摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
缩略词 | 第10-11页 |
前言 | 第11-13页 |
实验材料 | 第13-15页 |
1.主要试剂 | 第13-14页 |
2.主要耗材 | 第14-15页 |
3.仪器设备 | 第15页 |
实验方法 | 第15-25页 |
1.细胞株来源 | 第15-16页 |
2.细胞培养 | 第16-18页 |
2.1 细胞复苏 | 第16页 |
2.2 细胞传代 | 第16页 |
2.3 细胞冻存 | 第16-17页 |
2.4 感受态细胞制备 | 第17-18页 |
3.蛋白免疫印迹技术(Western blotting) | 第18-20页 |
3.1 细胞蛋白提取 | 第18页 |
3.2 配制凝胶电泳和跑电泳 | 第18-19页 |
3.3 转膜 | 第19页 |
3.4 免疫反应 | 第19页 |
3.5 显影液和定影液曝光 | 第19-20页 |
4.质粒和siRNA转染技术 | 第20-21页 |
4.1 质粒转染技术 | 第20页 |
4.2 siRNA转染技术 | 第20-21页 |
3.实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR实验) | 第21-23页 |
5.1 RNA提取 | 第21页 |
5.2 RNA的反转录 | 第21-22页 |
5.3 qRT-PCR | 第22-23页 |
6.免疫荧光技术 | 第23页 |
7.CCK-8细胞增殖实验 | 第23-24页 |
8.Transwell小室侵袭实验 | 第24页 |
9.迁移实验(cell migration assay) | 第24-25页 |
10.统计学处理 | 第25页 |
实验结果 | 第25-31页 |
1.应用免疫共沉淀技术证明USP11与VGLL4相互作用 | 第25-26页 |
2.USP11与VGLL4相互作用区域鉴定 | 第26-28页 |
3.USP11通过去泛素化作用稳定VGLL4 | 第28-29页 |
4.USP11的沉默促进细胞生长、侵袭和转移 | 第29-31页 |
实验讨论 | 第31-32页 |
实验结论 | 第32页 |
全文总结 | 第32-33页 |
参考文献 | 第33-35页 |
致谢 | 第35-37页 |
攻读硕士学位期间已发表论文 | 第37页 |