摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 前言 | 第13-28页 |
1.1 氧化还原酶研究进展 | 第13-14页 |
1.2 植物抗氧化作用机制 | 第14-24页 |
1.2.1 活性氧的来源 | 第15-17页 |
1.2.2 活性氧的生物学效应 | 第17-18页 |
1.2.3 植物抗氧化系统 | 第18-24页 |
1.3 mRNA选择性剪接概述 | 第24-26页 |
1.4 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
第二章 材料与方法 | 第28-56页 |
2.1 实验材料 | 第28-33页 |
2.1.1 水稻材料 | 第28页 |
2.1.2 质粒和菌株 | 第28-29页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第29-31页 |
2.1.4 常用溶液 | 第31页 |
2.1.5 常用培养基 | 第31-33页 |
2.2 实验方法 | 第33-56页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第33页 |
2.2.2 实验所用引物及构建的质粒图谱 | 第33-36页 |
2.2.3 常用实验技术 | 第36-43页 |
2.2.4 遗传表达载体的构建 | 第43-47页 |
2.2.5 水稻材料的生长 | 第47-48页 |
2.2.6 水稻遗传转化 | 第48-49页 |
2.2.7 转基因水稻的鉴定 | 第49页 |
2.2.8 GUS组织化学分析 | 第49-50页 |
2.2.9 亚细胞定位分析 | 第50-52页 |
2.2.10 转基因水稻抗氧化酶活性检测 | 第52-54页 |
2.2.11 抗氧化酶同工酶基因的检测 | 第54页 |
2.2.12 OsOT.1蛋白酵母实验 | 第54-56页 |
第三章 结果与分析 | 第56-78页 |
3.1 水稻中的OsOT基因及其编码的蛋白序列分析 | 第56-60页 |
3.2 OsOT基因表达模式分析 | 第60-63页 |
3.2.1 组织定位载体的构建 | 第60-61页 |
3.2.2 组织定位转基因水稻的鉴定 | 第61-62页 |
3.2.3 qRT-PCR分析OsOT基因组织表达模式 | 第62页 |
3.2.4 OsOT基因组织表达模式分析 | 第62-63页 |
3.3 OsOT蛋白亚细胞定位分析 | 第63-65页 |
3.3.1 亚细胞定位表达载体的构建 | 第63-64页 |
3.3.2 OsOT蛋白的亚细胞定位 | 第64-65页 |
3.4 CRISPR/Cas9基因编辑分析 | 第65-70页 |
3.4.1 CRISPR/Cas9基因编辑载体的构建 | 第65-67页 |
3.4.2 CRISPR/Cas9转基因植株的鉴定 | 第67页 |
3.4.3 CRISPR/Cas9转基因水稻的突变类型分析 | 第67-70页 |
3.5 OsOT基因在水稻氧化胁迫中的功能探究 | 第70-75页 |
3.5.1 OsOT基因超量表达载体的构建 | 第70-71页 |
3.5.2 OsOT基因超量表达转基因水稻的鉴定 | 第71页 |
3.5.3 qRT-PCR检测超量表达转基因水稻中OsOT基因的表达水平 | 第71-72页 |
3.5.4 OsOT转基因水稻中抗氧化酶活性分析 | 第72-73页 |
3.5.5 OsOT转基因水稻中活性氧清除相关基因的表达分析 | 第73-75页 |
3.6 OsOT.1蛋白酵母杂交实验 | 第75-78页 |
3.6.1 OsOT.1蛋白BD载体的构建 | 第75-76页 |
3.6.2 OsOT.1蛋白自激活分析 | 第76-77页 |
3.6.3 OsOT.1蛋白酵母杂交实验 | 第77-78页 |
第四章 讨论 | 第78-81页 |
4.1 OsOT蛋白的组织定位 | 第78页 |
4.2 OsOT基因在水稻氧化胁迫调控中的作用 | 第78-81页 |
第五章 总结与展望 | 第81-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
附录 | 第89-91页 |
致谢 | 第91页 |