摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
英文缩略词表 | 第9-11页 |
前言 | 第11-13页 |
1 干扰素的分类及生物学活性 | 第11-12页 |
2 干扰素发挥作用的途径 | 第12页 |
3 干扰素α应答基因(IFRG) | 第12-13页 |
第一部分 IFRG基因的扩增及RT-PCR检测IFRG基因在兔不同组织中的表达 | 第13-22页 |
一 材料和方法 | 第13-20页 |
(一) 实验材料 | 第13-15页 |
1 主要试剂 | 第13-14页 |
2 主要仪器设备 | 第14-15页 |
3 主要试剂的配制 | 第15页 |
(二) 实验方法 | 第15-20页 |
1 兔卵巢中总RNA的提取 | 第16页 |
2 逆转录反应 | 第16-17页 |
3 聚合酶链式反应(PCR) | 第17-18页 |
4 琼脂糖凝胶电泳 | 第18-19页 |
5 PCR扩增产物的回收纯化 | 第19页 |
6 RT-PCR检测IFRG基因在兔七种不同组织的表达情况 | 第19-20页 |
二 结果 | 第20-21页 |
三 小结 | 第21-22页 |
第二部分 IFRG基因的克隆 | 第22-30页 |
一 材料和方法 | 第22-27页 |
(一) 实验材料 | 第22-24页 |
1 主要试剂 | 第22-23页 |
2 主要试剂的配制 | 第23-24页 |
(二) 实验方法 | 第24-27页 |
1 pGEM-T/IFRG重组质粒的构建 | 第24页 |
2 重组质粒的转化与筛选 | 第24-26页 |
3 pGEM-T/IFRG重组质粒的酶切鉴定 | 第26页 |
4 pGEM-T/IFRG重组质粒的测序鉴定 | 第26-27页 |
二 结果 | 第27-29页 |
三 小结 | 第29-30页 |
第三部分 IFRG基因在E.coloBL21(DE3)中的表达 | 第30-41页 |
一 材料与方法 | 第30-37页 |
(一) 实验材料 | 第30-33页 |
1 主要试剂 | 第30-31页 |
2 主要试剂的配制 | 第31-33页 |
(二) 实验方法 | 第33-37页 |
1 IFRG基因原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
2 感受态E.coliBL21的转化及筛选 | 第34页 |
3 重组质粒的提取 | 第34-35页 |
4 重组表达质粒的鉴定 | 第35页 |
5 pET-41(c)- IFRG原核表达质粒在E.coliBL21(DE3)中的表达 | 第35-37页 |
二 结果 | 第37-40页 |
三 小结 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
致谢 | 第48-49页 |