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茄青枯假单胞菌寄主花生特异性毒性基因的功能分析

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
第一章 前言第8-19页
第二章 材料与方法第19-33页
 2.1 菌株及质粒第19-22页
 2.2 培养基及培养条件第22-23页
 2.3 抗生素第23-24页
 2.4 溶液、缓冲液和试剂第24页
 2.5 DNA沉淀第24页
 2.6 DNA溶液中蛋白质及RNA的去除第24-25页
 2.7 DNA的提取第25-27页
 2.8 质粒DNA的转化第27页
 2.9 琼脂糖凝胶电泳第27-28页
 2.10 电透析法回收DNA片段第28页
 2.11 DNA连接第28-29页
 2.12 DNA自动测序系统测定DNA序列第29页
 2.13 三亲本接合(triparental conjugation)第29-30页
 2.14 花生植株的致病性试验第30页
 2.15 聚合酶链式反应(PCR)第30页
 2.16 重组PCR(recombinent PCR)第30-31页
 2.17 外切核酸酶Ⅲ缺失克隆的获得第31-33页
第三章 包含花生寄主特异性毒性基因(hsv gene)的3.0 kb DNA片段的克隆第33-41页
 3.1 引言第33-34页
 3.2 pGX1439的亚克隆分析第34-40页
 3.3 结果第40页
 3.4 讨论第40-41页
第四章 花生寄主特异性毒性基因(hsv gene)启动子的定位第41-52页
 4.1 引言第41页
 4.2 PCR法获得ORF3中第一个ATG前可能的启动子片段的正反序列第41-43页
 4.3 PCR法获得ORF3中第二个ATG前可能的启动子片段的正反序列第43-44页
 4.4 PCR法获得Tn5-gusA5上gusA基因第44-46页
 4.5 利用重组PCR法将两个ATG前的正反方向序列与gusA报告基因相连接第46-48页
 4.6 将重组片段连接到载体pGEM-3Zf(+)上,构建pGX1+,pGX1-,pGX2+,pGX2-第48页
 4.7 质粒pGX31+,pGX31-,pGX2+,pGX2-的构建第48-49页
 4.8 三亲本接合导入茄假单胞菌第49-50页
 4.9 通过报告基因的表达对启动子进行定位第50-51页
 4.10 结果第51页
 4.11 讨论第51-52页
第五章 茄青枯假单胞菌高效表达载体构建的前期工作第52-67页
 5.1 引言第52页
 5.2 T2015内源质粒的获得第52-53页
 5.3 T2015内源质粒序列的分析第53-55页
 5.4 讨论第55-67页

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