBMC 中 RACK1 蛋白的表达 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 全文结论 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 作者简历 | 第44页 |
