| 前言 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-19页 |
| ·淀粉酶 | 第13-15页 |
| ·淀粉酶的定义 | 第13页 |
| ·淀粉酶的分类 | 第13-15页 |
| ·α-淀粉酶 | 第15-18页 |
| ·α-淀粉酶简介 | 第15页 |
| ·α-淀粉酶的主要应用 | 第15-16页 |
| ·α-淀粉酶的结构 | 第16-18页 |
| ·多功能淀粉酶 | 第18页 |
| ·选题背景与研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 多功能淀粉酶OPMA-G及模块重组体的克隆、表达与纯化 | 第19-38页 |
| ·引言 | 第19页 |
| ·实验材料 | 第19-20页 |
| ·重组质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20页 |
| ·实验方法 | 第20-31页 |
| ·质粒的制备(碱裂解法) | 第20-22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22-23页 |
| ·目的基因的制备 | 第23-24页 |
| ·目的基因的酶切 | 第24-25页 |
| ·目的基因酶切后凝胶回收试剂盒回收DNA | 第25页 |
| ·目的片段与酶切载体的连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第25-26页 |
| ·目的基因的转化 | 第26页 |
| ·质粒DNA浓度测定 | 第26页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第26-27页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·表达菌体的超声破碎 | 第28页 |
| ·包涵体的洗涤 | 第28页 |
| ·Ni~(2+)-NTA柱亲和层析纯化蛋白 | 第28-29页 |
| ·包涵体复性 | 第29-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-37页 |
| ·模块重组体OPMA-GFGOPMA-GC基因的克隆 | 第31-33页 |
| ·多功能淀粉酶OPMA-G和模块重组体的表达 | 第33-34页 |
| ·多功能淀粉酶OPMA-G和模块重组体包涵体的洗涤 | 第34-35页 |
| ·多功能淀粉酶OPMA-G和模块重组体的纯化 | 第35-36页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第36-37页 |
| 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 多功能淀粉酶OPMA-G及模块重组体酶学性质的分析 | 第38-49页 |
| ·引言 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·淀粉酶活力的测定 | 第39-40页 |
| ·酶催化淀粉降解产物分析 | 第40页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第40页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第40-41页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第41页 |
| ·Ca~(2+)对酶活性的影响 | 第41-42页 |
| ·动力学参数的测定 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-48页 |
| ·酶活力的测定 | 第42-43页 |
| ·底物、产物特异性的分析 | 第43-44页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第44页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第44-45页 |
| ·Ca~(2+)对酶活性的影响 | 第45-46页 |
| ·动力学参数测定 | 第46-48页 |
| 小结 | 第48-49页 |
| 全文总结 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
