| 表1 缩略词一览表 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一部分 槐耳通过抑制YAP提高奥沙利铂肝癌化疗敏感性 | 第13-36页 |
| 一、材料与方法 | 第13-23页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第13-15页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第13-14页 |
| 1.1.2 抗体 | 第14-15页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第15页 |
| 1.2 实验方法 | 第15-23页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第15-16页 |
| 1.2.2 药物配制 | 第16页 |
| 1.2.3 质粒转染 | 第16-17页 |
| 1.2.4 克隆形成实验 | 第17页 |
| 1.2.5 细胞增殖CCK-8实验 | 第17页 |
| 1.2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第17页 |
| 1.2.7 蛋白质印迹WB实验 | 第17-20页 |
| 1.2.8 实时荧光定量PCR | 第20-21页 |
| 1.2.9 免疫荧光IF | 第21-22页 |
| 1.2.10 分析GEO数据库样本信息 | 第22页 |
| 1.2.11 统计分析 | 第22-23页 |
| 二、结果 | 第23-33页 |
| 2.1 奥沙利铂抑制肝癌细胞增殖 | 第23-24页 |
| 2.1.1 不同溶剂对奥沙利铂抑制作用的影响 | 第23页 |
| 2.1.2 奥沙利铂半数抑制浓度IC50的测定 | 第23-24页 |
| 2.2 奥沙利铂对肝癌细胞凋亡的影响 | 第24页 |
| 2.3 奥沙利铂抑制Hippo信号通路 | 第24-27页 |
| 2.3.1 检索GEO数据库分析差异基因 | 第24-25页 |
| 2.3.2 奥沙利铂影响Hippo信号通路中相关蛋白的表达 | 第25-26页 |
| 2.3.3 奥沙利铂影响Hippo信号通路相关基因m RNA的表达 | 第26页 |
| 2.3.4 奥沙利铂影响YAP的亚细胞定位 | 第26-27页 |
| 2.4 敲减YAP促进肝癌细胞凋亡 | 第27页 |
| 2.5 奥沙利铂通过YAP抑制肝癌细胞的凋亡 | 第27-28页 |
| 2.6 槐耳半数抑制浓度的测定 | 第28-29页 |
| 2.7 槐耳提高奥沙利铂的化疗敏感性 | 第29-31页 |
| 2.7.1 槐耳联合奥沙利铂抑制肝癌细胞增殖 | 第29页 |
| 2.7.2 槐耳联合奥沙利铂促进肝癌细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 2.7.3 槐耳与奥沙利铂具有协同效应 | 第30-31页 |
| 2.8 槐耳通过抑制YAP的表达增加奥沙利铂肝癌化疗敏感性 | 第31-33页 |
| 2.8.1 敲减YAP增强奥沙利铂对肝癌细胞增殖的抑制作用 | 第31页 |
| 2.8.2 联合应用槐耳与奥沙利铂可激活Hippo信号通路 | 第31-33页 |
| 三、分析与讨论 | 第33-36页 |
| 第二部分 SOX9抑制YAP的降解 | 第36-53页 |
| 一、材料与方法 | 第36-41页 |
| 1.1 材料与仪器 | 第36-38页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1.2 抗体 | 第37-38页 |
| 1.1.3 实验仪器 | 第38页 |
| 1.2 实验方法 | 第38-41页 |
| 1.2.1 细胞培养 | 第38页 |
| 1.2.2 药物配制 | 第38页 |
| 1.2.3 质粒转染 | 第38-39页 |
| 1.2.4 有限稀释法筛选单克隆 | 第39页 |
| 1.2.5 蛋白质印迹WB实验 | 第39页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR | 第39页 |
| 1.2.7 免疫荧光IF | 第39页 |
| 1.2.8 裸鼠皮下成瘤实验 | 第39-40页 |
| 1.2.9 苏木素伊红HE染色 | 第40页 |
| 1.2.10 免疫组化IHC | 第40页 |
| 1.2.11 统计分析 | 第40-41页 |
| 二、结果 | 第41-50页 |
| 2.1 YAP与SOX9的表达存在相关性 | 第41-43页 |
| 2.1.1 YAP与SOX9的表达水平存在线性相关关系 | 第41页 |
| 2.1.2 SOX9基因敲减与过表达效率验证 | 第41-42页 |
| 2.1.3 SOX9促进YAP蛋白的表达 | 第42页 |
| 2.1.4 SOX9与YAP mRNA表达水平的关系 | 第42-43页 |
| 2.2 SOX9在体内抑制肝癌的生长 | 第43-44页 |
| 2.2.1 裸鼠皮下成瘤实验 | 第43页 |
| 2.2.2 裸鼠皮下移植瘤组织中SOX9与YAP表达的相关性 | 第43-44页 |
| 2.3 槐耳抑制SOX9的蛋白表达水平 | 第44页 |
| 2.4 SOX9在肝癌中的表达异常增高 | 第44-47页 |
| 2.4.1 SOX9在肝癌患者中表达增高 | 第44-45页 |
| 2.4.2 SOX9在肝癌细胞株中表达增高 | 第45-46页 |
| 2.4.3 SOX9的表达与肝癌的恶性程度有关 | 第46-47页 |
| 2.4.4 SOX9的表达与肝癌患者的预后有关 | 第47页 |
| 2.5 SOX9的表达抑制YAP的降解 | 第47-48页 |
| 2.6 SOX9的表达与YAP的生成 | 第48-49页 |
| 2.7 YAP与SOX9存在共定位 | 第49页 |
| 2.8 SOX9与YAP存在相互作用 | 第49-50页 |
| 三、分析与讨论 | 第50-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-58页 |
| 附录 | 第58-94页 |
| 文献综述 Hippo信号通路:抗肿瘤药物的新靶点 | 第58-73页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 硕士期间发表学术论文 | 第73-94页 |
