| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 GH-IGFs 轴基因和研究方法 | 第11-21页 |
| 1 生长激素研究进展 | 第11-13页 |
| ·生长激素(GH)的结构和功能 | 第11页 |
| ·生长激素信号传导途径 | 第11-12页 |
| ·生长激素的应用 | 第12-13页 |
| 2 胰岛素样生长因子(IGFs)研究进展 | 第13-16页 |
| ·生长因子 | 第13页 |
| ·胰岛素样生长因子(IGF)概述 | 第13页 |
| ·胰岛素样生长因子系统(IGFs) | 第13-14页 |
| ·胰岛素样生长因子(IGFs)研究进展 | 第14-16页 |
| ·IGF-Ⅰ 研究进展 | 第14-15页 |
| ·IGF-Ⅰ 结构 | 第14-15页 |
| ·IGF-Ⅰ 生物学功能及与动物性状的相关性研究 | 第15页 |
| ·IGF-Ⅱ 研究进展 | 第15-16页 |
| ·IGF-Ⅱ 结构 | 第15页 |
| ·IGF-Ⅱ 生物学功能 | 第15-16页 |
| ·IGF-Ⅱ 与基因印记 | 第16页 |
| 3 DNA 分子标记 | 第16-19页 |
| ·DNA 分子标记技术概述 | 第16页 |
| ·DNA 分子标记的分类 | 第16-17页 |
| ·PCR-SSCP 技术 | 第17-19页 |
| ·PCR-SSCP 技术的原理 | 第17页 |
| ·PCR-SSCP 的应用 | 第17-19页 |
| ·PCR-SSCP 在微生物研究中的应用 | 第17-18页 |
| ·PCR-SSCP 在植物研究中的应用 | 第18页 |
| ·PCR-SSCP 在动物育种中的应用 | 第18-19页 |
| 4 荧光定量PCR 技术 | 第19-21页 |
| ·荧光定量PCR 技术(Real-time fluorescent quantitative PCR，qPCR) | 第19页 |
| ·荧光定量PCR 技术的类型及特点 | 第19-21页 |
| ·DNA 结合染料(SYBR Green I) | 第19页 |
| ·TaqMan 探针 | 第19-20页 |
| ·分子信标 | 第20-21页 |
| 第二章 乐至黑山羊GH、IGF-Ⅰ 和IGF-Ⅱ 基因多态性与产羔数的相关性研究 | 第21-40页 |
| 1 材料 | 第21-23页 |
| ·动物样品 | 第21页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第21-23页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-28页 |
| ·DNA 提取 | 第23页 |
| ·DNA 浓度和纯度的检测 | 第23-24页 |
| ·PCR 引物设计 | 第24-26页 |
| ·GH 基因 PCR-SSCP 引物设计 | 第24页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因PCR-SSCP 引物设计 | 第24页 |
| ·IGF-Ⅱ 基因PCR-SSCP 引物设计 | 第24-26页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SSCP) | 第26页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第26页 |
| ·TA 克隆 | 第26-27页 |
| ·数据统计 | 第27-28页 |
| ·基因型频率和基因频率 | 第27页 |
| ·杂合度He 和多态信息含量(PIC) | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-37页 |
| ·基因组DNA 提取效果 | 第28页 |
| ·目的片段扩增效果 | 第28-29页 |
| ·SSCP 检测结果 | 第29-32页 |
| ·GH 基因SSCP 检测结果 | 第29-31页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因SSCP 检测结果 | 第31页 |
| ·IGF-Ⅱ 基因SSCP 检测结果 | 第31-32页 |
| ·序列分析 | 第32-35页 |
| ·GH 基因多态序列分析 | 第32-35页 |
| ·GH 5’侧翼区多态序列分析 | 第32-33页 |
| ·GH exon2 多态序列分析 | 第33页 |
| ·GH exon3 多态序列分析 | 第33-34页 |
| ·GH exon4 多态序列分析 | 第34页 |
| ·GH exon5 多态序列分析 | 第34-35页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因第2 外显子多态序列分析 | 第35页 |
| ·GH 基因的遗传多态性 | 第35页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因ex0112 的遗传多态性 | 第35-36页 |
| ·GH 基因单突变位点对乐至黑山羊产羔性状的遗传效应 | 第36页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因单突变位点对乐至黑山羊产羔性状的遗传效应 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| ·GH 基因多态性及遗传效应 | 第37-38页 |
| ·IGFs 的多态性及遗传效应 | 第38-39页 |
| 5. 小结 | 第39-40页 |
| 第三章 乐至黑山羊与藏山羊GH、IGF-Ⅰ 和IGF-Ⅱ 基因的克隆及组织表达研究 | 第40-57页 |
| 1 材料 | 第40-41页 |
| ·动物组织的采集 | 第40页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第40-41页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| 2 方法 | 第41-44页 |
| ·总RNA 的提取 | 第41-42页 |
| ·总RNA 完整性和纯度检测 | 第42页 |
| ·cDNA 的合成 | 第42页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·目的片段的PCR 扩增及检测 | 第43页 |
| ·TA 克隆 | 第43页 |
| ·荧光定量引物设计 | 第43页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第43-44页 |
| ·统计分析 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-54页 |
| ·RNA 提取质量 | 第44页 |
| ·目的片段扩增效果 | 第44-45页 |
| ·GH 基因序列分析 | 第45-47页 |
| ·乐至黑山羊和藏山羊GH 基因的序列差异性比较 | 第45-46页 |
| ·GH 基因CDS 编码区的一致性比较 | 第46页 |
| ·GH 基因氨基酸同源性比较 | 第46-47页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因序列分析 | 第47-48页 |
| ·乐至黑山羊和藏山羊IGF-Ⅰ 基因的序列差异性比较 | 第47页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因CDS 编码区的一致性比较 | 第47-48页 |
| ·IGF-Ⅰ 基因氨基酸同源性比较 | 第48页 |
| ·IGF-Ⅱ 基因序列分析 | 第48-50页 |
| ·乐至黑山羊和藏山羊IGF-Ⅱ 基因的序列差异性比较 | 第48-49页 |
| ·IGF-Ⅱ 基因CDS 编码区的一致性比较 | 第49页 |
| ·IGF-Ⅱ 基因氨基酸同源性比较 | 第49-50页 |
| ·荧光定量引物的扩增效果 | 第50页 |
| ·目的基因与看家基因的熔点曲线 | 第50-51页 |
| ·目的基因与看家基因的标准曲线 | 第51-53页 |
| ·荧光定量结果分析 | 第53-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-56页 |
| ·克隆cDNA 序列分析 | 第54-55页 |
| ·基因组织表达量分析 | 第55-56页 |
| 5. 小结 | 第56-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录：研究生阶段发表的论文 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
