| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 前言 | 第6-9页 |
| 材料和方法 | 第9-35页 |
| 一、材料和试剂 | 第9-16页 |
| 1．菌株、质粒、细胞株和实验动物 | 第9-10页 |
| 2．实验耗材及试剂 | 第10-11页 |
| 3．常用试剂配置 | 第11-15页 |
| 4．引物 | 第15-16页 |
| 二、主要的仪器设备 | 第16-17页 |
| 三、主要的计算机分析软件 | 第17-18页 |
| 四、技术路线与实验方法 | 第18-35页 |
| 1．设计思路与实验流程 | 第18页 |
| 2．TSSK4基因的克隆 | 第18-19页 |
| 3．组织表达谱分析 | 第19-22页 |
| 4．表达载体的构建 | 第22-23页 |
| 5．TSSK4多克隆抗体的制备 | 第23-26页 |
| 6．tssk4在不同发育期小鼠睾丸中的表达检测 | 第26页 |
| 7．免疫组化分析tssk4在小鼠睾丸中的定位 | 第26-27页 |
| 8．细胞培养和瞬时表达 | 第27页 |
| 9．酵母双杂交系统筛选与TSSK4相互作用的蛋白 | 第27-30页 |
| 10．GST pull-down实验 | 第30-32页 |
| 11．免疫荧光检测两种蛋白的细胞亚定位 | 第32页 |
| 12．TSSK4的体外激酶实验 | 第32-34页 |
| 13．双荧光素酶报告反应系统检测荧光素酶活性 | 第34-35页 |
| 结果 | 第35-63页 |
| 1．TSSK4基因的克隆和序列分析 | 第35-41页 |
| 2．TSSK4基因的染色体定位和基因组结构分析 | 第41-43页 |
| 3．TSSK4基因的组织表达谱分析 | 第43-44页 |
| 4．TSSK4多克隆抗体的制备 | 第44-48页 |
| 5．tssk4在不同发育期的小鼠睾丸中的表达 | 第48-49页 |
| 6．tssk4在小鼠睾丸中的定位 | 第49-51页 |
| 7．在酵母中TSSK4与CREB是一对互作蛋白 | 第51-53页 |
| 8．体外试验证明TSSK4能与CREB互作，并使其磷酸化 | 第53-58页 |
| 9．TSSK4对CRE参与的信号通路的影响 | 第58-63页 |
| 讨论 | 第63-66页 |
| 小结 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 综述 | 第71-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |