摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
前言 | 第11-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-27页 |
·1,3-丙二醇介绍及其市场前景 | 第12-13页 |
·1,3-丙二醇的生产方法 | 第13-16页 |
·化学合成法 | 第13-14页 |
·微生物合成法 | 第14-16页 |
·生物法合成生产1,3-PD 的研究进展 | 第16-19页 |
·生物合成1,3-丙二醇的菌种和生产能力 | 第16页 |
·生物合成1,3-丙二醇发酵方式的研究 | 第16-18页 |
·生物合成1,3-丙二醇的基因工程生产情况 | 第18-19页 |
·透明颤菌血红蛋白的研究进展 | 第19-22页 |
·蛋白结构及细胞定位 | 第19-20页 |
·DNA 改组 | 第20-21页 |
·生理功能 | 第21-22页 |
·透明产菌血红蛋白在发酵工业中的应用 | 第22-25页 |
·在抗生素生产中的应用 | 第22-23页 |
·提高蛋白产量及酶活 | 第23-24页 |
·在其它代谢产物生产中的应用 | 第24页 |
·发展趋势和应用前景 | 第24-25页 |
·论文研究的目的意义和主要研究内容 | 第25-27页 |
·论文研究的目的意义 | 第25-26页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
第2章 材料与方法 | 第27-38页 |
·材料 | 第27-30页 |
·仪器 | 第27页 |
·药品和试剂 | 第27-28页 |
·菌种、质粒和引物 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29-30页 |
·酶和试剂盒 | 第30页 |
·方法 | 第30-38页 |
·引物设计与PCR 扩增 | 第30-31页 |
·DNA 的回收 | 第31页 |
·PCR 产物克隆到T 载体 | 第31页 |
·DNA 酶切 | 第31页 |
·质粒稳定性测定(连续稀释培养检测) | 第31页 |
·菌体浓度的测定 | 第31页 |
·CO 差光谱分析 | 第31-32页 |
·辅酶NADH/NAD 测定 | 第32-34页 |
·甲酸脱氢酶酶活测定 | 第34页 |
·蛋白质的SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第34-35页 |
·代谢物分析方法 | 第35-38页 |
第3章 原始菌株发酵条件的优化 | 第38-44页 |
引言 | 第38页 |
·菌株驯化方法的比较 | 第38-40页 |
·驯化培养基 | 第38-39页 |
·驯化培养基 | 第39页 |
·驯化结果 | 第39-40页 |
·不同溶氧摇瓶条件的考察 | 第40-42页 |
·不同溶氧条件下菌体生长情况 | 第41页 |
·不同溶氧条件下甘油消耗和1,3-PD 生成情况 | 第41-42页 |
·小结 | 第42-44页 |
第4章 携带外源基因重组菌的构建 | 第44-54页 |
引言 | 第44页 |
·原始菌抗性检测实验 | 第44-45页 |
·外源表达VHB 重组菌的构建 | 第45-49页 |
·vgb 基因的扩增 | 第45-46页 |
·质粒pV 的构建 | 第46-48页 |
·VHb 的表达及CO 差光谱分析 | 第48-49页 |
·FDH、VHB 共表达重组菌的构建 | 第49-53页 |
·fdh 基因的扩增 | 第49-50页 |
·表达VHb、FDH 重组菌的构建 | 第50-51页 |
·FDH、VHb 的表达及甲酸脱氢酶酶活测定 | 第51-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第5章 质粒平均分配基因PARDE 的引入及质粒稳定性考察 | 第54-60页 |
引言 | 第54页 |
·重组菌表达质粒PDV、PDFV 的构建 | 第54-57页 |
·重组表达质粒构建 | 第54-57页 |
·质粒稳定性的测定 | 第57-59页 |
·不同重组质粒在菌体中的稳定性 | 第57-58页 |
·菌株传代后FDH 酶活的变化 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
第6章 透明颤菌血红蛋白的引入对K.OXYTOCA 发酵1,3-丙二醇的影响 | 第60-68页 |
引言 | 第60页 |
·重组菌不同溶氧条件下的生长特性 | 第60-61页 |
·重组菌高溶氧条件下的代谢特性 | 第61-63页 |
·重组菌低溶氧条件下的代谢特性 | 第63-64页 |
·FDH、VHB共同引入对菌体发酵的影响 | 第64-65页 |
·VHB 的引入对菌体内NADH/NAD 水平的影响 | 第65-67页 |
·小结 | 第67-68页 |
第7章 结论与展望 | 第68-70页 |
·结论 | 第68-69页 |
·展望 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
附录 | 第77-79页 |
致谢 | 第79-80页 |
作者简介 | 第80-81页 |
导师评阅表 | 第81页 |