| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-6页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第一章 实验材料 | 第8-10页 |
| ·实验器材 | 第8页 |
| ·实验细胞 | 第8页 |
| ·试剂及常用基因工程酶类 | 第8-9页 |
| ·质粒、菌种和引物合成与测序 | 第9-10页 |
| 第二章 实验方法 | 第10-21页 |
| ·重组质粒pcDNA3.1(+)myc-His A-fat-1真核表达载体的构建 | 第10-15页 |
| ·构建策略 | 第10-11页 |
| ·目的片段和载体的纯化方法 | 第11-12页 |
| ·感受态细菌的制备与重组质粒的转化 | 第12-13页 |
| ·重组质粒的提取 | 第13-14页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第14-15页 |
| ·重组质粒的DNA测序鉴定 | 第15页 |
| ·细胞培养及重组质粒转染 | 第15-17页 |
| ·细胞株及培养方法 | 第15页 |
| ·用于转染的重组质粒的制备 | 第15-16页 |
| ·重组质粒的转染 | 第16-17页 |
| ·RNA分析 | 第17-19页 |
| ·总RNA的提取 | 第17页 |
| ·RT-PCR | 第17-19页 |
| ·脂肪酸分析 | 第19页 |
| ·细胞增殖率的测定 | 第19页 |
| ·细胞周期和凋亡的测定 | 第19-20页 |
| ·数据分析 | 第20-21页 |
| 第三章 实验结果 | 第21-27页 |
| ·pcDNA3.1(+)myc-His A-fat-1质粒的酶切鉴定和DNA测序鉴定 | 第21-22页 |
| ·转染后48h HepG2细胞表达外源基因情况 | 第22-23页 |
| ·转染后48h HepG2细胞表达fat-1基因mRNA的结果 | 第23页 |
| ·转染后48h HepG2细胞增殖率的变化 | 第23页 |
| ·转染后48h HepG2细胞n-6/n-3PUFAs比例变化 | 第23-25页 |
| ·转染后48h HepG2细胞周期与凋亡分析 | 第25-27页 |
| 第四章 讨论 | 第27-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 综述 | 第35-46页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
