| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-12页 |
| 1 引言 | 第12-24页 |
| ·miRNA的发现 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-24页 |
| ·miRNA的发现 | 第13-14页 |
| ·miRNA的来源 | 第14-16页 |
| ·miRNA的作用方式 | 第16页 |
| ·miRNA与肿瘤的关系 | 第16-24页 |
| 2 实验材料和方法 | 第24-41页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·细胞株 | 第24页 |
| ·主要溶液的配制 | 第24页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第24页 |
| ·主要试剂盒 | 第24-25页 |
| ·DNA合成及测序 | 第25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·实验方法 | 第26-41页 |
| ·基因组DNA提取 | 第26-27页 |
| ·PCR扩增反应 | 第27-31页 |
| ·T7启动子体外转录 | 第31页 |
| ·提取含有miRNA的总RNA | 第31-32页 |
| ·miRNA荧光定量PCR | 第32-35页 |
| ·荧光定量miRNA的靶基因 | 第35-38页 |
| ·miRNA靶基因启动子甲基化水平的检测 | 第38-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-50页 |
| ·PCR扩增反应 | 第41-42页 |
| ·LINE1 5'UTR基因全长的PCR扩增 | 第41页 |
| ·PCR扩增含T7启动子的LINE1 5'UTR全长 | 第41-42页 |
| ·T7启动子体外转录 | 第42-43页 |
| ·提取含有miRNA的总RNA | 第43页 |
| ·LINE1-5'UTR对部分miRNA表达的影响 | 第43-45页 |
| ·miRNA基因的△Ct平均值 | 第43-44页 |
| ·miRNA基因的△△Ct平均值 | 第44页 |
| ·miRNA基因的2~(-△△Ct) | 第44-45页 |
| ·miRNA靶基因的荧光定量PCR | 第45-46页 |
| ·miRNA靶基因的△Ct平均值 | 第45页 |
| ·miRNA靶基因的△ACt平均值 | 第45-46页 |
| ·miRNA靶基因的2-~(△△ct) | 第46页 |
| ·miRNA靶基因的甲基化检测 | 第46-50页 |
| ·miRNA靶基因甲基化检测柱形图 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-56页 |
| 附录A | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57-59页 |
| 学位论文数据集 | 第59页 |