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柑橘采后黑腐病菌的分离、鉴定及其拮抗酵母菌研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
1 引言第12-19页
   ·柑橘生产及采后损失状况第12页
   ·柑橘采后主要真菌病害第12页
   ·柑橘采后真菌病害主要防治技术第12-15页
     ·化学方法第12-13页
     ·物理方法第13页
     ·生物方法第13-15页
   ·柑橘采后黑腐病的研究概况第15-17页
     ·柑橘黑腐病的分布与危害第15页
     ·柑橘采后黑腐病的病原第15页
     ·柑橘采后黑腐病的发病症状第15-16页
     ·柑橘采后黑腐病的传播途径及发病规律第16页
     ·柑橘采后黑腐病的防治措施第16-17页
   ·真菌分类鉴定的主要方法第17-18页
     ·形态学和生理生化方法第17页
     ·rDNA-ITS序列分析方法第17-18页
   ·课题来源及意义第18-19页
2 材料与方法第19-33页
   ·菌种与材料第19-21页
     ·生防酵母菌第19页
     ·病原菌第19页
     ·供试果实第19页
     ·供试培养基第19-21页
       ·微生物培养常用培养基第19-20页
       ·酵母菌鉴定用培养基第20-21页
   ·实验方法第21-33页
     ·酵母菌的分离、纯化第21页
     ·病原菌的分离、纯化及鉴定第21-22页
     ·病原菌分生孢子悬浮液的制备第22页
     ·病原菌致病性测定第22页
       ·病原菌分生孢子的致病性测定第22页
       ·病原菌毒素的致病性检测第22页
     ·柑橘黑腐病菌的rDNA-ITS序列分析第22-26页
       ·菌丝体培养及收集第22-23页
       ·DNA提取第23页
       ·琼脂糖凝胶电泳检测第23页
       ·rDNA-ITS片段的PCR扩增第23-24页
       ·PCR扩增产物的纯化第24-25页
       ·感受态细胞的制备第25页
       ·DNA片段的克隆第25-26页
       ·转化菌落的转种培养及阳性克隆的检测第26页
       ·ITS片段的测序及序列分析第26页
     ·病原菌的生物学特性研究第26-28页
       ·不同培养基对菌丝生长和产孢的影响第26-27页
       ·不同pH对菌丝生长和产孢量的影响第27页
       ·不同碳源对菌丝生长和产孢量的影响第27页
       ·不同氮源对菌丝生长和产孢量的影响第27页
       ·温度对菌丝生长和产孢量的影响第27页
       ·光照对菌丝生长和产孢量的影响第27页
       ·黑腐病菌分生孢子的致死温度第27-28页
       ·病原菌对药剂的敏感性第28页
     ·病原菌田间侵染规律初步调查第28-29页
       ·花期侵染情况第28页
       ·果实发育期侵染情况第28-29页
     ·拮抗酵母菌的离体(in vitro)筛选第29页
       ·酵母菌悬浮液的制备第29页
       ·酵母菌琼脂块的制备第29页
       ·拮抗酵母菌离体(in vitro)初步筛选第29页
       ·不同浓度酵母菌对抑菌效果的影响第29页
     ·拮抗酵母菌的活体(in vivo)筛选实验第29-30页
       ·拮抗酵母菌的活体(in vivo)初步筛选第29-30页
       ·不同浓度拮抗酵母菌的活体筛选第30页
       ·拮抗酵母菌在果实伤口处的生长动态第30页
     ·酵母菌的鉴定第30-32页
       ·酵母菌的形态学指标第30-31页
       ·酵母菌的生理生化指标第31-32页
       ·酵母菌 ITS序列分析鉴定第32页
     ·数据分析第32-33页
3 结果与分析第33-51页
   ·酵母菌的分离第33页
   ·病原菌的分离、纯化与鉴定第33页
   ·病原菌分生孢子的致病性检测第33-34页
   ·病原菌毒素的致病性检测第34页
   ·病原菌的rDNA-ITS序列分析第34页
   ·病原菌生物学特性的研究第34-41页
     ·不同培养基对菌丝生长及产孢量的影响第34-36页
     ·不同pH对菌丝生长及产孢量的影响第36页
     ·不同碳源对菌丝生长及产孢量的影响第36-37页
     ·不同氮源对菌丝生长及产孢量的影响第37-38页
     ·温度对菌丝生长及产孢量的影响第38-39页
     ·光照对菌丝生长和产孢量的影响第39-40页
     ·病菌分生孢子的致死温度第40页
     ·病原菌对药剂的敏感性第40-41页
   ·病原菌田间侵染规律初步调查结果第41-43页
     ·花期侵染情况第41页
     ·果实发育期侵染情况第41-43页
   ·拮抗酵母菌的离体(in vitro)筛选结果第43-44页
     ·拮抗酵母菌的离体(in vitro)初步筛选结果第43页
     ·拮抗酵母菌对不同病原菌浓度抑菌效果的影响第43-44页
   ·拮抗酵母菌的活体(in vivo)筛选结果第44-47页
     ·拮抗酵母菌的活体(in vivo)初步筛选结果第44页
     ·不同浓度拮抗酵母菌的活体(in vivo)筛选结果第44-45页
     ·拮抗酵母菌在果实伤口处的生长动态第45-47页
       ·酵母菌 Wf-b-1在果实伤口处的生长动态第45-46页
       ·酵母菌γ-60-11在果实伤口处的生长动态第46页
       ·酵母菌 Wm-9在果实伤口处的生长动态第46-47页
   ·拮抗酵母菌的鉴定结果第47-51页
     ·酵母菌的形态学鉴定结果第47页
     ·酵母菌的生理生化鉴定结果第47-49页
     ·酵母菌的rDNA-ITS序列分析结果第49-51页
4 讨论第51-55页
   ·病原菌的分离及鉴定第51页
   ·病原菌的生物学特性第51-52页
   ·病原菌侵染规律第52-53页
   ·拮抗酵母菌的分离、筛选及鉴定第53-55页
     ·拮抗酵母菌的分离第53页
     ·拮抗酵母菌的筛选第53-54页
     ·拮抗酵母菌的鉴定第54-55页
下一步研究计划第55-56页
参考文献第56-63页
附录第63-71页
 附录一: 部分试剂配制方法第63-64页
 附录二: 序列测序结果第64-67页
 附录三: 附图及说明第67-71页
致谢第71页

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