| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-39页 |
| ·前言 | 第12-13页 |
| ·油菜雄性不育 | 第13-17页 |
| ·油菜细胞质雄性不育 | 第14-15页 |
| ·油菜细胞核雄性不育 | 第15-17页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育研究 | 第17-22页 |
| ·显性细胞核雄性不育的遗传 | 第17-18页 |
| ·单基因控制的显性核不育 | 第17页 |
| ·双基因控制的显性核不育 | 第17-18页 |
| ·一对复等位基因控制的显性核不育 | 第18页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育的花器特征 | 第18-19页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育的细胞学研究 | 第19-20页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育相关基因的分子生物学研究 | 第20-22页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育基因的标记定位 | 第20页 |
| ·油菜显性细胞核雄性不育相关基因的克隆 | 第20-22页 |
| ·核苷酸剪切修复(NER)基因RAD23及XPC研究进展 | 第22-29页 |
| ·UV引起的DNA损伤与修复 | 第22-24页 |
| ·UV引起的DNA损伤修复Ⅰ:直接逆转 | 第22-23页 |
| ·UV引起的DNA损伤修复Ⅱ:NER | 第23-24页 |
| ·植物中NER模型及相关参与蛋白 | 第24-26页 |
| ·RAD23基因研究进展 | 第26-28页 |
| ·啤酒酵母(Saccharamyces.cerevisiae)中的RAD23基因 | 第26-27页 |
| ·植物(Saccharamyces.cerevisiae)中的RAD23基因 | 第27-28页 |
| ·XPC基因研究进展 | 第28-29页 |
| ·植物基因功能研究方法 | 第29-39页 |
| ·基因功能丧失的方法(Loss of fuction) | 第30-37页 |
| ·反义技术 | 第30-31页 |
| ·插入突变(T-DNA标签、转座子标签) | 第31-33页 |
| ·T-DNA介导的基因诱捕技术 | 第33-35页 |
| ·RNA干扰(RNAi) | 第35-36页 |
| ·植物病毒诱导的基因沉默(virus induced gene silencing,VIGS) | 第36-37页 |
| ·基因功能增加方法 | 第37-38页 |
| ·超量表达(Over-expression) | 第37页 |
| ·基因诱导表达(Inducible expression) | 第37-38页 |
| ·酵母双杂交系统(Yeast two-hybrid system) | 第38-39页 |
| 第二章 雄性不育相关基因2-I05生物信息学分析 | 第39-47页 |
| ·GENSCAN分析2-I05 CDS区域 | 第39-41页 |
| ·2-I05推导氨基酸序列的分析 | 第41-42页 |
| ·2-I05全氨基酸序列比对及系统发生树 | 第42-45页 |
| ·2-I05全氨基酸序列比对 | 第42-44页 |
| ·2-I05部分氨基酸序列的系统进化分析 | 第44-45页 |
| ·结果与讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 基因2-I05反义抑制植物表达载体的构建及对拟南芥的遗传转化 | 第47-71页 |
| ·材料与方法 | 第47-58页 |
| ·材料 | 第47-49页 |
| ·拟南芥受体植株 | 第47页 |
| ·细菌菌株 | 第47页 |
| ·载体、PCR扩增模板及引物 | 第47-48页 |
| ·凝胶回收试剂盒、酶、抗生素标记及DNA分子量标记 | 第48页 |
| ·培养基及其它试剂 | 第48-49页 |
| ·RNA提取试剂及逆转录试剂盒 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-58页 |
| ·基因2-I05反义抑制植物表达载体的构建 | 第49-53页 |
| ·拟南芥的培养及转化 | 第53-54页 |
| ·PCR阳性植株的检测 | 第54-55页 |
| ·拟南芥UV处理计量的确定 | 第55页 |
| ·拟南芥花蕾和叶片总RNA的提取及逆转录合成第一链cDNA | 第55-56页 |
| ·cDNA第二链合成引物的设计 | 第56-58页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-67页 |
| ·基因2-I05反义抑制植物表达载体的构建 | 第58-59页 |
| ·基因2-I05反义抑制植物表达载体的转化与转化植株的筛选 | 第59-61页 |
| ·拟南芥T_1代转化植株表型观察 | 第61-62页 |
| ·T_2代拟南芥转化植株表型的观察 | 第62-65页 |
| ·拟南芥UV处理剂量的确定 | 第62页 |
| ·T_2代拟南芥转化植株的Hyg抗性筛选与PCR检测 | 第62-63页 |
| ·T_2代拟南芥转化植株的的表型观察 | 第63-65页 |
| ·T_2代拟南芥RT-PCR分析 | 第65-67页 |
| ·野生型、T_2代拟南芥花蕾、叶片的总RNA提取 | 第65页 |
| ·引物(2L,2R)扩增拟南芥基因组的温度梯度 | 第65-66页 |
| ·T_2代拟南芥RT-PCR分析 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-71页 |
| 第四章 基因2-I05反义抑制植物表达载体对甘蓝型油菜的遗传转化 | 第71-79页 |
| ·材料与方法 | 第71-74页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-74页 |
| ·无菌受体材料的准备 | 第71页 |
| ·受体材料的预处理 | 第71-72页 |
| ·供体菌株培养及收集 | 第72页 |
| ·浸染 | 第72页 |
| ·外植体与农杆菌的共培养 | 第72页 |
| ·脱菌 | 第72页 |
| ·脱菌(延迟)培养 | 第72-73页 |
| ·筛选分化、生根培养及移栽 | 第73页 |
| ·愈伤组织玻璃化形成原因探讨 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-75页 |
| ·A,B两套油菜转化体系外植体愈伤诱导水平比较 | 第74-75页 |
| ·愈伤组织玻璃化形成原因探讨的各处理结果 | 第75页 |
| ·A,B两套转化体系外植体筛选分化结果 | 第75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| ·对已报道的油菜高效转基因平台技术的相关修改 | 第75-76页 |
| ·A,B两套油菜转化体系外植体愈伤诱导水平结果分析及相关改进设想 | 第76-78页 |
| ·A,B两套油菜转化体系外植体愈伤诱导水平结果分析 | 第76-77页 |
| ·愈伤组织玻璃化产生原因探讨 | 第77页 |
| ·相关改进设想 | 第77-78页 |
| ·A,B套油菜转化体系外植体筛选分化结果分析 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
