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食蟹猴MHC-IB等位基因鉴定及分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-11页
第一章 绪论第11-24页
   ·概述第11-12页
   ·MHC 基因的概况第12-18页
     ·MHC I 分子结构特征第12-14页
     ·MHC 的遗传学特点第14-16页
     ·MHC 分子的功能第16页
     ·MHC 的应用第16-18页
   ·灵长类 MHC I 类基因总体研究第18-20页
   ·食蟹猴 MHC 的研究第20-22页
   ·本论文的研究意义及技术路线第22-24页
     ·本论文的研究意义第22页
     ·本论文的技术路线第22-24页
第二章 食蟹猴外周血淋巴细胞基因组提取及永生化细胞的培养第24-31页
   ·实验材料第24-27页
     ·动物及细胞材料第24页
     ·主要药品与耗材第24-25页
     ·主要设备与仪器第25-26页
     ·溶液配制第26-27页
   ·实验方法第27-28页
     ·食蟹猴永生化细胞系JOBCL 培养第27-28页
     ·酚-氯仿法提取基因组 DNA第28页
   ·结果与讨论第28-30页
     ·永生化细胞系培养第28-29页
     ·全血基因组 DNA 提取第29页
     ·讨论第29-30页
   ·小结第30-31页
第三章 食蟹猴MHC-B 等位基因克隆测序第31-62页
   ·实验材料第31-36页
     ·食蟹猴基因组DNA第31页
     ·载体第31-32页
     ·主要药品与耗材第32-33页
     ·主要设备与仪器第33页
     ·溶液配制第33-36页
   ·实验方法第36-47页
     ·感受态细胞制备第36页
     ·引物设计第36-40页
     ·1%琼脂糖凝胶电泳检测第40页
     ·DNA 片段回收及纯化第40-41页
     ·连接反应和重组质粒的转化第41-43页
     ·食蟹猴、恒河猴及人 MHC-I B 基因同源性分析第43-46页
     ·等位基因鉴定及新等位基因命名第46-47页
   ·结果与讨论第47-61页
     ·特异性引物第47-49页
     ·基因组 PCR 扩增产物第49页
     ·阳性克隆子检测结果第49-50页
     ·菌液 PCR 扩增结果第50页
     ·酶切电泳鉴定结果第50-51页
     ·实验所得基因种类及命名第51-52页
     ·食蟹猴 MHC-I B 基因外显子及内含子序列分析第52-53页
     ·Mafa-B 基因编码的氨基酸序列分析第53-54页
     ·实验技术讨论第54-57页
     ·Mafa-B 基因、Mamu-B 基因及 HLA-B 基因同源性分析第57-58页
     ·食蟹猴 MHC-B 基因特点及与恒河猴、人的同源性关系第58-59页
     ·不同种猴 MHC-B 等位基因共享情况第59-60页
     ·实验引物特异性分析第60-61页
   ·小结第61-62页
第四章 食蟹猴MHC-B 等位基因高频位点筛选第62-74页
   ·实验材料第62-63页
     ·基因组样本第62页
     ·主要试剂与耗材第62页
     ·主要设备与仪器第62-63页
     ·溶液配制第63页
   ·实验方法第63-68页
     ·新等位基因氨基酸位点分析第63-64页
     ·引物设计第64-67页
     ·PCR 扩增第67-68页
   ·结果与讨论第68-71页
     ·氨基酸序列分区及二级结构预测结果第68-70页
     ·高变位点特异性引物第70页
     ·PCR 产物第70-71页
     ·PCR 产物测序第71页
     ·新等位基因分布频率第71页
   ·小结第71-74页
结论与展望第74-75页
 结论第74页
 展望第74-75页
参考文献第75-79页
附录第79-82页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第82-83页
致谢第83页

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