猪轮状病毒JL94株VP4基因克隆及其主要抗原位点的原核表达
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-20页 |
| ·轮状病毒的生物学性状 | 第10-12页 |
| ·病毒粒子的形态结构 | 第10-11页 |
| ·轮状病毒的抗原及其分型 | 第11-12页 |
| ·轮状病毒的培养特性和理化学特性 | 第12页 |
| ·轮状病毒的分子生物学研究进展 | 第12-16页 |
| ·轮状病毒的基因组结构特征 | 第12-13页 |
| ·轮状病毒的遗传变异 | 第13-14页 |
| ·轮状病毒蛋白及其功能 | 第14-16页 |
| ·RV疫苗研究进展 | 第16-18页 |
| ·轮状病毒口服减毒活疫苗的研发 | 第16-17页 |
| ·轮状病毒多价重组疫苗的研发 | 第17页 |
| ·轮状病毒亚单位疫苗或多肽疫苗的研发 | 第17页 |
| ·轮状病毒基因疫苗的研发 | 第17-18页 |
| ·其他轮状病毒疫苗研发 | 第18页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·标本与质粒 | 第20页 |
| ·酶类及主要生化试剂 | 第20页 |
| ·引物合成 | 第20页 |
| ·主要实验仪器设备 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·病毒的增殖与电镜观察 | 第21页 |
| ·VP4全基因的克隆与序列测定 | 第21-23页 |
| ·VP4主要抗原位点基因的扩增与序列分析 | 第23-24页 |
| ·VP4主要抗原位点基因原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·VP4主要抗原位点基因在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第25-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-32页 |
| ·病毒的增殖与电镜观察 | 第27页 |
| ·病毒引起的MA104细胞病变 | 第27页 |
| ·病毒的电镜观察 | 第27页 |
| ·VP4全基因的克隆与序列测定 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR结果 | 第27-28页 |
| ·重组质粒pMD18-T-VP4鉴定结果 | 第28页 |
| ·VP4核苷酸序列测定及同源性比较 | 第28页 |
| ·VP4主要抗原位点基因的PCR扩增与序列分析 | 第28-29页 |
| ·重组质粒VP4-pGEX-6P-1的鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·VP4主要抗原位点基因在大肠杆菌中的表达 | 第30-32页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE | 第30页 |
| ·融合蛋白的表达效率测定 | 第30页 |
| ·表达产物的Western blot结果 | 第30-31页 |
| ·纯化后融合蛋白的Western blot检测 | 第31-32页 |
| 4 讨论 | 第32-36页 |
| ·病毒的增殖 | 第32页 |
| ·VP4全基因的克隆与序列比较 | 第32-33页 |
| ·VP4主要抗原位点基因的扩增和序列分析 | 第33-34页 |
| ·VP4主要抗原位点基因的表达及表达蛋白的纯化 | 第34-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 附录 | 第41-46页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47页 |
