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中国猪瘟兔化弱毒(脾淋毒)全长感染性cDNA的分子克隆

前言第1-10页
摘要第10-14页
文献综述第14-48页
 第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展第14-36页
   ·猪瘟的研究进展第14-20页
     ·猪瘟概述第14-15页
     ·猪瘟的流行和分布第15-16页
     ·猪瘟的临床症状和致病机理第16-18页
     ·猪瘟的检测第18-19页
     ·猪瘟的防制第19页
     ·猪瘟的传统疫苗第19-20页
   ·猪瘟病毒的病原学特性及研究进展第20-30页
     ·猪瘟病毒的形态及理化特性第20-21页
     ·猪瘟病毒的基因组结构及研究进展第21-23页
     ·猪瘟病毒的编码蛋白、抗原性及其功能第23-27页
     ·猪瘟病毒的进化和遗传分型第27-30页
   ·猪瘟病毒的增殖及细胞培养第30-36页
     ·猪瘟病毒的入侵及增殖第30-31页
     ·猪瘟病毒对宿主细胞的致病机理第31-32页
     ·猪瘟病毒的细胞培养第32-36页
 第二章 新型猪瘟疫苗的研究和应用前景第36-41页
   ·CSFV基因缺失型弱毒疫苗第36-37页
   ·CSFV亚单位疫苗第37-38页
   ·CSFV活载体重组疫苗第38-39页
   ·CSFV DNA疫苗第39-40页
   ·CSFV全长感染性cDNA标记疫苗第40-41页
 第三章 动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展第41-48页
   ·动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究概况第41-47页
   ·全长感染性cDNA的发展前景第47-48页
实验研究第48-69页
 第四章 中国猪瘟兔化弱毒株全基因组cDNA文库的构建及核苷酸序列分析第48-57页
   ·材料与方法第48-53页
     ·种毒及病毒的扩增第48页
     ·载体、试剂及引物的设计合成第48-50页
     ·RT-PCR第50-51页
     ·PCR产物的纯化回收第51页
     ·PCR产物与pMD18-T载体的克隆第51页
     ·大肠杆菌JM109感受态的制备第51-52页
     ·连接产物的转化第52页
     ·重组质粒的提取和鉴定第52-53页
     ·基因组cDNA重叠片段的测序第53页
     ·序列分析和同源性比较第53页
   ·结果第53-55页
     ·cDNA合成及PCR第53-54页
     ·PCR产物的克隆及序列测定第54页
     ·序列同源性比较第54-55页
   ·讨论第55-56页
  小结第56-57页
 第五章 中国猪瘟兔化弱毒(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆第57-62页
   ·材料与方法第57-59页
     ·材料第57页
     ·试剂与引物第57-58页
     ·改造片段的PCR及重组克隆第58页
     ·全长cDNA的克隆连接第58-59页
   ·结果第59-60页
     ·cDNA合成及PCR第59页
     ·PCR产物的克隆及序列测定第59页
     ·全长cDNA的克隆连接及鉴定第59-60页
   ·讨论第60-61页
  小结第61-62页
 第六章 中国猪瘟兔化弱毒(脾淋毒)全长cDNA的感染性初步鉴定第62-69页
   ·材料和方法第62-64页
     ·试验材料第62页
     ·所用试剂及限制性酶第62页
     ·全长cDNA模板的线性化和纯化回收第62-63页
     ·基因组RNA的体外转录、模板去除、纯化及其鉴定第63页
     ·基因组RNA的细胞转染及传代第63-64页
     ·全长cDNA感染性的鉴定第64页
   ·结果第64-67页
     ·转录产物的RT-PCR和nested-PCR鉴定结果第64-65页
     ·转染细胞总RNA的RT-PCR和nested-PCR鉴定结果第65-66页
     ·转染细胞的直接荧光抗体染色鉴定结果第66-67页
     ·转染细胞病毒抗原的夹心ELISA检测结果第67页
   ·讨论第67-68页
  小结第68-69页
研究结论第69-71页
致谢第71-72页
参考文献第72-87页
附录: 所测CSFV C-株(脾淋毒)核苷酸全序列酶标图第87-94页
作者简介第94页

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