| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 目次 | 第12-15页 |
| 1 绪论 | 第15-42页 |
| ·双生病毒科的分类、寄主范围及传播介体 | 第16页 |
| ·双生病毒的基因组结构和功能 | 第16-18页 |
| ·双生病毒的侵染过程 | 第18-21页 |
| ·双生病毒的复制和转录 | 第18-20页 |
| ·双生病毒的运动 | 第20-21页 |
| ·双生病毒的致病相关因子 | 第21-28页 |
| ·C4 | 第21-23页 |
| ·C2/AC2 | 第23-24页 |
| ·BC1 | 第24-25页 |
| ·BV1 | 第25-26页 |
| ·βC1 | 第26-28页 |
| ·植物miRNA的研究进展 | 第28-42页 |
| ·植物microRNA家族及其靶标的进化 | 第28-29页 |
| ·植物中保守miRNA的系统发生分布 | 第29-30页 |
| ·microRNA的生物合成 | 第30-33页 |
| ·植物miRNA的作用模式 | 第33-35页 |
| ·植物microRNA的靶标识别 | 第35-36页 |
| ·植物microRNA介导的调控范围 | 第36-37页 |
| ·miRNA在植物和病毒在对抗机制竞争中的作用 | 第37-38页 |
| ·miRNA在植物抗病毒防御中的应用 | 第38-40页 |
| ·RNA沉默抑制子影响miRNA代谢 | 第40-42页 |
| 2 TbCSV与TYLCCNV病害复合体症状差异的遗传决定因子定位 | 第42-71页 |
| ·材料与方法 | 第43-57页 |
| ·病毒和植物材料 | 第43页 |
| ·菌株和载体 | 第43页 |
| ·TbCSV-Y35DNAβ与TYLCCNV-Y10DNAβ4个嵌合体卫星构建 | 第43-45页 |
| ·嵌合体分子的侵染性克隆构建 | 第45-49页 |
| ·三亲交配及农杆菌接种 | 第49-51页 |
| ·植物总DNA提取(CTAB法) | 第51页 |
| ·地高辛法Southern印迹检测 | 第51-53页 |
| ·烟草的转化 | 第53-54页 |
| ·番茄的转化 | 第54-55页 |
| ·植物总RNA提取 | 第55页 |
| ·northern印迹分析 | 第55-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-68页 |
| ·TbCSV-Y35与TYLCCNV-Y10假重组实验 | 第57-61页 |
| ·表达Y35βC1转基因植株的症状 | 第61-64页 |
| ·嵌合体卫星诱导的症状类型分析 | 第64-65页 |
| ·病毒DNA积累水平分析 | 第65-68页 |
| ·讨论 | 第68-71页 |
| 3 烟草曲茎病毒卫星启动子的鉴定 | 第71-86页 |
| ·材料与方法 | 第71-76页 |
| ·植物总DNA的制备 | 第71页 |
| ·载体构建 | 第71-74页 |
| ·瞬间表达 | 第74页 |
| ·转基因烟草的PCR鉴定 | 第74页 |
| ·Northern blot分析 | 第74-75页 |
| ·GUS活性的组织化学染色 | 第75页 |
| ·GUS荧光活性分析 | 第75-76页 |
| ·结果与分析 | 第76-83页 |
| ·βC1ORF启动子表达载体的构建 | 第76-78页 |
| ·瞬间表达中GUS活性的组织化学检测 | 第78页 |
| ·瞬间表达中GUS荧光活性分析 | 第78-79页 |
| ·转基因烟草的获得和分子鉴定 | 第79-81页 |
| ·转基因普通烟中GUS活性的组织化学分析 | 第81-82页 |
| ·转基因普通烟中的GUS荧光活性分析和Northern blot分析 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-86页 |
| 4 TYLCCNV卫星DNA的βC1基因对植物miRNA积累影响的初步研究 | 第86-96页 |
| ·材料与方法 | 第86-90页 |
| ·植物材料 | 第86页 |
| ·SDS-PAGE电泳和Western印迹分析 | 第86-88页 |
| ·miRNA芯片实验基本流程 | 第88页 |
| ·小RNA获得和Northern印迹分析 | 第88-90页 |
| ·结果与分析 | 第90-93页 |
| ·Western印迹分析植株中βC1蛋白的表达 | 第90-92页 |
| ·Microarray分析miRNA的差异表达 | 第92-93页 |
| ·northern印迹验证特异的miRNA差异表达 | 第93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| 5 全文小结 | 第96-97页 |
| 参考文献 | 第97-110页 |
| 附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第110-111页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第111-118页 |
