体细胞核移植来源的克隆胚胎线粒体定量分析
| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 引言 | 第7-11页 |
| 第一章:线粒体 DNA 定量 PCR 方法建立 | 第11-29页 |
| ·实验材料 | 第11-12页 |
| ·实验仪器 | 第11页 |
| ·试剂与耗材 | 第11-12页 |
| ·实验方法 | 第12-20页 |
| ·外周血单个核细胞的分离 | 第12页 |
| ·DNA 样本制备 | 第12-13页 |
| ·引物设计 | 第13页 |
| ·PCR 扩增 | 第13页 |
| ·电泳检测 | 第13页 |
| ·琼脂糖凝胶 DNA 回收 | 第13-14页 |
| ·重组质粒的构建 | 第14-15页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第15页 |
| ·重组质粒的转化及筛选 | 第15页 |
| ·提取质粒 | 第15-16页 |
| ·重组质粒测序鉴定 | 第16-19页 |
| ·PCR 扩增 | 第16-17页 |
| ·PCR 产物纯化 | 第17-18页 |
| ·测序 PCR 反应液配制 | 第18页 |
| ·测序 PCR 热循环条件 | 第18页 |
| ·测序产物纯化 | 第18页 |
| ·测序电泳 | 第18-19页 |
| ·定量 PCR | 第19-20页 |
| ·转换拷贝浓度 | 第19页 |
| ·定量 PCR 反应液配制 | 第19页 |
| ·PCR 循环条件 | 第19页 |
| ·熔解曲线 | 第19-20页 |
| ·标准曲线 | 第20页 |
| ·实验结果 | 第20-26页 |
| ·重组质粒的电泳鉴定 | 第20页 |
| ·重组质粒的 DNA 序列分析 | 第20-22页 |
| ·标准曲线和线性关系 | 第22-23页 |
| ·标准曲线的灵敏性 | 第23-25页 |
| ·特异性 | 第25-26页 |
| ·重复性实验 | 第26页 |
| ·讨论 | 第26-29页 |
| 第二章 人-兔克隆胚胎发育中线粒体的定量分析 | 第29-33页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·试剂与材料 | 第29页 |
| ·主要实验仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-30页 |
| ·DNA 样本制备 | 第29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·对照设定 | 第30页 |
| ·PCR 定量分析 | 第30页 |
| ·实验结果 | 第30-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 小鼠-兔克隆胚胎发育中线粒体定量分析 | 第33-37页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·试剂与材料 | 第33页 |
| ·主要实验仪器 | 第33页 |
| ·实验方法 | 第33-34页 |
| ·DNA 样本制备 | 第33页 |
| ·引物设计 | 第33-34页 |
| ·对照设定 | 第34页 |
| ·PCR 定量分析 | 第34页 |
| ·实验结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第四章 克隆人类胚胎的线粒体定量分析 | 第37-41页 |
| ·实验材料 | 第37页 |
| ·试剂与材料 | 第37页 |
| ·主要实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-38页 |
| ·DNA 样本制备 | 第37页 |
| ·引物设计 | 第37页 |
| ·对照设定 | 第37-38页 |
| ·PCR 定量分析 | 第38页 |
| ·实验结果 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 综述 | 第45-51页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-54页 |
