| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-11页 |
| 目录 | 第11-15页 |
| 第一部分 文献综述 | 第15-27页 |
| 第一章 牛奶子植物研究进展 | 第17-19页 |
| 1 牛奶子植物药理学研究 | 第17-18页 |
| 2 牛奶子植物种质资源与保护 | 第18-19页 |
| 第二章 类胡萝卜素合成代谢相关酶研究 | 第19-25页 |
| 1 类胡萝卜素合成代谢途径主要酶 | 第19-21页 |
| 2 类胡萝卜素合成代谢遗传控制 | 第21-22页 |
| 3 影响类胡萝卜素合成代谢的因素 | 第22-23页 |
| 4 类胡萝卜素合成代谢基因工程研究 | 第23-25页 |
| 第三章 本课题研究目的及意义 | 第25-27页 |
| 第二部分 研究内容 | 第27-73页 |
| 第一章 浙江省牛奶子资源调查及其果实总RNA的提取 | 第27-31页 |
| 1 前言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-29页 |
| ·牛奶子种质资源调查与材料收集 | 第27-28页 |
| ·总RNA提取方法与质量检测 | 第28-29页 |
| 3 实验结果 | 第29页 |
| ·野生牛奶子资源概况 | 第29页 |
| ·总RNA提取方法确定与质量分析 | 第29页 |
| 4 讨论 | 第29-31页 |
| 第二章 牛奶子果实生长成熟期色素含量检测 | 第31-37页 |
| 1 前言 | 第31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-33页 |
| ·牛奶子果实类胡萝卜素含量测定 | 第32页 |
| ·牛奶子果实叶绿素含量测定 | 第32-33页 |
| 3 实验结果 | 第33-35页 |
| ·牛奶子果实成熟期类胡萝卜素含量 | 第33-35页 |
| ·牛奶子生长成熟期叶绿素含量 | 第35页 |
| 4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 牛奶子果实类胡萝卜素合成相关基因的克隆 | 第37-50页 |
| 1 前言 | 第37页 |
| 2 材料与方法 | 第37-40页 |
| ·酶及生化试剂 | 第37页 |
| ·菌株和载体 | 第37-38页 |
| ·RNA的提取、定量及cDNA的合成 | 第38-39页 |
| ·同源物种检索与简并引物设计 | 第39页 |
| ·PCR扩增条件与电泳检测 | 第39页 |
| ·PCR产物纯化与T-载体连接 | 第39-40页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第40页 |
| ·测序 | 第40页 |
| 3 实验结果 | 第40-48页 |
| ·RNA的提取与cDNA的合成 | 第40-41页 |
| ·牛奶子类胡萝卜素合成相关基因的克隆 | 第41-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 牛奶子类胡萝卜素合成基因的时空表达分析 | 第50-58页 |
| 1 前言 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-52页 |
| ·牛奶子茎、叶、花和果实总RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·DNase Ⅰ处理及cDNA合成 | 第51页 |
| ·实时定量PCR引物设计 | 第51页 |
| ·扩增产物测序验证 | 第51-52页 |
| ·实时定量PCR体系的建立 | 第52页 |
| 3 实验结果 | 第52-55页 |
| ·实时定量PCR引物 | 第52-53页 |
| ·克隆与测序验证 | 第53页 |
| ·牛奶子类胡萝卜素合成基因的时空表达分析 | 第53-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 第五章 全长Pds基因的克隆与结构分析 | 第58-68页 |
| 1 前言 | 第58页 |
| 2 材料与方法 | 第58-60页 |
| ·全长Pds基因分离 | 第58页 |
| ·Pds基因DNA水平结构分析 | 第58-60页 |
| 3 实验结果 | 第60-66页 |
| ·全长Pds基因分离 | 第60-64页 |
| ·Pds基因DNA结构分析 | 第64页 |
| ·Pds基因的生物信息学分析 | 第64-66页 |
| 4 讨论 | 第66-68页 |
| 第六章 Psy、Pds基因的Southern杂交分析 | 第68-73页 |
| 1 前言 | 第68页 |
| 2 材料与方法 | 第68-71页 |
| ·试剂配制 | 第68-69页 |
| ·牛奶子DNA的提取 | 第69页 |
| ·探针的制备 | 第69页 |
| ·限制性酶的选择及酶切体系优化 | 第69页 |
| ·Southern杂交 | 第69-71页 |
| 3 实验结果 | 第71页 |
| ·探针制备用引物 | 第71页 |
| ·Psy、Pds基因的Southern杂交 | 第71页 |
| 4 讨论 | 第71-73页 |
| 结论与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |