| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-8页 |
| 缩略语表 | 第8-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-26页 |
| 1. Caveolae 的结构和功能 | 第15-16页 |
| ·Caveolae 的结构特征 | 第15页 |
| ·Caveolae 的标志性蛋白——Caveolins | 第15-16页 |
| ·Caveolin-1 蛋白的结构及功能特点 | 第16页 |
| 2. 乳腺细胞中雌激素受体（ER）的分类及其功能结构特征 | 第16-17页 |
| 3. 质膜雌激素受体mER 的发现及其行使的生物学功能 | 第17-18页 |
| ·质膜雌激素受体mER 的发现 | 第17页 |
| ·质膜雌激素受体 mERα 新亚型的发现及其行使的生物学功能 | 第17-18页 |
| 4. 膜雌激素受体（mER）的细胞亚定位 | 第18-19页 |
| 5. Caveolin-1 与mER 介导的信号转导通路的关系 | 第19-21页 |
| ·Caveolin-1 与mER 介导的ERK/MAPK 信号转导通路的关系 | 第19-20页 |
| ·Caveolin-1 与 mER 介导的 PI3K/AKT 信号转导通路的关系 | 第20-21页 |
| 6. 展望 | 第21-22页 |
| 参考文献（References） | 第22-26页 |
| 第二章 Caveolin-1 基因沉默细胞模型的建立 | 第26-44页 |
| 前言 | 第26页 |
| 1 材料和方法 | 第26-36页 |
| ·材料与仪器 | 第26-27页 |
| ·材料与试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-36页 |
| ·细胞培养 | 第27-28页 |
| ·主要试剂配置 | 第27-28页 |
| ·细胞培养条件 | 第28页 |
| ·siRNA 的稳定转染 | 第28-31页 |
| ·siRNA 转染质粒的获得（碱裂解法） | 第28-31页 |
| ·主要试剂配置 | 第28-29页 |
| ·细菌的培养和收集 | 第29页 |
| ·质粒DNA 快速提取 | 第29页 |
| ·电泳凝胶的配制 | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第30页 |
| ·DNA 浓度的测定 | 第30-31页 |
| ·目的质粒的转染 | 第31页 |
| ·蛋白样品制备与定量 | 第31-32页 |
| ·主要试剂配置 | 第31-32页 |
| ·蛋白提取 | 第32页 |
| ·蛋白定量 | 第32页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第32-34页 |
| ·主要试剂配制 | 第32-33页 |
| ·胶的制备 | 第33页 |
| ·样品的制备 | 第33页 |
| ·电泳 | 第33-34页 |
| ·蛋白质免疫印迹（Western Blot） | 第34-35页 |
| ·主要试剂配置 | 第34页 |
| ·免疫印迹 | 第34-35页 |
| ·转膜 | 第34-35页 |
| ·封闭 | 第35页 |
| ·一抗结合 | 第35页 |
| ·二抗结合 | 第35页 |
| ·ECL 显色 | 第35页 |
| ·MTT 法测定细胞倍增时间 | 第35页 |
| ·统计分析 | 第35-36页 |
| 2 结果 | 第36-40页 |
| ·Caveolin-1-siRNA 质粒的扩增和鉴定 | 第36页 |
| ·Cav-1 基因沉默细胞模型的建立 | 第36-37页 |
| ·Cav-1-siRNA 特异性抑制乳腺上皮细胞Cav-1 蛋白的表达 | 第37页 |
| ·Cav-1 基因沉默对乳腺上皮细胞增殖的影响 | 第37-40页 |
| 3 讨论 | 第40-41页 |
| 4 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献（References） | 第42-44页 |
| 第三章 Cav-1 特异性 siRNA 对不同雌激素受体亚型表达的影响 | 第44-53页 |
| 前言 | 第44-45页 |
| 1 材料和方法 | 第45-46页 |
| ·材料与仪器 | 第45页 |
| ·材料与试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器（同第二章，略） | 第45页 |
| ·方法 | 第45-46页 |
| ·细胞培养（同第二章，略） | 第45页 |
| ·siRNA 的瞬时转染 | 第45-46页 |
| ·siRNA 转染质粒的获得（碱裂解法）（同第二章，略） | 第45页 |
| ·目的质粒的转染 | 第45-46页 |
| ·蛋白样品制备与定量（同第二章，略） | 第46页 |
| ·蛋白质免疫共沉淀 | 第46页 |
| ·Western Blot（同第二章，略） | 第46页 |
| 2 结果 | 第46-49页 |
| ·MCF 10A 和 ST3 细胞中 Cav-1 与 ERα 的相互作用的比较 | 第46-47页 |
| ·Cav-1-siRNA 瞬时转染对 MCF10A 细胞 ERα 表达的影响 | 第47页 |
| ·Caveolin-1 基因沉默模型（7SD_8）ERα 的表达 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-50页 |
| 4 小结 | 第50-52页 |
| 参考文献（Reference） | 第52-53页 |
| 第四章 Cav-1 特异性 siRNA 对 ER 介导的信号转导通路的影响 | 第53-67页 |
| 前言 | 第53-54页 |
| 1 材料与方法 | 第54-55页 |
| ·材料与仪器 | 第54页 |
| ·材料与试剂 | 第54页 |
| ·主要仪器（同第二章，略） | 第54页 |
| ·方法 | 第54-55页 |
| ·细胞培养 | 第54页 |
| ·蛋白样品制备与定量（同第二章，略） | 第54页 |
| ·siRNA 的瞬时转染 | 第54-55页 |
| ·siRNA 转染质粒的获得（碱裂解法）（同第二章，略） | 第54页 |
| ·目的质粒的转染 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-60页 |
| ·Cav-1 特异性 siRNA 对 Ras-MAPK 信号转导通路的影响 | 第55页 |
| ·Cav-1 特异性 siRNA 对 PI3K/AKT 信号转导通路的影响 | 第55-56页 |
| ·Cav-1 特异性 siRNA 对 PI3K 蛋白表达水平的影响 | 第55页 |
| ·Cav-1 特异性siRNA 对AKT 表达水平的影响 | 第55-56页 |
| ·Cav-1 特异性siRNA 对P21 表达水平的影响 | 第56页 |
| ·Cav-1 特异性 siRNA 对 Cyclin D1 表达水平的影响 | 第56-60页 |
| 3 讨论 | 第60-62页 |
| 4 小结 | 第62-64页 |
| 参考文献（References） | 第64-67页 |
| 结论 | 第67-68页 |
| 附件1 | 第68-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
