| 内容提要 | 第1-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-29页 |
| ·细菌分类学和多相分类学 | 第10-18页 |
| ·细菌分类学研究进展 | 第10-12页 |
| ·细菌分类学中种的概念 | 第12-14页 |
| ·系统发育学研究进展 | 第14-16页 |
| ·细菌的多相分类学研究 | 第16-18页 |
| ·嗜热细菌的研究背景及其分类学 | 第18-22页 |
| ·极端微生物及嗜热微生物简介 | 第18-20页 |
| ·嗜热菌分类学研究简史 | 第20-21页 |
| ·嗜热菌的应用价值 | 第21-22页 |
| ·脂肪酶及嗜热脂肪酶 | 第22-26页 |
| ·脂肪酶 | 第22-24页 |
| ·嗜热脂肪酶及其研究现状 | 第24-26页 |
| ·脂肪酶基因的克隆 | 第26页 |
| ·立题依据和实验设计 | 第26-29页 |
| 第二章 长白山温泉可培养微生物的分离及初步鉴定 | 第29-47页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-38页 |
| ·溶液配制 | 第29-30页 |
| ·样品的采集及其环境 | 第30-31页 |
| ·菌株分离及保藏 | 第31-34页 |
| ·16S rRNA基因的获得 | 第34-38页 |
| ·序列比对及系统发育学分析 | 第38页 |
| ·结果与讨论 | 第38-46页 |
| ·嗜热菌的富集培养 | 第38-40页 |
| ·嗜热菌的分离 | 第40-41页 |
| ·菌株16S rRNA基因扩增、测序及其系统发育学分析 | 第41-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三章 长白山温泉嗜热菌多相分类学研究 | 第47-75页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-55页 |
| ·溶液配制 | 第47-48页 |
| ·培养基 | 第48页 |
| ·菌株培养 | 第48-49页 |
| ·参比菌株 | 第49页 |
| ·表型特征 | 第49-53页 |
| ·基因型特征 | 第53-55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-68页 |
| ·菌株CBS-1 和CBS-4 的表型特征 | 第55-65页 |
| ·基因型特征与系统发育学分析 | 第65-68页 |
| ·小结 | 第68-72页 |
| ·新种描述 | 第72-75页 |
| ·Fervidobacterium changbaicum sp. nov | 第72-73页 |
| ·Fervidobacterium tianchisum sp. nov | 第73-75页 |
| 第四章 超嗜热细菌F. CHANGBAICUM脂肪酶基因的钓取 | 第75-109页 |
| ·引言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-84页 |
| ·生物软件及工具 | 第75-76页 |
| ·脂肪酶数据库 | 第76页 |
| ·脂肪酶一级序列特征及分类 | 第76页 |
| ·脂肪酶探测引物的设计 | 第76-77页 |
| ·脂肪酶基因片段的钓取 | 第77-78页 |
| ·嗜热脂肪酶基因全序列的克隆 | 第78-83页 |
| ·序列同源性分析及进化关系 | 第83-84页 |
| ·同源模建 | 第84页 |
| ·结果与讨论 | 第84-107页 |
| ·脂肪酶保守区域的分类 | 第84-90页 |
| ·脂肪酶探测引物的设计 | 第90-91页 |
| ·嗜热脂肪酶基因片段的钓取 | 第91-95页 |
| ·Genome walking克隆CF7 上、下游未知序列 | 第95-99页 |
| ·CF7 全序列（CF7F）组装及特征分析 | 第99-101页 |
| ·信号肽序列的预测 | 第101-102页 |
| ·序列同源性分析及进化关系 | 第102-104页 |
| ·脂肪酶的同源模建 | 第104-107页 |
| ·小结 | 第107-109页 |
| 第五章 嗜热脂肪酶基因的克隆、表达及酶学性质表征 | 第109-135页 |
| ·引言 | 第109页 |
| ·实验材料 | 第109-113页 |
| ·主要仪器 | 第109-110页 |
| ·主要试剂 | 第110-111页 |
| ·实验用菌株及质粒 | 第111页 |
| ·溶液配制 | 第111-112页 |
| ·培养基 | 第112-113页 |
| ·实验方法 | 第113-121页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第113页 |
| ·基因的克隆与纯化 | 第113-116页 |
| ·嗜热脂肪酶基因的表达及粗酶的获得 | 第116页 |
| ·脂肪酶活力测定 | 第116-118页 |
| ·嗜热脂肪酶的纯化 | 第118-119页 |
| ·重组嗜热脂肪酶酶学性质表征 | 第119-121页 |
| ·结果与讨论 | 第121-134页 |
| ·目的基因的PCR扩增 | 第121-122页 |
| ·载体制备及重组质粒的构建 | 第122-123页 |
| ·重组质粒的转化及阳性克隆的鉴定 | 第123-124页 |
| ·目的蛋白的表达与纯化 | 第124-127页 |
| ·重组嗜热脂肪酶基本酶学性质表征 | 第127-134页 |
| ·小结 | 第134-135页 |
| 第六章 嗜热脂肪酶稳定性机制的研究 | 第135-165页 |
| ·引言 | 第135页 |
| ·实验材料 | 第135-136页 |
| ·主要仪器 | 第135页 |
| ·主要试剂 | 第135-136页 |
| ·实验方法 | 第136-140页 |
| ·热失活动力学研究 | 第136页 |
| ·圆二色谱测定 | 第136-137页 |
| ·荧光光谱测定 | 第137-138页 |
| ·酶的通透性测定 | 第138页 |
| ·平衡解折叠模型的构建 | 第138-139页 |
| ·酶在盐酸胍中的活力及复性过程测定 | 第139页 |
| ·氨基酸组成对稳定性的影响 | 第139-140页 |
| ·结果与讨论 | 第140-163页 |
| ·嗜热脂肪酶的热稳定性 | 第140-147页 |
| ·嗜热脂肪酶的pH稳定性 | 第147-153页 |
| ·变性剂对酶构象的影响 | 第153-160页 |
| ·氨基酸组成对酶稳定性的影响 | 第160-163页 |
| ·小结 | 第163-165页 |
| 创新点 | 第165-166页 |
| 攻读博士期间研究成果 | 第166-167页 |
| 参考文献 | 第167-182页 |
| 中文摘要 | 第182-186页 |
| ABSTRACT | 第186-191页 |
| 致谢 | 第191页 |
