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共表达猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白和猪瘟病毒E2蛋白的重组腺病毒的免疫原性分析

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-21页
   ·猪瘟及猪瘟病毒概述第11-13页
     ·猪瘟第11页
     ·猪瘟病毒及其基因组结构第11-12页
     ·猪瘟病毒结构蛋白的结构和功能第12-13页
   ·猪瘟疫苗的研究进展第13-14页
     ·常规疫苗第13页
     ·基因重组活载体疫苗第13页
     ·基因重组嵌合疫苗第13页
     ·基因重组缺失疫苗第13-14页
     ·亚单位疫苗第14页
     ·DNA 疫苗第14页
   ·猪繁殖与呼吸综合征和猪繁殖与呼吸征病毒概述第14-15页
     ·猪繁殖与呼吸综合征第14页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒第14-15页
     ·PRRSV 主要结构蛋白的结构和功能第15页
   ·PRRS 疫苗研究进展第15-16页
     ·常规疫苗第15-16页
     ·基因工程亚单位疫苗第16页
     ·重组活载体疫苗第16页
     ·反向遗传技术疫苗第16页
     ·DNA 疫苗第16页
   ·腺病毒载体表达系统第16-19页
     ·腺病毒概述第16-17页
     ·腺病毒表达系统概述第17-18页
     ·腺病毒载体的优缺点第18页
     ·腺病毒载体在兽医中的应用第18-19页
   ·口蹄疫病毒2A 自动剪切多肽第19页
     ·口蹄疫病毒2A 多肽概述第19页
     ·口蹄疫病毒2A 的剪切机制第19页
     ·体外构建基于 FMDV 2A 的多顺反子的特点第19页
   ·本研究的背景与目的第19-21页
第二章 共表达 PRRSV GP5 和 CSFV E2 蛋白的重组腺病毒构建及其免疫原性分析第21-39页
   ·材料与方法第21-27页
     ·病毒、细胞和质粒第21页
     ·主要试剂和仪器第21页
     ·融合基因 GP5-2A-E2 的 PCR 扩增与基因克隆第21-22页
     ·重组腺病毒转移载体的构建及鉴定第22-23页
     ·腺病毒重组质粒的获得及鉴定第23页
     ·腺病毒重组质粒的转染第23-24页
     ·重组杆状病毒的 PCR 鉴定及其基因稳定性监测第24页
     ·重组腺病毒毒价的测定第24页
     ·应用间接免疫荧光试验检测 GP5 蛋白的表达第24页
     ·应用间接免疫荧光试验检测E2 蛋白的表达第24-25页
     ·Western blot 检测重组腺病毒中 GP5 蛋白的表达第25页
     ·Western blot 检测重组腺病毒中 E2 蛋白的表达第25页
     ·小鼠免疫接种第25页
     ·免疫小鼠血清中和试验第25-26页
     ·淋巴细胞增殖试验第26页
     ·兔体免疫攻毒试验第26-27页
   ·结果第27-37页
     ·目的片段的获得第27-28页
     ·重组腺病毒转移载体的构建及酶切鉴定第28-29页
     ·重组杆粒的 PCR 鉴定第29-30页
     ·重组腺病毒基因组的PCR 鉴定第30-31页
     ·PRRSVGP5 蛋白在rAdV-GP52AE2 感染293 细胞中的表达第31-32页
     ·CSFV E2 蛋白在rAdV-GP52AE2 感染293 细胞中的表达第32-33页
     ·重组腺病毒毒价的测定结果第33页
     ·免疫小鼠的 CSFV 特异性抗体产生情况第33-34页
     ·免疫小鼠可以诱导产生针对 PRRSV 和 CSFV 的特异性中和抗体第34-35页
     ·免疫小鼠的特异性淋巴细胞增殖水平第35-36页
     ·重组腺病毒免疫兔体后可以抵抗猪瘟兔化弱毒的攻击第36-37页
   ·讨论第37-39页
第三章 结论第39-40页
参考文献第40-47页
致谢第47-48页
作者简历第48页

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