摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
第一章 前言 | 第8-17页 |
一、人类特有遗传变异对大脑功能的影响 | 第10-12页 |
二、非编码RNA在中枢神经系统的调控 | 第12-16页 |
三、本研究的意义 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-33页 |
一、细胞培养 | 第17-19页 |
1、ReNcell CX细胞的培养 | 第17-18页 |
2、HEK 293T细胞的培养 | 第18-19页 |
二、ReNcell慢病毒感染 | 第19-22页 |
1、质粒DNA制备 | 第19-20页 |
2、慢病毒制备 | 第20-21页 |
3、慢病毒感染和阳性细胞筛选建系 | 第21-22页 |
三、基因表达量检测 | 第22-27页 |
1、RNA提取 | 第22-23页 |
2、反转录 | 第23-24页 |
3、实时荧光定量PCR | 第24-27页 |
四、细胞表型检测 | 第27-32页 |
1、细胞增殖 | 第27-28页 |
2、Transwell法检测细胞迁移 | 第28-29页 |
3、流式检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
4、检测细胞衰老 | 第30-31页 |
5、免疫荧光染色 | 第31-32页 |
五、统计学处理 | 第32-33页 |
第三章 结果与讨论 | 第33-50页 |
一、成功构建miR-941过表达ReNcell CX细胞稳转系 | 第33-35页 |
二、miR-941过表达引起ReNcell细胞形态变化 | 第35-38页 |
三、miR-941过表达使ReNcell细胞增殖变缓、迁移能力增强 | 第38-41页 |
四、miR-941过表达系细胞骨架中微管和微丝异常 | 第41-46页 |
五、miR-941可能促进细胞衰老和凋亡 | 第46-48页 |
六、检测过表达细胞系miR-941宿主基因及干性相关基因的变化 | 第48-50页 |
小结 | 第50-51页 |
展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
在研期间研究成果 | 第57-58页 |
致谢 | 第58-59页 |