1 引言 | 第1-10页 |
2 材料与方法 | 第10-14页 |
·植物与真菌 | 第10页 |
·叶锈菌侵染小麦不同时期叶肉细胞内钙离子定位 | 第10-11页 |
·幼苗的培养和接种 | 第10页 |
·电镜样品的制备与观察 | 第10-11页 |
·小麦叶肉细胞原生质体的制备 | 第11页 |
·供试小麦幼苗的培养 | 第11页 |
·原生质体的制备及保存 | 第11页 |
·原生质体活力及细胞去壁情况的检测 | 第11页 |
·细胞间隙液(Intercellular Washing Fluid,IWF)的制备 | 第11-12页 |
·透析袋的预处理 | 第11页 |
·细胞间隙液(IWF)的提取 | 第11-12页 |
·IWF的浓缩 | 第12页 |
·钙离子荧光指示剂Fluo-3AM的装载及[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察 | 第12-14页 |
·材料 | 第12页 |
·原生质体装载钙离子荧光指示剂Fluo-3AM | 第12页 |
·[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察 | 第12-13页 |
·图像、数据处理 | 第13-14页 |
3 结果与分析 | 第14-26页 |
·叶锈菌侵染过程中小麦叶肉细胞内钙离子的亚细胞定位 | 第14-17页 |
·未接种小麦叶肉细胞内自由Ca~(2+)分布 | 第14页 |
·亲和、不亲和组合中小麦叶肉细胞内自由Ca~(2+)分布 | 第14-17页 |
·测定原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)水平变化的方法 | 第17-20页 |
·原生质体活力及细胞去壁情况的检测 | 第17-18页 |
·改进了的原生质体固定装置 | 第18页 |
·Fluo-3AM装载的适宜条件 | 第18-19页 |
·LSCM测定原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)变化方法的建立及验证 | 第19-20页 |
·IWF处理后小麦叶肉细胞原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)变化的LSCM观察 | 第20-21页 |
·IWF_(162)处理后,[Ca~(2+)]_(cyt)升高的钙来源 | 第21-26页 |
·钙通道抑制剂对[Ca~(2+)]_(cyt)的影响 | 第22-23页 |
·LIO原生质体经IWF_(162)刺激后[Ca~(2+)]_(cyt)升高的钙来源 | 第23-26页 |
4 讨论 | 第26-34页 |
·荧光指示剂孵育测定小麦叶肉细胞原生质体[Ca~(2+)]_(cyt)方法的建立 | 第26-27页 |
·钙离子荧光探针Fluo-3AM的正确装载是确保[Ca~(2+)]_(cyt)测定准确性的前提 | 第26页 |
·新的原生质体固定方法的建立和其周围稳定环境的保持 | 第26-27页 |
·钙信号介导小麦-叶锈菌互作过程 | 第27-30页 |
·小麦-叶锈菌互作过程中钙离子的亚细胞定位 | 第28-29页 |
·激发子-原生质体互作过程中[Ca~(2+)]_(cyt)的变化 | 第29-30页 |
·抗性不同小麦叶肉细胞原生质体应答激发子刺激的Ca~(2+)信号特异性 | 第30-31页 |
·[Ca~(2+)]_(cyt)升高的Ca~(2+)来源 | 第31-34页 |
5 结论 | 第34-35页 |
6 附录:细胞信号转导过程中微管骨架和钙离子的关系 | 第35-45页 |
·导言 | 第35-36页 |
·材料与方法 | 第36-37页 |
·小麦叶肉细胞原生质体的制备 | 第36页 |
·原生质体微管骨架的标记 | 第36页 |
·图象的观察及处理 | 第36页 |
·[Ca~(2+)]_(cyt)动态变化的观察 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-42页 |
·[Ca~(2+)]_(cyt)升高诱发微管骨架解聚 | 第37页 |
·微管解聚诱发胞外钙离子内流 | 第37-42页 |
·讨论 | 第42-45页 |
7 参考文献 | 第45-50页 |
8 在读期间发表的学术论文 | 第50-60页 |
9 作者简历 | 第60-61页 |
10 致谢 | 第61页 |