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利用指纹图谱技术鉴定新疆油葵杂交种纯度的研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
文献综述第11-25页
 一、 向日葵鉴定方法概述第11-13页
  (一) 形态学鉴定法第11-12页
   1. 种子形态观察法第11-12页
   2. 幼苗形态鉴别法第12页
   3. 田间小区鉴定法第12页
  (二) 生化鉴定法第12-13页
  (三) 分子标记鉴定法第13页
 二、 蛋白质电泳技术在品种鉴定和纯度检验上的应用第13-18页
  (一) 利用种子储藏蛋白鉴定品种纯度第13-15页
   1. 种子储藏蛋白电泳技术第13-14页
   2. 应用研究进展第14-15页
   3. 储藏蛋白电泳在向日葵杂交种纯度鉴定上的应用第15页
  (二) 利用同工酶鉴定品种第15-18页
   1. 同工酶的概念和应用原理第15-16页
   2. 同工酶电泳的应用第16-17页
   3. 同工酶电泳技术在向日葵杂种鉴定上的应用第17-18页
 三、 RAPD分子标记技术研究进展及在种子纯度检验上的应用第18-22页
  (一) RAPD技术的研究及应用现状第18-20页
   1. 遗传图谱构建第18-19页
   2. 系统学、遗传多样性及种质分类研究第19页
   3. 标记、定位目的基因第19-20页
  (二) 利用RAPD标记技术进行品种纯度的鉴定第20页
  (三) RAPD技术在品种真伪及纯度鉴定中的应用第20-21页
  (四) 影响RAPD技术深入应用的因素及RAPD程序的优化第21-22页
 四、 其他分子标记技术在品种鉴定上的应用第22-24页
  (一) RAPD-DGGE第22页
  (二) 限制性酶切片段长度多态性第22-23页
  (三) 扩增片段长度多态性第23-24页
 五、 本研究拟解决的关键问题第24-25页
第一章 利用蛋白质电泳技术对新疆油用向日葵杂交种进行纯度鉴定的研究第25-34页
 1. 前言第25页
 2. 材料和方法第25-27页
  2.1 实验材料第25-26页
   2.1.1 植物材料第25页
   2.1.2 生化试剂第25-26页
  2.2 研究方法第26-27页
   2.2.1 向日葵种子贮藏蛋白的提取第26页
   2.2.2 向日葵种子贮藏蛋白的凝胶电泳第26页
   2.2.3 向日葵子叶同工酶的提取第26页
   2.2.4 油用向日葵酯酶和过氧化物酶的凝胶电泳第26-27页
   2.2.5 同工酶染色第27页
 3. 结果与分析第27-31页
  3.1 同工酶和种子蛋白凝胶浓度及交联度的确定第27-28页
  3.2 种子贮藏蛋白电泳结果第28-29页
  3.3 过氧化物酶电泳结果第29-30页
  3.4 酯酶电泳结果第30-31页
 4. 讨论第31-34页
  4.1 凝胶的浓度和交联度对条带的清晰度和分辨率有较大影响第31页
  4.2 合适的蛋白提取剂及电泳系统是利用种子贮藏蛋白进行杂交种鉴定的前提第31-32页
  4.3 利用同工酶进行油用向日葵杂种纯度鉴定是可行的第32-34页
第二章 向日葵总DNA不同提取方法比较及在RAPD-PCR中的应用研究第34-39页
 1. 前言第34页
 2. 材料和方法第34-36页
  2.1 实验材料第34页
   2.1.1 植物材料第34页
   2.1.2 生化试剂及仪器第34页
  2.2 PCR扩增反应及程序第34-35页
  2.3 提取方法第35-36页
   2.3.1 CTAB法第35页
   2.3.2 SDS法第35-36页
 3. 结果与分析第36-37页
  3.1 用CTAB法和SDS法对向日葵真叶及种子进行总DNA的提取第36页
  3.2 RAPD-PCR扩增结果第36-37页
 4. 讨论第37-39页
  4.1 利用SDS法从向日葵中提取总DNA是一条快速、简便、有效的方法第37-38页
  4.2 掌握提取过程的关键要素是获得高质量DNA的前提第38-39页
第三章 油葵RAPD-PCR反应条件的优化及RAPD技术在油葵杂交种纯度检验上的应用第39-51页
 1. 前言第39页
 2. 材料和方法第39-40页
  2.1 材料第39页
  2.2 生化试剂与仪器第39-40页
  2.3 方法第40页
   2.3.1 油葵基因组DNA的提取第40页
   2.3.2 RAPD-PCR反应条件第40页
 3. 结果与分析第40-46页
  3.1 油葵RAPD反映体系的建立第40-43页
   3.1.1 模板浓度的确定及模板浓度对扩增结果的影响第40-41页
   3.1.2 MgCl2浓度及TaqDNA聚合酶浓度的确定第41-42页
   3.1.3 dNTPs浓度的确定第42页
   3.1.4 引物浓度的确定第42页
   3.1.5 退火温度的确定第42-43页
  3.2 不同品种最佳引物的筛选第43-46页
  3.3 生产用杂交种的纯度鉴定第46页
 4. 讨论第46-51页
  4.1 RAPD技术中的相关影响因素的探讨第46-49页
   4.1.1 模板浓度及纯度的控制第46-47页
   4.1.2 Tap酶的浓度及质量第47页
   4.1.3 扩增程序第47-48页
   4.1.4 污染问题第48页
   4.1.5 扩增条带的确定第48-49页
  4.2 RAPD技术的可靠性第49页
  4.3 RAPD分子标记技术在种子纯度检验方面的优越性第49-51页
结论第51-52页
参考文献第52-58页

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