产脂肪酶菌株的筛选、鉴定及产酶条件优化
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 前言 | 第10-28页 |
| ·脂肪酶的简介 | 第10-13页 |
| ·脂肪酶的分子结构及特征 | 第11-12页 |
| ·脂肪酶的作用机理 | 第12-13页 |
| ·产脂肪酶的微生物 | 第13-14页 |
| ·产脂肪酶菌的筛选方法 | 第14-15页 |
| ·脂肪酶活性测定方法 | 第15-17页 |
| ·碱滴定法 | 第16页 |
| ·PNPB法 | 第16页 |
| ·皂铜法 | 第16-17页 |
| ·脂肪酶活性的影响因素 | 第17页 |
| ·生物柴油概述 | 第17-27页 |
| ·生物柴油研究现状 | 第17-18页 |
| ·生物柴油的制备方法 | 第18-25页 |
| ·直接混合法 | 第18-19页 |
| ·热解法 | 第19页 |
| ·微乳化法 | 第19页 |
| ·酯交换法 | 第19-25页 |
| ·生物柴油的发展趋势 | 第25-27页 |
| ·国外生物柴油的进展 | 第25-26页 |
| ·国内生物柴油的进展 | 第26-27页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第27页 |
| ·创新 | 第27-28页 |
| ·本研究的技术路线 | 第28页 |
| 2 实验材料、试剂及仪器 | 第28-31页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28-29页 |
| ·购买试剂 | 第28页 |
| ·配制试剂 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备 | 第29页 |
| ·培养基 | 第29-31页 |
| 3 实验方法 | 第31-39页 |
| ·产脂肪酶菌株的筛选 | 第31-32页 |
| ·富集培养 | 第31页 |
| ·平板分离 | 第31页 |
| ·产脂肪酶菌株的复筛 | 第31页 |
| ·脂肪酶产生菌的保藏方法 | 第31页 |
| ·脂肪酶活性的测定 | 第31-32页 |
| ·菌株分类鉴定 | 第32-33页 |
| ·革兰氏染色 | 第32页 |
| ·固体平板上的菌落形态观察 | 第32页 |
| ·运动性试验 | 第32-33页 |
| ·不同温度对生长影响的测定 | 第33页 |
| ·细菌的生理生化特征试验 | 第33-34页 |
| ·16S rRNA序列分析 | 第34-36页 |
| ·细菌基因组DNA的提取 | 第34页 |
| ·16S rRNA基因的扩增及分析 | 第34-36页 |
| ·Fur基因序列分析 | 第36-39页 |
| ·B.cepacia全基因组DNA提取 | 第36页 |
| ·Fur基因扩增及分析 | 第36-37页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第37-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-57页 |
| ·菌株筛选 | 第39-40页 |
| ·菌株的鉴定 | 第40-45页 |
| ·菌株C737-11的鉴定 | 第40-44页 |
| ·形态学、生理生化特征 | 第40页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第40-44页 |
| ·菌株C7828-5的鉴定 | 第44-45页 |
| ·形态学、生理生化特征 | 第44页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第44-45页 |
| ·产酶条件优化 | 第45-54页 |
| ·C737-11菌株的产酶条件优化 #36. | 第45-47页 |
| ·碳、氮源优化 | 第45-46页 |
| ·不同起始pH对产酶的影响 | 第46-47页 |
| ·C7828-5菌株的产酶条件优化 | 第47-54页 |
| ·菌株生长产酶培养基优化 | 第47-51页 |
| ·金属离子对产酶的影响 | 第51页 |
| ·菌株产酶条件优化 | 第51-54页 |
| ·酶学性质研究 | 第54-57页 |
| ·C737-11脂肪酶的酶学特性 | 第54-56页 |
| ·酶反应最适温度 | 第54页 |
| ·酶反应的最适pH | 第54-55页 |
| ·酶的热稳定性 | 第55页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第55-56页 |
| ·C7828-5脂肪酶的酶学特性 | 第56-57页 |
| ·酶反应的最适温度 | 第56页 |
| ·酶反应的最适pH | 第56页 |
| ·酶的热稳定性 | 第56页 |
| ·酶的pH稳定性 | 第56-57页 |
| 5 讨论 | 第57-61页 |
| ·脂肪酶产生菌的筛选 | 第57-59页 |
| ·菌株的鉴定 | 第59-60页 |
| ·脂肪酶活力测定方法的选择 | 第60页 |
| ·菌株的产酶条件优化 | 第60-61页 |
| ·脂肪酶的酶学性质 | 第61页 |
| 6 结论 | 第61-63页 |
| 7 存在的问题与讨论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
