前言 | 第1-10页 |
摘要 | 第10-14页 |
文献综述 | 第14-48页 |
第一章 猪瘟及猪瘟病毒的研究进展 | 第14-36页 |
·猪瘟的研究进展 | 第14-20页 |
·猪瘟概述 | 第14-15页 |
·猪瘟的流行和分布 | 第15-16页 |
·猪瘟的临床症状和致病机理 | 第16-18页 |
·猪瘟的检测 | 第18-19页 |
·猪瘟的防制 | 第19页 |
·猪瘟的传统疫苗 | 第19-20页 |
·猪瘟病毒的病原学特性及研究进展 | 第20-30页 |
·猪瘟病毒的形态及理化特性 | 第20-21页 |
·猪瘟病毒的基因组结构及研究进展 | 第21-23页 |
·猪瘟病毒的编码蛋白、抗原性及其功能 | 第23-27页 |
·猪瘟病毒的进化和遗传分型 | 第27-30页 |
·猪瘟病毒的增殖及细胞培养 | 第30-36页 |
·猪瘟病毒的入侵及增殖 | 第30-31页 |
·猪瘟病毒对宿主细胞的致病机理 | 第31-32页 |
·猪瘟病毒的细胞培养 | 第32-36页 |
第二章 新型猪瘟疫苗的研究和应用前景 | 第36-41页 |
·CSFV基因缺失型弱毒疫苗 | 第36-37页 |
·CSFV亚单位疫苗 | 第37-38页 |
·CSFV活载体重组疫苗 | 第38-39页 |
·CSFV DNA疫苗 | 第39-40页 |
·CSFV全长感染性cDNA标记疫苗 | 第40-41页 |
第三章 动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究进展 | 第41-48页 |
·动物RNA病毒全长感染性cDNA的研究概况 | 第41-47页 |
·全长感染性cDNA的发展前景 | 第47-48页 |
实验研究 | 第48-69页 |
第四章 中国猪瘟兔化弱毒株全基因组cDNA文库的构建及核苷酸序列分析 | 第48-57页 |
·材料与方法 | 第48-53页 |
·种毒及病毒的扩增 | 第48页 |
·载体、试剂及引物的设计合成 | 第48-50页 |
·RT-PCR | 第50-51页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第51页 |
·PCR产物与pMD18-T载体的克隆 | 第51页 |
·大肠杆菌JM109感受态的制备 | 第51-52页 |
·连接产物的转化 | 第52页 |
·重组质粒的提取和鉴定 | 第52-53页 |
·基因组cDNA重叠片段的测序 | 第53页 |
·序列分析和同源性比较 | 第53页 |
·结果 | 第53-55页 |
·cDNA合成及PCR | 第53-54页 |
·PCR产物的克隆及序列测定 | 第54页 |
·序列同源性比较 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55-56页 |
小结 | 第56-57页 |
第五章 中国猪瘟兔化弱毒(脾淋毒)全长cDNA的分子克隆 | 第57-62页 |
·材料与方法 | 第57-59页 |
·材料 | 第57页 |
·试剂与引物 | 第57-58页 |
·改造片段的PCR及重组克隆 | 第58页 |
·全长cDNA的克隆连接 | 第58-59页 |
·结果 | 第59-60页 |
·cDNA合成及PCR | 第59页 |
·PCR产物的克隆及序列测定 | 第59页 |
·全长cDNA的克隆连接及鉴定 | 第59-60页 |
·讨论 | 第60-61页 |
小结 | 第61-62页 |
第六章 中国猪瘟兔化弱毒(脾淋毒)全长cDNA的感染性初步鉴定 | 第62-69页 |
·材料和方法 | 第62-64页 |
·试验材料 | 第62页 |
·所用试剂及限制性酶 | 第62页 |
·全长cDNA模板的线性化和纯化回收 | 第62-63页 |
·基因组RNA的体外转录、模板去除、纯化及其鉴定 | 第63页 |
·基因组RNA的细胞转染及传代 | 第63-64页 |
·全长cDNA感染性的鉴定 | 第64页 |
·结果 | 第64-67页 |
·转录产物的RT-PCR和nested-PCR鉴定结果 | 第64-65页 |
·转染细胞总RNA的RT-PCR和nested-PCR鉴定结果 | 第65-66页 |
·转染细胞的直接荧光抗体染色鉴定结果 | 第66-67页 |
·转染细胞病毒抗原的夹心ELISA检测结果 | 第67页 |
·讨论 | 第67-68页 |
小结 | 第68-69页 |
研究结论 | 第69-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-87页 |
附录: 所测CSFV C-株(脾淋毒)核苷酸全序列酶标图 | 第87-94页 |
作者简介 | 第94页 |