鸡X期胚盘细胞的冷冻保存及复苏后嵌合体鸡制备的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 鸡X期胚盘细胞和胚胎发育的影响因素 | 第11-12页 |
| ·X期胚盘细胞的特点 | 第11页 |
| ·鸡胚发育的影响因素 | 第11-12页 |
| 2 胚胎细胞超低温冷冻保存的研究 | 第12-17页 |
| ·超低温冷冻保存对细胞冷冻损伤的机理 | 第12-13页 |
| ·影响细胞超低温保存效果的因素 | 第13-15页 |
| ·细胞超低温冷冻的保存方法 | 第15页 |
| ·细胞超低温冷冻保存的意义 | 第15-16页 |
| ·超低温冷冻保存的研究进展 | 第16-17页 |
| 3 嵌合体鸡的研究 | 第17-23页 |
| ·利用BCs细胞制作嵌合体鸡 | 第17-18页 |
| ·利用PGCs细胞制作嵌合体鸡 | 第18-20页 |
| ·提高嵌合体嵌合程度的方法 | 第20-21页 |
| ·嵌合体的检测方法 | 第21-23页 |
| 4 本研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 第二章 实验部分 | 第25-51页 |
| 实验一 鸡BCs细胞冷冻保存技术的研究 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25页 |
| ·家鸡种蛋来源 | 第25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·鸡BCs细胞的分离 | 第25-26页 |
| ·鸡BCs细胞的活率检测 | 第26页 |
| ·鸡BCs细胞的冷冻保存与复苏 | 第26-28页 |
| ·复苏后BCs细胞的活率检测 | 第28页 |
| ·复苏后BCs细胞培养及形态学鉴定 | 第28-29页 |
| ·数据处理 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-30页 |
| ·复苏后BCs细胞的存活率 | 第29-30页 |
| ·复苏后BCs细胞的鉴定 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-36页 |
| ·冷冻前囊胚细胞的处理 | 第30-31页 |
| ·慢速冷冻和玻璃化冷冻的保存原理 | 第31页 |
| ·冷冻保护剂降低BCs细胞存活率的原因 | 第31-32页 |
| ·冷冻程序对BCs细胞存活率的影响 | 第32-34页 |
| ·复苏程序对BCs细胞存活率的影响 | 第34-35页 |
| ·复苏的BCs细胞生物学特性及冷冻方法效果比较 | 第35-36页 |
| 实验二 BCs细胞冷冻复苏后嵌合体鸡的制备 | 第36-51页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·供体和受体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·显微注射工具的制作 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-40页 |
| ·不同种蛋开窗对孵化率的影响 | 第37-38页 |
| ·供体(丝羽乌骨鸡)BCs细胞的复苏 | 第38页 |
| ·受体种蛋的辐射致弱 | 第38页 |
| ·家鸡嵌合体的制作 | 第38页 |
| ·嵌合体种蛋的孵化 | 第38-39页 |
| ·嵌合体检测 | 第39-40页 |
| ·数据处理 | 第40页 |
| ·结果与分析 | 第40-47页 |
| ·种蛋开窗及封口对鸡胚发育的影响 | 第40-43页 |
| ·嵌合体实验鸡胚的发育与嵌合率统计 | 第43-44页 |
| ·嵌合体鸡的生长发育和测交实验 | 第44-46页 |
| ·嵌合体鸡的PCR检测结果 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-51页 |
| ·影响嵌合体孵化率的因素 | 第47-48页 |
| ·嵌合体制作方法的探讨 | 第48-50页 |
| ·种系嵌合体细胞遗传的初探 | 第50-51页 |
| 第三章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| 附图 | 第60-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |
