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玉米大斑病菌MAPK级联途径中StSTE12基因的克隆与功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
1 引言第10-13页
2 材料和方法第13-25页
   ·供试菌株与供试质粒第13页
   ·试剂与溶液第13-14页
   ·供试培养基第14页
   ·仪器与设备第14页
   ·玉米大斑病菌StSTE12 基因的克隆及生物信息学分析第14-17页
     ·玉米大斑病菌基因组DNA 提取第14-15页
     ·STE12 基因同源片段的扩增第15页
     ·PCR 扩增产物的凝胶回收第15页
     ·PCR 扩增产物的克隆与测序第15页
     ·利用Genome Walking 技术获得StSTE12 基因侧翼序列第15-17页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因的生物信息学分析第17页
   ·酵母双杂交法鉴定StSte12 与StStk2 的互作关系第17-18页
     ·玉米大斑病菌总RNA 的提取及cDNA 的合成第17页
     ·酵母双杂交载体的构建第17页
     ·StSte12 的转录自激活分析第17-18页
     ·StSte12 与StStk2 的互作关系分析第18页
   ·酵母异源互补法分析StSTE12 基因的功能第18页
     ·StSTE12 基因功能互补载体的构建第18页
     ·StSTE12 基因的酵母遗传转化及转化子的筛选第18页
     ·StSTE12 功能互补转化子的生长特性分析第18页
   ·StSTE12 基因RNAi 突变体的创制及分析第18-25页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因RNAi 载体的构建第18-20页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因RNAi 转化子的获得第20-21页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因RNAi 转化子的验证第21-22页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因RNAi 转化子的分析第22-25页
3 结果与分析第25-45页
   ·玉米大斑病菌StSTE12 基因的克隆与生物信息学分析第25-30页
     ·STE12 基因同源片段的扩增结果第25页
     ·StSTE12 基因片段的测序结果第25-26页
     ·StSTE12 基因侧翼序列的Genome walking 扩增结果第26-28页
     ·StSTE12 基因全长的扩增结果第28-29页
     ·玉米大斑病菌StSTE12 基因的生物信息学分析第29-30页
   ·StSte12 与StStk2 的互作关系第30-32页
     ·StSTE12 基因与StSTK2 基因酵母双杂交载体的构建第30-31页
     ·StSte12 转录自激活活性分析第31页
     ·StSte12 与StStk2 的互作关系分析第31-32页
   ·酵母异源互补法初步鉴定StSTE12 基因的功能第32-34页
     ·StSTE12 基因功能互补载体的构建第32页
     ·StSTE12 基因功能互补转化子的筛选第32-33页
     ·StSTE12 功能互补转化子的生长特性分析第33-34页
   ·StSTE12 基因RNAi 载体的构建及转化子的筛选第34-45页
     ·StSTE12 基因正向片段和反向片段的PCR 扩增第34-35页
     ·重组载体的酶切验证第35页
     ·RNAi 转化子的筛选第35-36页
     ·RNAi 转化子的PCR 验证第36页
     ·RNAi 转化子的RT-PCR 验证第36-37页
     ·RNAi 转化子的形态观察第37-38页
     ·RNAi 转化子菌丝的显微观察第38页
     ·RNAi 转化子菌丝生长速度第38-39页
     ·RNAi 转化子分生孢子产量第39页
     ·RNAi 转化子菌丝黑色素含量第39-40页
     ·RNAi 转化子HT-毒素活性第40页
     ·RNAi 转化子对玉米叶片的致病力第40-41页
     ·RNAi 转化子侵染寄主组织组织病理学分析第41页
     ·RNAi 转化子穿透能力的观察第41-42页
     ·RNAi 转化子附着胞穿透能力的显微观察第42-43页
     ·RNAi 转化子附着胞膨压第43-45页
4 讨论第45-48页
   ·StSTE12 基因与植物病原真菌生长发育及致病性的关系第45-46页
   ·植物病原真菌转录因子Ste12-like 被活化的机制第46页
   ·受转录因子Ste12-like 调控的基因第46-48页
5 结论第48-49页
参考文献第49-54页
在读期间发表的学术论文第54-55页
作者简历第55-56页
致谢第56-57页

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