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洋葱伯克氏菌在竹子和桑树根围的基因型多样性及其致病性以及壳聚糖抑制B.seminalis机理研究

致谢第1-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-16页
第一章 文献综述第16-42页
 1 洋葱伯克氏菌的种群多样性及其分类地位第16-17页
 2 Bcc在环境中的重要性及其分布情况第17-24页
   ·Bcc在环境中的益处第17-20页
     ·Bcc作为植物病害生防菌第17-18页
     ·Bcc作为植物促生菌第18-19页
     ·Bcc作为生物降解菌第19-20页
   ·Bcc的潜在风险第20-21页
     ·Bcc作为植物病原菌第20页
     ·Bcc作为植物冰核菌第20-21页
     ·Bcc作为人体条件致病菌第21页
   ·Bcc在医院环境中的分布第21-22页
   ·Bcc自然在环境中的分布情况第22-23页
   ·关于环境中的Bcc对人体的危险性的探讨第23-24页
 3 Bcc菌的鉴定方法研究进展第24-28页
   ·表型鉴定第24-25页
   ·全细胞蛋白电泳第25-26页
   ·全细胞脂肪酸分析第26页
   ·AFLP分析第26-27页
   ·基于16S rRNA的鉴定方法第27页
   ·基于recA基因的鉴定方法第27-28页
   ·基于其他保守基因的鉴定方法第28页
 4 多位点测序分型技术(MLST)第28-31页
 5 Bcc的致病性第31-35页
   ·Bcc致病因子第31-32页
   ·Bcc致病模型研究进展第32-35页
 6 壳聚糖的杀菌机制及其对Bcc的抑制效果第35-40页
   ·壳聚糖的杀菌机制第35-38页
   ·壳聚糖对Bcc的抑制效果第38-40页
 7 本研究的目的和意义第40-42页
第二章 竹子和桑树根围洋葱伯克氏菌的分离与常规鉴定第42-52页
 1 材料和方法第43-45页
   ·标准菌株与主要培养基第43页
   ·样本的采集和处理第43页
   ·细菌的分离和纯化第43-44页
   ·Bcc菌群的PCR鉴定第44-45页
     ·DNA的提取第44页
     ·Bcc菌群的PCR反应第44-45页
 2 结果与分析第45-49页
   ·Bcc菌群的PCR鉴定第45-46页
   ·Bcc菌群在三种植物根围土壤中的分布情况第46-49页
     ·Bcc在毛竹根围的分布第46-47页
     ·Bcc在雷竹根围的分布第47-48页
     ·Bcc在桑树根围的分布第48-49页
 3 结论与讨论第49-51页
   ·不同选择性培养基对Bcc菌的分离率第49页
   ·Bcc菌群的鉴定及与疑似菌株的区分第49-50页
   ·Bcc菌群在不同植物根围的分布情况第50-51页
 4 本章小结第51-52页
第三章 竹子和桑树根围洋葱伯克氏菌的特异性鉴定第52-90页
 1 材料和方法第53-57页
   ·供试菌株和主要试剂第53页
   ·Bcc菌DNA模板的制备和recA基因的扩增第53页
   ·限制性酶切长度多态性(RFLP)分析第53页
   ·Bcc基因型特异性引物PCR鉴定第53-54页
   ·Bcc菌recA基因PCR产物的测序第54-55页
   ·Bcc菌recA基因的序列分析和聚类分析第55页
   ·多位点序列分型(MLST)分析第55-57页
   ·Bcc菌的菌株多样性分析(BOX-PCR指纹图谱)第57页
 2 结果与分析第57-76页
   ·Bcc菌recA基因的RFLP分析第57-61页
     ·Bcc菌recA基因的HaeⅢ-RFLP分析第57-60页
     ·Bcc菌recA基因的MnlⅠ-RFLP分析第60-61页
   ·基因型特异性PCR结果第61-63页
     ·毛竹根围土壤来源Bcc菌的特异性PCR结果第61页
     ·雷竹根围土壤来源Bcc菌的特异性PCR结果第61-62页
     ·桑树根围土壤米源Bcc菌的特异性PCR结果第62-63页
   ·无法通过特异性PCR鉴定的菌株第63-64页
     ·毛竹根围土壤Bcc菌中待确认的菌株第63页
     ·雷竹根围土壤Bcc菌中待确认的菌株第63页
     ·桑树根围土壤Bcc菌中待确认的菌株第63-64页
   ·Bcc菌recA基因序列分析第64-69页
     ·毛竹根围Bcc菌的recA基因序列分析第64-67页
     ·雷竹根围Bcc菌的recA基因序列分析第67-68页
     ·桑树根围Bcc菌的recA基因序列分析第68-69页
   ·Bcc菌的多位点序列分型(MLST)鉴定第69-71页
   ·不同植物根围土壤中的Bcc基因型分布第71-74页
     ·毛竹根围土壤中Bcc菌的基因型分布第71-72页
     ·雷竹根围土壤中Bcc菌的基因型分布第72-73页
     ·桑树根围土壤中Bcc菌的基因型分布第73-74页
   ·Bcc的菌株多样性分析第74-76页
 3 结论与讨论第76-81页
   ·毛竹、雷竹和桑树根围土壤中Bcc菌的多样性第76-80页
     ·选择性培养基对Bcc不同基因型的偏好性第77页
     ·不同采样地点Bcc菌群的多样性比较第77-78页
     ·不同植物根围土壤中优势基因型分析第78-79页
     ·不同植物根围土壤中Bcc菌的潜在风险第79-80页
   ·各项鉴定技术对Bcc的种群研究第80-81页
 4 本章小结第81-90页
第四章 洋葱伯克氏菌的致病毒力研究第90-106页
 1 材料和方法第91-94页
   ·供试菌株和主要试剂第91页
   ·Bcc菌的活化和培养第91页
   ·Bcc菌在洋葱鳞茎上的致病性研究第91-92页
   ·Bcc菌在苜蓿模型上的毒力研究第92-93页
     ·Bcc菌悬液的准备第92页
     ·苜蓿种子的预处理第92-93页
     ·苜蓿幼苗接种第93页
   ·Bcc菌在生菜模型上的毒力研究第93-94页
     ·Bcc菌悬液的准备第93页
     ·Bcc菌在生菜上的致病性第93-94页
 2 结果与分析第94-103页
   ·Bcc菌株对洋葱的致病性第94-95页
     ·B.stabilis菌株对洋葱的致病性第94页
     ·B.anthina菌株对洋葱的致病性第94页
     ·B.pyrrocinia菌株对洋葱的致病性第94页
     ·B.arboris菌株对洋葱的致病性第94-95页
     ·9株疑似Bcc新种的菌株对洋葱的致病性第95页
     ·不同种的Bcc菌对洋葱的致病差异第95页
   ·洋葱伯克氏菌对苜蓿幼苗的毒力表现第95-98页
     ·B.stabilis菌株对苜蓿的毒力表现第96页
     ·B.anthina菌株对洋葱的毒力表现第96页
     ·B.pyrrocinia菌株对洋葱的毒力表现第96-97页
     ·B.arboris菌株对苜蓿的毒力表现第97页
     ·9株疑似Bcc新种的菌株对苜蓿的毒力表现第97页
     ·不同种的Bcc菌对苜蓿的毒力差异第97-98页
   ·洋葱伯克氏菌对生菜的致病毒力第98-103页
     ·毛竹根围土壤Bcc菌对生菜的毒力表现第98-100页
     ·雷竹根围土壤Bcc菌对生菜的致病毒力第100-101页
     ·桑树根围土壤Bcc菌对生菜的致病毒力第101-102页
     ·不同种Bcc菌对生菜的致病毒力第102-103页
 3 结论与讨论第103-105页
   ·Bcc菌对洋葱的致病性第103页
   ·Bcc菌对苜蓿的致病毒力第103-104页
   ·Bcc菌对生菜的致病毒力第104-105页
 4 本章小结第105-106页
第五章 壳聚糖对洋葱伯克氏菌的抑菌机理研究第106-122页
 1 材料和方法第107-111页
   ·供试菌株和主要试剂第107页
   ·壳聚糖分子量和脱乙酰度的测定第107页
   ·Bcc菌的活化和培养和壳聚糖母液的配置第107-108页
   ·细菌悬浮液的制备和活菌计数方法第108页
   ·壳聚糖对浮游态Bcc菌的抑菌实验第108页
   ·壳聚糖对生物膜Bcc菌的抑菌实验第108-109页
   ·壳聚糖对Bcc菌细胞膜完整性的影响第109页
   ·壳聚糖对Bcc菌细胞膜通透性的影响第109-110页
   ·透射电镜观察(TEM)第110-111页
 2 结果与分析第111-118页
   ·壳聚糖对浮游态Bcc菌的抑菌实验第111-112页
     ·壳聚糖种类以及浓度对抑制Bcc菌的影响第111页
     ·壳聚糖处理Bcc的时间对其抑制作用的影响第111-112页
   ·壳聚糖抑制B.seminalis的机制第112-117页
     ·壳聚糖对B.seminalis细胞膜完整性的影响第112-115页
     ·壳聚糖对B.seminalis细胞膜外膜通透性的影响第115-116页
     ·壳聚糖处理B.seminalis的透射电镜观察第116-117页
   ·壳聚糖对B.seminalis生物膜的抑制作用第117-118页
 3 结论与讨论第118-121页
   ·壳聚糖对浮游态B.seminalis的抑菌作用第118-119页
   ·壳聚糖抑制B.seminalis的机制第119-120页
   ·壳聚糖对B.seminalis生物膜的影响第120-121页
 4 本章小结第121-122页
参考文献第122-140页
附录第140-141页

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