| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| ·甘油的性质及研究现状 | 第8-10页 |
| ·甘油的理化性质及主要用途 | 第8页 |
| ·甘油的生产方法 | 第8-9页 |
| ·产甘油假丝酵母 | 第9页 |
| ·甘油的合成途径 | 第9-10页 |
| ·3-磷酸甘油脱氢酶基因的性质及研究现状 | 第10-11页 |
| ·启动子的性质、分类及研究现状 | 第11-15页 |
| ·报告基因 | 第15-16页 |
| ·3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子的研究现状 | 第16页 |
| ·本研究的立题背景和内容 | 第16-18页 |
| 第二章 产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD启动子的克隆及酵母表达载体的构建 | 第18-27页 |
| ·材料与方法 | 第18-22页 |
| ·菌株和质粒 | 第18页 |
| ·工具酶与试剂 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·产甘油假丝酵母染色体 DNA 的制备 | 第19页 |
| ·PCR 引物 | 第19页 |
| ·PCR 扩增反应体系及反应条件 | 第19-20页 |
| ·PCR 产物胶回收 | 第20页 |
| ·质粒 DNA 的提取 | 第20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第20-21页 |
| ·酿酒酵母感受态的制备 | 第21页 |
| ·电击转化酿酒酵母 | 第21页 |
| ·稳定转化子的筛选 | 第21页 |
| ·绿色荧光蛋白的检测 | 第21-22页 |
| ·结果与讨论 | 第22-26页 |
| ·启动子 PCggpd 的克隆和测序 | 第22页 |
| ·含有报告基因gfp 的酵母表达载体pYX212-zeocin-PCggpd-gfp 的构建 | 第22-23页 |
| ·对照重组质粒pYX212-zeocin -gfp 的构建 | 第23-25页 |
| ·酿酒酵母阳性转化子的获得及初步鉴定 | 第25页 |
| ·重组酿酒酵母 S. cerevisiae W303-1A–GFP 荧光检测 | 第25-26页 |
| ·本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 利用绿色荧光蛋白研究产甘油假丝酵母胞浆3-磷酸甘油脱氢酶基因CgGPD启动子的功能 | 第27-36页 |
| ·材料和方法 | 第27-28页 |
| ·菌株 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27页 |
| ·渗透压调节剂及其浓度 | 第27页 |
| ·酿酒酵母阳性转化子发光特性和荧光强度的检测 | 第27-28页 |
| ·结果 | 第28-35页 |
| ·不同浓度的 NaCl 对启动子 PCggpd 的诱导作用 | 第28-29页 |
| ·不同浓度的 KCl 对启动子 PCggpd 的诱导作用 | 第29页 |
| ·不同浓度的葡萄糖对启动子 PCggpd 的诱导作用 | 第29-35页 |
| ·本章小结与讨论 | 第35-36页 |
| 第四章 PCggpd调控枯草芽孢杆菌α-淀粉酶基因amy在酿酒酵母中的表达 | 第36-43页 |
| ·材料与方法 | 第36-38页 |
| ·菌种与质粒 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·工具酶与试剂 | 第36-37页 |
| ·枯草芽孢杆菌染色体 DNA 的制备 | 第37页 |
| ·PCR 扩增反应体系及反应条件 | 第37页 |
| ·PCR 产物胶回收 | 第37-38页 |
| ·质粒的提取 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第38页 |
| ·转化大肠杆菌 | 第38页 |
| ·酿酒酵母感受态的制备 | 第38页 |
| ·电击转化酿酒酵母 | 第38页 |
| ·稳定转化子的筛选 | 第38页 |
| ·粗酶液的制备 | 第38页 |
| ·α-淀粉酶的酶活力测定 | 第38页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第38页 |
| ·结果和讨论 | 第38-42页 |
| ·含有α-淀粉酶基因amy的酵母表达载体pYX212-zeocin-PCggpd-amy的构建及其酶切验证 | 第38-40页 |
| ·对照重组质粒pYX212-zeocin -amy 的构建 | 第40-41页 |
| ·酿酒酵母阳性转化子的获得及初步鉴定 | 第41页 |
| ·酿酒酵母阳性转化子α-淀粉酶的酶活测定 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
