中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
文献综述 | 第11-25页 |
一、 向日葵鉴定方法概述 | 第11-13页 |
(一) 形态学鉴定法 | 第11-12页 |
1. 种子形态观察法 | 第11-12页 |
2. 幼苗形态鉴别法 | 第12页 |
3. 田间小区鉴定法 | 第12页 |
(二) 生化鉴定法 | 第12-13页 |
(三) 分子标记鉴定法 | 第13页 |
二、 蛋白质电泳技术在品种鉴定和纯度检验上的应用 | 第13-18页 |
(一) 利用种子储藏蛋白鉴定品种纯度 | 第13-15页 |
1. 种子储藏蛋白电泳技术 | 第13-14页 |
2. 应用研究进展 | 第14-15页 |
3. 储藏蛋白电泳在向日葵杂交种纯度鉴定上的应用 | 第15页 |
(二) 利用同工酶鉴定品种 | 第15-18页 |
1. 同工酶的概念和应用原理 | 第15-16页 |
2. 同工酶电泳的应用 | 第16-17页 |
3. 同工酶电泳技术在向日葵杂种鉴定上的应用 | 第17-18页 |
三、 RAPD分子标记技术研究进展及在种子纯度检验上的应用 | 第18-22页 |
(一) RAPD技术的研究及应用现状 | 第18-20页 |
1. 遗传图谱构建 | 第18-19页 |
2. 系统学、遗传多样性及种质分类研究 | 第19页 |
3. 标记、定位目的基因 | 第19-20页 |
(二) 利用RAPD标记技术进行品种纯度的鉴定 | 第20页 |
(三) RAPD技术在品种真伪及纯度鉴定中的应用 | 第20-21页 |
(四) 影响RAPD技术深入应用的因素及RAPD程序的优化 | 第21-22页 |
四、 其他分子标记技术在品种鉴定上的应用 | 第22-24页 |
(一) RAPD-DGGE | 第22页 |
(二) 限制性酶切片段长度多态性 | 第22-23页 |
(三) 扩增片段长度多态性 | 第23-24页 |
五、 本研究拟解决的关键问题 | 第24-25页 |
第一章 利用蛋白质电泳技术对新疆油用向日葵杂交种进行纯度鉴定的研究 | 第25-34页 |
1. 前言 | 第25页 |
2. 材料和方法 | 第25-27页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第25页 |
2.1.2 生化试剂 | 第25-26页 |
2.2 研究方法 | 第26-27页 |
2.2.1 向日葵种子贮藏蛋白的提取 | 第26页 |
2.2.2 向日葵种子贮藏蛋白的凝胶电泳 | 第26页 |
2.2.3 向日葵子叶同工酶的提取 | 第26页 |
2.2.4 油用向日葵酯酶和过氧化物酶的凝胶电泳 | 第26-27页 |
2.2.5 同工酶染色 | 第27页 |
3. 结果与分析 | 第27-31页 |
3.1 同工酶和种子蛋白凝胶浓度及交联度的确定 | 第27-28页 |
3.2 种子贮藏蛋白电泳结果 | 第28-29页 |
3.3 过氧化物酶电泳结果 | 第29-30页 |
3.4 酯酶电泳结果 | 第30-31页 |
4. 讨论 | 第31-34页 |
4.1 凝胶的浓度和交联度对条带的清晰度和分辨率有较大影响 | 第31页 |
4.2 合适的蛋白提取剂及电泳系统是利用种子贮藏蛋白进行杂交种鉴定的前提 | 第31-32页 |
4.3 利用同工酶进行油用向日葵杂种纯度鉴定是可行的 | 第32-34页 |
第二章 向日葵总DNA不同提取方法比较及在RAPD-PCR中的应用研究 | 第34-39页 |
1. 前言 | 第34页 |
2. 材料和方法 | 第34-36页 |
2.1 实验材料 | 第34页 |
2.1.1 植物材料 | 第34页 |
2.1.2 生化试剂及仪器 | 第34页 |
2.2 PCR扩增反应及程序 | 第34-35页 |
2.3 提取方法 | 第35-36页 |
2.3.1 CTAB法 | 第35页 |
2.3.2 SDS法 | 第35-36页 |
3. 结果与分析 | 第36-37页 |
3.1 用CTAB法和SDS法对向日葵真叶及种子进行总DNA的提取 | 第36页 |
3.2 RAPD-PCR扩增结果 | 第36-37页 |
4. 讨论 | 第37-39页 |
4.1 利用SDS法从向日葵中提取总DNA是一条快速、简便、有效的方法 | 第37-38页 |
4.2 掌握提取过程的关键要素是获得高质量DNA的前提 | 第38-39页 |
第三章 油葵RAPD-PCR反应条件的优化及RAPD技术在油葵杂交种纯度检验上的应用 | 第39-51页 |
1. 前言 | 第39页 |
2. 材料和方法 | 第39-40页 |
2.1 材料 | 第39页 |
2.2 生化试剂与仪器 | 第39-40页 |
2.3 方法 | 第40页 |
2.3.1 油葵基因组DNA的提取 | 第40页 |
2.3.2 RAPD-PCR反应条件 | 第40页 |
3. 结果与分析 | 第40-46页 |
3.1 油葵RAPD反映体系的建立 | 第40-43页 |
3.1.1 模板浓度的确定及模板浓度对扩增结果的影响 | 第40-41页 |
3.1.2 MgCl2浓度及TaqDNA聚合酶浓度的确定 | 第41-42页 |
3.1.3 dNTPs浓度的确定 | 第42页 |
3.1.4 引物浓度的确定 | 第42页 |
3.1.5 退火温度的确定 | 第42-43页 |
3.2 不同品种最佳引物的筛选 | 第43-46页 |
3.3 生产用杂交种的纯度鉴定 | 第46页 |
4. 讨论 | 第46-51页 |
4.1 RAPD技术中的相关影响因素的探讨 | 第46-49页 |
4.1.1 模板浓度及纯度的控制 | 第46-47页 |
4.1.2 Tap酶的浓度及质量 | 第47页 |
4.1.3 扩增程序 | 第47-48页 |
4.1.4 污染问题 | 第48页 |
4.1.5 扩增条带的确定 | 第48-49页 |
4.2 RAPD技术的可靠性 | 第49页 |
4.3 RAPD分子标记技术在种子纯度检验方面的优越性 | 第49-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |