摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 病毒基因介导的转基因植株抗性机制的研究进展 | 第8-21页 |
1 蛋白水平的抗性 | 第8-11页 |
·外壳蛋白介导的抗性 | 第8-9页 |
·复酶介导的抗性 | 第9-10页 |
·运动蛋白介导的抗性 | 第10-11页 |
2 RNA水平的抗性 | 第11-21页 |
·RNA阈值模型(RNA threshold model) | 第13页 |
·异常RNA模式 | 第13页 |
·RNAi模型/dsRNA模型 | 第13-14页 |
·外源基因的甲基化 | 第14-17页 |
·外源基因的插入位置 | 第17-21页 |
第二章 不同结构形式烟草花叶病毒外壳蛋白基因介导的抗性机制 | 第21-48页 |
1 研究目的与意义 | 第21-22页 |
2 实验材料 | 第22-23页 |
·质粒载体 | 第22页 |
·各种酶及试剂 | 第22页 |
·植物材料 | 第22-23页 |
·毒源 | 第23页 |
·抗体 | 第23页 |
·寡核苷酸引物 | 第23页 |
3 实验方法 | 第23-32页 |
·植物表达载体的构建 | 第23-24页 |
·烟草的转化 | 第24-25页 |
·一步法小量提取植物总RNA和总DNA | 第25页 |
·基因组DNA的PCR扩增 | 第25页 |
·转基因植株的RT-PCR检测 | 第25-26页 |
·植物基因组DNA的大量提取 | 第26页 |
·放射性探针的制备--随机引物法标记探针 | 第26-27页 |
·Southern杂交 | 第27-28页 |
·植物组织总RNA的提取 | 第28页 |
·Northern杂交 | 第28页 |
·转基因植株的Western-blot检测 | 第28-29页 |
·转基因植株后代的Kan抗性筛选 | 第29页 |
·转基因植株的抗病性检测 | 第29页 |
·转基因植株的siRNA的提取 | 第29-30页 |
·siRNA的Northern-blot | 第30-32页 |
4 结果与分析 | 第32-45页 |
·转基因植株PCR检测 | 第32页 |
·转基因植株的RT-PCR检测 | 第32-34页 |
·转基因植株的Southern-blot检测 | 第34-35页 |
·转基因植株的Northern-blot检测 | 第35-37页 |
·转基因植株的Western-blot检测 | 第37页 |
·转基因植株的siRNA检测 | 第37-38页 |
·Kan筛选试验 | 第38-39页 |
·转基因烟草植株的攻毒试验及抗性分析 | 第39-43页 |
·外源基因的甲基化分析 | 第43-45页 |
5 讨论 | 第45-48页 |
第三章 抗病毒转基因西瓜的选育 | 第48-59页 |
1 研究背景及试验的目的与意义 | 第48-49页 |
2 实验材料 | 第49-50页 |
·质粒载体 | 第49页 |
·植物材料 | 第49页 |
·毒源 | 第49-50页 |
·抗体 | 第50页 |
·寡核苷酸引物 | 第50页 |
3 实验方法 | 第50-51页 |
·农杆菌转化 | 第50页 |
·农杆菌菌液的准备 | 第50-51页 |
·西瓜外植体的培养与遗传转化 | 第51页 |
·转基因西瓜植株的抗病性检测 | 第51页 |
4 结果与分析 | 第51-58页 |
·西瓜外植体的转化 | 第51-53页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第53页 |
·外源基因的Dot-blot和Southern-blot检测 | 第53-54页 |
·转基因后代植株的抗病性鉴定 | 第54-58页 |
5 讨论 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
缩略词(Abbreviation) | 第68-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
个人简介 | 第71页 |