| 内容提要 | 第1-8页 |
| 前言 | 第8-21页 |
| 1. APP 的结构 | 第8-11页 |
| 2. APP 与 AD 关系 | 第11-15页 |
| 3. APP/C99 水解酶—γ-分泌酶 | 第15-17页 |
| 4. APP/C99 水解酶—γ-分泌酶中的活性组分 PS1 | 第17-20页 |
| 5. APP 的原核表达产物研究现状 | 第20-21页 |
| 第一章 淀粉样前体蛋白(APP)在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第21-45页 |
| 1. 实验材料 | 第21-22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-33页 |
| 3. 实验结果 | 第33-43页 |
| ·目的基因的获得 | 第33-34页 |
| ·表达载体的构建 | 第34-39页 |
| ·目的蛋白的表达与纯化 | 第39-41页 |
| ·表达产物的胰蛋白酶抑制活力 | 第41页 |
| ·目的蛋白的表达特性鉴定 | 第41-43页 |
| 讨论 | 第43-44页 |
| 小结 | 第44-45页 |
| 第二章 非修饰性 APP/C99 细胞模型的建立 | 第45-66页 |
| 1. 实验材料 | 第47-48页 |
| 2. 实验方法 | 第48-52页 |
| 3. 实验结果 | 第52-63页 |
| ·表达载体 APP770/APP751/APP695/APP695MCC/C99- pcDNA3.1(+) 的构建 | 第52-55页 |
| ·PC12、HEK293 细胞内源性 APP 水平检测及亚细胞定位 | 第55-56页 |
| ·APP770/APP751/APP695/APP695MCC/C99-pcDNA3.1 转染靶细胞中外源 APP/C99 的表达与表达部位分析 | 第56-57页 |
| ·APP770/APP751/APP695/APP695MC/C99 结合的膜片段与 HEK293细胞的融合 | 第57-59页 |
| ·大肠杆菌表达的 APP770/APP751/APP695/APP695MC/C99 结合的膜片段与 PC12 细胞的融合 | 第59-60页 |
| ·抗人 Aβ抗体(β-Amyloid(B-4))抗体)对 APP770/APP751/APP695/APP695MC/C99 结合的膜片段与 PC12、HEK293 细胞融合的影响 | 第60-61页 |
| ·纯化的 APP695 与靶细胞的“融合” | 第61-62页 |
| ·APP751 膜成分与 PC12 细胞融合的电镜观察 | 第62-63页 |
| 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 第三章 非修饰性 APP/C99 细胞模型的初步应用 | 第66-72页 |
| 1. 实验材料 | 第66-67页 |
| 2. 实验方法 | 第67-68页 |
| 3. 实验结果 | 第68-71页 |
| ·PS1 目的基因的获得及 PS1-pEGFP-C3 重组表达载体的构建 | 第68-69页 |
| ·分析修饰/非修饰的 C99 在 PC12 及 HEK293 细胞中对 Aβ产生水平的影响 | 第69-71页 |
| 讨论 | 第71页 |
| 小结 | 第71-72页 |
| 全文结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 博士期间发表的学术论文 | 第83-84页 |
| 中文摘要 | 第84-87页 |
| Abstract | 第87-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
