| 致谢 | 第1-12页 |
| 摘要 | 第12-16页 |
| Abstract | 第16-21页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 第一部分 文献综述 | 第22-36页 |
| 第一章 昆虫卵黄蛋白及其受体的研究进展 | 第23-33页 |
| 1 昆虫卵黄原蛋白及其基因特征 | 第23-25页 |
| 2 昆虫卵黄蛋白受体及其基因功能 | 第25-28页 |
| ·昆虫VgR结构及特性 | 第26-27页 |
| ·昆虫VgR基因 | 第27页 |
| ·昆虫VgR基因cDNA的克隆方法 | 第27-28页 |
| 3 昆虫VgR基因的表达研究 | 第28-30页 |
| ·昆虫VgR基因在不同发育阶段的表达特性 | 第28-29页 |
| ·昆虫VgR基因及蛋白的组织特异性表达 | 第29-30页 |
| 4 卵黄蛋白及其受体基因上游启动子元件 | 第30页 |
| 5 展望 | 第30-33页 |
| 第二章 烟粉虱生殖生物学的研究进展 | 第33-36页 |
| 1 重要入侵生物烟粉虱的种类和特征 | 第33-34页 |
| 2 双生病毒对烟粉虱生殖发育的影响 | 第34-36页 |
| 第二部分 研究内容 | 第36-140页 |
| 第三章 烟粉虱内生殖系统结构与发育动态 | 第37-43页 |
| 1 材料与方法 | 第38-39页 |
| ·供试昆虫和植物 | 第38页 |
| ·内生殖系统观察 | 第38-39页 |
| ·醋酸胭脂红染色 | 第39页 |
| ·两种生物型烟粉虱的卵巢发育动态比较 | 第39页 |
| ·数据分析与处理 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·B型烟粉虱雌成虫卵巢和雄成虫生殖系统 | 第39-40页 |
| ·卵巢发育动态比较 | 第40-42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 第四章 烟粉虱卵子发生和精子发生 | 第43-59页 |
| 1 材料与方法 | 第43-46页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第43-44页 |
| ·卵巢内Vt的免疫定位 | 第44页 |
| ·细胞骨架(微管与微丝)蛋白的定位与荧光观察 | 第44-45页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第45页 |
| ·激光共聚焦 | 第45-46页 |
| ·透射电镜 | 第46页 |
| ·精子形态及染色分析 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-58页 |
| ·卵子发生 | 第46-50页 |
| ·细胞骨架与物质流动 | 第50-54页 |
| ·烟粉虱各发育时期卵子的超微结构 | 第54-56页 |
| ·烟粉虱精子的形态结构 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-59页 |
| 第五章 烟粉虱卵黄蛋白单克隆抗体和多克隆抗体的制备 | 第59-66页 |
| 1 材料与方法 | 第59-62页 |
| ·供试昆虫和植物 | 第59-60页 |
| ·烟粉虱卵的收集 | 第60页 |
| ·抗原的制备 | 第60页 |
| ·单克隆单体的制备 | 第60页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第60-61页 |
| ·IgG亚类的决定及其酶标抗体的制备 | 第61页 |
| ·多克隆抗体的制备 | 第61页 |
| ·抗体效价的测定 | 第61页 |
| ·不同组织Vg的SDS-PAGE电泳检测及Western-blot分析 | 第61-62页 |
| ·不同生物型烟粉虱卵黄蛋白检测 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-65页 |
| ·抗B型烟粉Vt杂交瘤细胞的筛选 | 第62-63页 |
| ·单克隆、多克隆抗体的纯化 | 第63页 |
| ·烟粉虱卵黄蛋白单克隆的性质及效价的测定 | 第63-64页 |
| ·不同组织烟粉虱卵黄蛋白分析 | 第64-65页 |
| ·烟粉虱卵黄蛋白单克隆抗体的共免疫结合 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-66页 |
| 第六章 B型烟粉虱卵黄蛋白特征及卵黄发生 | 第66-73页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第66页 |
| ·卵黄蛋白纯化及特性的分析 | 第66-68页 |
| ·取食棉花的烟粉虱卵巢和血淋巴样品制备 | 第68页 |
| ·双抗夹心ELISA | 第68-69页 |
| ·数据统计和分析 | 第69页 |
| 2 结果与分析 | 第69-72页 |
| ·卵黄蛋白分离纯化及性质 | 第69-70页 |
| ·卵黄发生时间动态 | 第70-72页 |
| 3 讨论 | 第72-73页 |
| 第七章 B型烟粉虱卵黄蛋白基因的克隆及发育表达 | 第73-90页 |
| 1 材料与方法 | 第73-80页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第73页 |
| ·总RNA的提取 | 第73-74页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第74页 |
| ·PCR产物的纯化 | 第74-75页 |
| ·大肠杆菌DH5α/TG_1感受态细胞的制备 | 第75页 |
| ·目的片段与克隆载体连接以及转化至感受态细胞 | 第75-76页 |
| ·质粒DNA的抽提 | 第76页 |
| ·转化子的鉴定和测序 | 第76-77页 |
| ·Vg基因cDNA序列的获得 | 第77页 |
| ·Vg基因cDNA的5'末端和3'末端的获得 | 第77页 |
| ·氨基酸序列比较和聚类分析 | 第77-79页 |
| ·烟粉虱卵黄蛋白基因转录水平的检测 | 第79-80页 |
| ·数据分析 | 第80页 |
| 2 结果与分析 | 第80-88页 |
| ·Vg基因cDNA全长克隆、序列测定及分析 | 第80-87页 |
| ·烟粉虱卵黄蛋白基因同源性比对及发育进化分析 | 第87页 |
| ·卵黄蛋白基因的转录表达 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-90页 |
| 第八章 Q型和ZHJ2型烟粉虱Vg基因克隆及序列分析 | 第90-110页 |
| 1 材料与方法 | 第90-94页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第90页 |
| ·烟粉虱卵巢的解剖 | 第90页 |
| ·总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第90-91页 |
| ·ZHJ-I/Q型烟粉虱Vg基因cDNA序列片段的获得 | 第91页 |
| ·Vg基因cDNA的5'末端和3'末端的获得 | 第91-92页 |
| ·氨基酸序列比较和聚类分析 | 第92-93页 |
| ·Vg基因转录的测定 | 第93-94页 |
| ·数据分析 | 第94页 |
| 2 结果与分析 | 第94-109页 |
| ·两种生物型烟粉虱Vg基因克隆、序列测定及分析 | 第94-105页 |
| ·三种生物型烟粉虱Vg基因序列结构的比较分析 | 第105-106页 |
| ·进化树构建以及蛋白质三维结构解析 | 第106-109页 |
| 3 讨论 | 第109-110页 |
| 第九章 烟粉虱卵黄蛋白受体基因的克隆及表达分析 | 第110-129页 |
| 1 材料与方法 | 第110-115页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第110页 |
| ·烟粉虱卵巢的解剖 | 第110页 |
| ·总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第110页 |
| ·VgR基因cDNA序列片段的获得 | 第110-111页 |
| ·VgR基因cDNA的5'末端和3'末端的获得 | 第111页 |
| ·氨基酸序列比较和聚类分析 | 第111页 |
| ·烟粉虱卵黄蛋白基因转录水平的检测 | 第111-113页 |
| ·VgR基因的原核表达 | 第113-114页 |
| ·数据分析 | 第114-115页 |
| 2 结果与分析 | 第115-127页 |
| ·VgR基因克隆、序列测定及分析 | 第115-119页 |
| ·基因序列分析及蛋白质结构比较 | 第119-125页 |
| ·VgR基因转录表达 | 第125页 |
| ·原核表达分析 | 第125-127页 |
| 3 讨论 | 第127-129页 |
| 第十章 感染TYLCCNV对烟粉虱生殖力及Vg/VgR基因转录影响 | 第129-140页 |
| 1 材料与方法 | 第129-131页 |
| ·供试昆虫与植物 | 第129-130页 |
| ·烟粉虱卵子级别划分 | 第130页 |
| ·感染TYLCCNV病毒后烟粉虱卵巢发育的变化 | 第130页 |
| ·感染TYLCCNV病毒后烟粉虱生殖力的变化 | 第130页 |
| ·感染TYLCCNV对烟粉虱Vg/VgR基因转录和表达的影响 | 第130-131页 |
| ·数据分析与处理 | 第131页 |
| 2 结果分析 | 第131-135页 |
| ·感毒对烟粉虱卵巢内各级别卵子数目的影响 | 第131-132页 |
| ·感毒对烟粉虱生殖力的影响 | 第132-135页 |
| ·感染TYLCCNV对B型烟粉虱Vg和VgR基因转录及表达的影响 | 第135页 |
| 3 讨论 | 第135-140页 |
| 第三部分 总讨论 | 第140-145页 |
| 参考文献 (References) | 第145-154页 |
| 附录 | 第154-155页 |
