| 1 文献综述 | 第1-18页 |
| 1．1 类大麦属(Crithopsis)物种研究现状 | 第10-11页 |
| 1．2 HMW-GS的基因定位及遗传多样性 | 第11-13页 |
| 1．3 小麦近缘野生属种的HMW-GS变异类型及研究现状 | 第13-16页 |
| 1．4 高分子量谷蛋白亚基等位变异与品质的关系 | 第16-17页 |
| 1．5 PCR技术在鉴定HMW-GS中的应用 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2．1 材料 | 第18页 |
| 2．2 实验方法 | 第18-24页 |
| 2．2．1 谷蛋白的提取 | 第18-19页 |
| 2．2．1．1 普通提取法 | 第18页 |
| 2．2．1．2 选择性沉淀法 | 第18页 |
| 2．2．1．3 丙酮沉淀法 | 第18-19页 |
| 2．2．2 SDS-PAGE分析 | 第19-20页 |
| 2．2．3 基因组DNA提取 | 第20页 |
| 2．2．4 基因组DNA的PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2．2．5 PCR产物T-载体克隆 | 第21页 |
| 2．2．6 热击感受态的制备 | 第21页 |
| 2．2．7 转化大肠杆菌 | 第21-22页 |
| 2．2．8 阳性克隆筛选 | 第22页 |
| 2．2．9 定向缺失制备亚克隆 | 第22-23页 |
| 2．2．10 DNA序列测定与分析 | 第23页 |
| 2．2．11 克隆基因的体外表达 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-34页 |
| 3．1 SDS-PAGE分析 | 第24-26页 |
| 3．1．1 普通提取法的SDS-PAGE分析 | 第24-25页 |
| 3．1．2 选择性沉淀法的SDS-PAGE分析 | 第25页 |
| 3．1．3 丙酮沉淀法的SDS-PAGE分析 | 第25-26页 |
| 3．2 克隆及序列分析 | 第26-34页 |
| 3．2．1 PCR扩增及克隆 | 第26-27页 |
| 3．2．2 序列分析与比较 | 第27-31页 |
| 3．2．3 Kx亚基的体外表达 | 第31-32页 |
| 3．3．4 进化分析 | 第32-34页 |
| 4 讨论 | 第34-38页 |
| 4．1 小麦野生近缘属物种HMW-GS基因的分离 | 第34页 |
| 4．2 高分子量谷蛋白的特异提取 | 第34-35页 |
| 4．3 Ky基因的沉默 | 第35页 |
| 4．4 Kx亚基的电泳迁移率 | 第35-36页 |
| 4．5 HMW-GS基因的定位 | 第36-37页 |
| 4．6 HMW-GS对于品质的贡献 | 第37-38页 |
| 5 结语 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 在读期间发表文章 | 第45页 |