英文缩写词表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
前言 | 第11-12页 |
文献回顾 | 第12-26页 |
利用基因表达差异克隆新基因技术的进展 | 第12-26页 |
一、差异筛选 | 第13页 |
二、消减杂交 | 第13-14页 |
三、RNA随机引物PCR指印法 | 第14-15页 |
四、mRNA差异显示PCR | 第15-25页 |
(一) mRNA差异显示PCR的基本原理和方法 | 第15-17页 |
(二) mRNA差异显示PCR技术在实际应用中存在的问题 | 第17-18页 |
(三) mRNA差异显示PCR的进一步优化和完善 | 第18-23页 |
(四) mRNA差异显示PCR的应用状况与前景 | 第23-25页 |
五、从差示PCR衍生的几种新技术 | 第25-26页 |
材料和方法 | 第26-39页 |
一、实验材料和仪器设备 | 第26-27页 |
(一) 实验材料 | 第26-27页 |
(二) 仪器设备 | 第27页 |
二、主要实验方法 | 第27-39页 |
(一) 常规实验方法 | 第27-29页 |
(二) mRNA差异显示PCR | 第29-33页 |
(三) cDNA文库的筛选 | 第33-37页 |
(四) 计算机序列分析 | 第37-39页 |
实验结果 | 第39-69页 |
一、mRNA差异显示PCR | 第39-51页 |
(一) 差示PCR | 第39-41页 |
(二) 二次PCR | 第41页 |
(三) 二次PCR产物的克隆 | 第41-42页 |
(四) 反向Northern杂交 | 第42页 |
(五) 胎肝中差异片段的序列测定 | 第42-48页 |
(六) 差异片段序列的计算机分析 | 第48-51页 |
二、cDNA文库的筛选 | 第51-58页 |
(一) 噬斑原位杂交 | 第51-52页 |
(二) 杂交阳性噬菌体中插入片段的PCR扩增 | 第52页 |
(三) 噬菌体中插入片段的序列测定 | 第52-58页 |
三、计算机序列分析 | 第58-69页 |
(一) 基因序列同源性分析 | 第58-61页 |
(二) 局部组成复杂性(LCC)分析 | 第61页 |
(三) 完整开放读框的分析 | 第61-62页 |
(四) 基因序列的蛋白质翻译分析 | 第62-65页 |
(五) 对HFL-1基因功能的初步探讨 | 第65-69页 |
讨论 | 第69-76页 |
一、关于mRNA差异显示PCR | 第69-72页 |
二、cDNA噬菌体文库的筛选 | 第72-73页 |
三、HFL-1基因序列的计算机分析 | 第73-76页 |
小结 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-83页 |