| 摘要 | 第7-8页 |
| 文献综述 | 第8-15页 |
| 1 原代细胞培养 | 第8-10页 |
| 1.1 原代细胞培养体系 | 第8-9页 |
| 1.2 原代细胞标准化培养 | 第9-10页 |
| 2 气-液界面培养技术 | 第10-11页 |
| 2.1 ALI培养技术概括 | 第10-11页 |
| 2.2 ALI培养的细胞类型 | 第11页 |
| 3 猪呼吸道上皮细胞ALI培养技术研究进展 | 第11-15页 |
| 3.1 猪呼吸道上皮细胞结构 | 第11-12页 |
| 3.2 呼吸道上皮细胞的生理功能 | 第12-13页 |
| 3.3 猪呼吸道上皮细胞ALI培养技术的研究进展 | 第13-14页 |
| 3.4 本研究的目的和意义 | 第14-15页 |
| 第一章 猪气管上皮细胞ALI体外分化培养模型建立 | 第15-46页 |
| 1 引言 | 第15页 |
| 2 试验材料 | 第15-19页 |
| 2.1 试验动物 | 第15页 |
| 2.2 试验试剂 | 第15-19页 |
| 2.3 试验用品 | 第19页 |
| 2.4 试验仪器 | 第19页 |
| 3 试验方法 | 第19-27页 |
| 3.1 试验动物的筛选 | 第19-20页 |
| 3.2 Transwell insert支持膜的准备 | 第20-21页 |
| 3.3 链酶蛋白酶分离PTEC时间的筛选 | 第21-22页 |
| 3.4 不同细胞接种密度对PTEC贴壁能力和建立ALI时间的观察 | 第22页 |
| 3.5 生长培养基的筛选 | 第22-23页 |
| 3.6 ALI培养体系的筛选 | 第23-24页 |
| 3.7 ALI培养气管上皮细胞 | 第24-25页 |
| 3.8 PTEC体外分化培养模型的鉴定 | 第25-27页 |
| 4 试验结果 | 第27-42页 |
| 4.1 试验动物的筛选结果 | 第27-30页 |
| 4.2 不同链酶蛋白酶分离时间对PTEC相关指标的影响 | 第30-31页 |
| 4.3 不同细胞接种密度对PTEC贴壁能力和建立ALI时间的影响 | 第31页 |
| 4.4 生长培养基的筛选结果 | 第31-34页 |
| 4.5 ALI培养体系的筛选结果 | 第34-38页 |
| 4.6 PTEC体外分化模型的鉴定 | 第38-42页 |
| 5 讨论 | 第42-46页 |
| 5.1 影响分离细胞活力的因素 | 第42页 |
| 5.2 细胞连接对细胞贴壁能力的影响 | 第42-43页 |
| 5.3 细胞外基质对细胞黏附的影响 | 第43页 |
| 5.4 细胞贴壁、增殖和分化过程 | 第43-44页 |
| 5.5 评价细胞分化状态 | 第44页 |
| 5.6 培养基对细胞生长和分化的影响 | 第44-46页 |
| 第二章 复苏冻存原代猪气管上皮细胞ALI培养模型建立 | 第46-51页 |
| 1 引言 | 第46页 |
| 2 试验材料 | 第46页 |
| 2.1 试验试剂 | 第46页 |
| 2.2 试验用品 | 第46页 |
| 2.3 试验仪器 | 第46页 |
| 3 试验方法 | 第46-48页 |
| 3.1 冻存原代猪气管上皮细胞 | 第46-47页 |
| 3.2 复苏冻存PTEC | 第47页 |
| 3.3 ALI培养复苏的冻存气管上皮细胞 | 第47-48页 |
| 4 试验结果 | 第48-50页 |
| 4.1 复苏冻存PTEC活力及贴壁率结果 | 第48页 |
| 4.2 光学显微镜观察PTEC的形态 | 第48-49页 |
| 4.3 冻存PTEC的电生理特征测定结果 | 第49页 |
| 4.4 扫描电子显微镜观察结果 | 第49-50页 |
| 5 讨论 | 第50-51页 |
| 第三章 猪气管上皮细胞ALI体外分化培养技术的标准化 | 第51-55页 |
| 1 引言 | 第51页 |
| 2 材料 | 第51-52页 |
| 3 方法 | 第52-55页 |
| 3.1 Transwell insert支持膜的准备 | 第52页 |
| 3.2 猪气管组织的分离 | 第52页 |
| 3.3 气管上皮细胞的分离 | 第52-53页 |
| 3.4 冻存细胞 | 第53页 |
| 3.5 复苏冻存细胞 | 第53页 |
| 3.6 接种细胞于Transwell insert支持膜 | 第53页 |
| 3.7 ALI培养与维持 | 第53-54页 |
| 3.8 评价PTEC的生理特征 | 第54-55页 |
| 全文总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| Abstract | 第61页 |
| 英文缩略词表 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
