抗百菌清和腐霉利单克隆抗体制备及其特性分析
| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-24页 |
| 1 百菌清 | 第15-19页 |
| ·百菌清的理化性质 | 第15-16页 |
| ·百菌清的毒性 | 第16页 |
| ·百菌清的杀菌机理 | 第16-17页 |
| ·百菌清的检测 | 第17-19页 |
| ·气相色谱法 | 第17页 |
| ·气相色谱/质谱联用法 | 第17-18页 |
| ·高效液相色谱 | 第18页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第18-19页 |
| 2 腐霉利 | 第19-23页 |
| ·腐霉利的理化性质 | 第19-20页 |
| ·腐霉利的毒性 | 第20页 |
| ·腐霉利的杀菌机理 | 第20-21页 |
| ·腐霉利的检测 | 第21-23页 |
| ·气相色谱法 | 第21页 |
| ·气相色谱/质谱联用法 | 第21-22页 |
| ·高效液相色谱 | 第22页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第22-23页 |
| 3 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 百菌清和腐霉利完全抗原的构建与鉴定 | 第24-35页 |
| 1 材料 | 第24-25页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| 2 方法 | 第25-26页 |
| ·百菌清与 BSA(OVA)的偶联 | 第25页 |
| ·腐霉利与 BSA(OVA)的偶联 | 第25页 |
| ·偶联物的红外光谱分析 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·CTNH-BSA(OVA)制备示意图 | 第26-27页 |
| ·PRMH-BSA(OVA)制备示意图 | 第27-28页 |
| ·偶联物的红外光谱分析 | 第28-31页 |
| ·完全抗原的紫外光谱及其摩尔比分析 | 第31-33页 |
| 4 小结与讨论 | 第33-35页 |
| ·小结 | 第33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 百菌清和腐霉利抗血清制备及ELISA建立 | 第35-50页 |
| 1 材料与方法 | 第35-50页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-50页 |
| ·几种溶液的配制 | 第36页 |
| ·动物饲养及处理 | 第36-37页 |
| ·佐剂的制备 | 第37页 |
| ·免疫方法 | 第37页 |
| ·抗血清的制备及分析 | 第37-50页 |
| 第四章 抗百菌清和腐霉利单克隆抗体的制备 | 第50-69页 |
| 1 材料 | 第50-53页 |
| ·主要仪器 | 第50-51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·主要试剂与培养液的配制 | 第51-53页 |
| ·ELISA相关试剂的配制 | 第51页 |
| ·细胞培养液及相关试剂的配制 | 第51-52页 |
| ·染色体制备相关试剂的配制 | 第52-53页 |
| ·融合剂的制备 | 第53页 |
| 2 方法 | 第53-59页 |
| ·抗百菌清和腐霉利单克隆抗体的制备 | 第53-58页 |
| ·技术路线 | 第54页 |
| ·脾细胞的制备 | 第54-55页 |
| ·骨髓瘤细胞的制备 | 第55页 |
| ·饲养层细胞的制备 | 第55-56页 |
| ·细胞融合 | 第56页 |
| ·融合细胞的培养与观察 | 第56-57页 |
| ·有限稀释法亚克隆 | 第57页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第57页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第57-58页 |
| ·细胞株稳定性试验 | 第58页 |
| ·抗百菌清和腐霉利单克隆抗体的性质研究 | 第58-59页 |
| ·单克隆抗体的扩增 | 第58-59页 |
| ·间接非竞争 ELISA测抗体效价 | 第59页 |
| ·抗原和抗体工作浓度的确定 | 第59页 |
| ·间接竞争ELISA分析抗体的灵敏度 | 第59页 |
| 3 结果与分析 | 第59-66页 |
| ·抗百菌清和腐霉利单克隆子的制备 | 第59-63页 |
| ·克隆的形成过程 | 第59-60页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第60-61页 |
| ·杂交瘤细胞株分泌抗体的稳定性分析 | 第61-62页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第62-63页 |
| ·单克隆抗体的性质研究 | 第63-66页 |
| ·单克隆抗体的扩增 | 第63页 |
| ·单克隆抗体和包被抗原工作浓度的确定 | 第63-64页 |
| ·百菌清和腐霉利间接竞争ELISA的竞争抑制曲线 | 第64-66页 |
| 4 小结与讨论 | 第66-69页 |
| ·小结 | 第66页 |
| ·讨论 | 第66-69页 |
| ·影响细胞融合的因素 | 第67页 |
| ·细胞污染及处理方法 | 第67-69页 |
| 第五章 总结与展望 | 第69-72页 |
| 1 总结 | 第69-70页 |
| ·百菌清和腐霉利人工抗原的合成 | 第69页 |
| ·抗百菌清和腐霉利多克隆抗体的制备及性质研究 | 第69-70页 |
| ·抗百菌清和腐霉利单克隆抗体的制备及性质研究 | 第70页 |
| 2 展望 | 第70-72页 |
| ·杂交瘤细胞的的亚克隆 | 第70-71页 |
| ·杂交瘤细胞的特异性 | 第71页 |
| ·蔬菜及水果样品中的 ELISA检测 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
