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小麦—叶锈菌互作过程中[Ca~(2+)]cyt的动态变化研究

1 引言第1-10页
2 材料与方法第10-14页
   ·植物与真菌第10页
   ·叶锈菌侵染小麦不同时期叶肉细胞内钙离子定位第10-11页
     ·幼苗的培养和接种第10页
     ·电镜样品的制备与观察第10-11页
   ·小麦叶肉细胞原生质体的制备第11页
     ·供试小麦幼苗的培养第11页
     ·原生质体的制备及保存第11页
     ·原生质体活力及细胞去壁情况的检测第11页
   ·细胞间隙液(Intercellular Washing Fluid,IWF)的制备第11-12页
     ·透析袋的预处理第11页
     ·细胞间隙液(IWF)的提取第11-12页
     ·IWF的浓缩第12页
   ·钙离子荧光指示剂Fluo-3AM的装载及[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察第12-14页
     ·材料第12页
     ·原生质体装载钙离子荧光指示剂Fluo-3AM第12页
     ·[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察第12-13页
     ·图像、数据处理第13-14页
3 结果与分析第14-26页
   ·叶锈菌侵染过程中小麦叶肉细胞内钙离子的亚细胞定位第14-17页
     ·未接种小麦叶肉细胞内自由Ca~(2+)分布第14页
     ·亲和、不亲和组合中小麦叶肉细胞内自由Ca~(2+)分布第14-17页
   ·测定原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)水平变化的方法第17-20页
     ·原生质体活力及细胞去壁情况的检测第17-18页
     ·改进了的原生质体固定装置第18页
     ·Fluo-3AM装载的适宜条件第18-19页
     ·LSCM测定原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)变化方法的建立及验证第19-20页
   ·IWF处理后小麦叶肉细胞原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)变化的LSCM观察第20-21页
   ·IWF_(162)处理后,[Ca~(2+)]_(cyt)升高的钙来源第21-26页
     ·钙通道抑制剂对[Ca~(2+)]_(cyt)的影响第22-23页
     ·LIO原生质体经IWF_(162)刺激后[Ca~(2+)]_(cyt)升高的钙来源第23-26页
4 讨论第26-34页
   ·荧光指示剂孵育测定小麦叶肉细胞原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)方法的建立第26-27页
     ·钙离子荧光探针Fluo-3AM的正确装载是确保[Ca~(2+)]_(cyt)测定准确性的前提第26页
     ·新的原生质体固定方法的建立和其周围稳定环境的保持第26-27页
   ·钙信号介导小麦-叶锈菌互作过程第27-30页
     ·小麦-叶锈菌互作过程中钙离子的亚细胞定位第28-29页
     ·激发子-原生质体互作过程中[Ca~(2+)]_(cyt)的变化第29-30页
   ·抗性不同小麦叶肉细胞原生质体应答激发子刺激的Ca~(2+)信号特异性第30-31页
   ·[Ca~(2+)]_(cyt)升高的Ca~(2+)来源第31-34页
5 结论第34-35页
6 附录:细胞信号转导过程中微管骨架和钙离子的关系第35-45页
   ·导言第35-36页
   ·材料与方法第36-37页
     ·小麦叶肉细胞原生质体的制备第36页
     ·原生质体微管骨架的标记第36页
     ·图象的观察及处理第36页
     ·[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察第36-37页
   ·结果与分析第37-42页
     ·[Ca~(2+)]_(cyt)升高诱发微管骨架解聚第37页
     ·微管解聚诱发胞外钙离子内流第37-42页
   ·讨论第42-45页
7 参考文献第45-50页
8 在读期间发表的学术论文第50-60页
9 作者简历第60-61页
10 致谢第61页

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