| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 前言 | 第16-27页 |
| 1.1 影响甘蔗糖分含量和产量的主要因素 | 第16-18页 |
| 1.1.1 品种 | 第16页 |
| 1.1.2 气候 | 第16页 |
| 1.1.3 施肥和耕作方式 | 第16-17页 |
| 1.1.4 外源激素 | 第17页 |
| 1.1.5 病虫害 | 第17-18页 |
| 1.2 甘蔗蔗糖合成和运输机理 | 第18-21页 |
| 1.2.1 源叶中蔗糖的合成途径 | 第18-19页 |
| 1.2.2 甘蔗蔗茎中蔗糖的积累过程 | 第19-21页 |
| 1.3 甘蔗蔗糖转化和转运相关酶在蔗糖积累中的作用 | 第21-25页 |
| 1.3.1 蔗糖磷酸合成酶 | 第21页 |
| 1.3.2 蔗糖合成酶 | 第21-22页 |
| 1.3.3 蔗糖转化酶 | 第22-23页 |
| 1.3.4 转化酶抑制子 | 第23-24页 |
| 1.3.5 蔗糖转运蛋白 | 第24-25页 |
| 1.4 研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 1.5 本研究的技术路线 | 第26-27页 |
| 2 蔗糖转化酶家族成员的克隆、表达和启动子序列分析 | 第27-70页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-36页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第27-28页 |
| 2.1.2 试剂和仪器 | 第28页 |
| 2.1.3 RNA提取和cDNA合成 | 第28页 |
| 2.1.4 SoSAI1全长cDNA序列的克隆 | 第28-31页 |
| 2.1.5 SoCIN1全长cDNA序列的克隆 | 第31-32页 |
| 2.1.6 SoNIN1全长cDNA序列的克隆 | 第32页 |
| 2.1.7 启动子序列的克隆 | 第32-34页 |
| 2.1.8 转化酶DNA序列的克隆 | 第34-35页 |
| 2.1.9 生物信息学分析 | 第35页 |
| 2.1.10 荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 2.2 结果 | 第36-65页 |
| 2.2.1 DNA和RNA电泳检测 | 第36页 |
| 2.2.2 SoSAI1基因的克隆、生物信息学和表达分析 | 第36-45页 |
| 2.2.3 SoCIN1基因的克隆、生物信息学和表达分析 | 第45-54页 |
| 2.2.4 SoNIN1基因克隆、生物信息学和表达分析 | 第54-65页 |
| 2.3 讨论 | 第65-69页 |
| 2.3.1 甘蔗高GC含量基因的克隆 | 第65页 |
| 2.3.2 可溶性酸性转化酶特性 | 第65-66页 |
| 2.3.3 细胞壁结合转化酶特性 | 第66-67页 |
| 2.3.4 中性/碱性转化酶特性 | 第67-68页 |
| 2.3.5 基因启动子序列的作用 | 第68-69页 |
| 2.4 小结 | 第69-70页 |
| 3 转化酶抑制子基因的克隆和功能分析 | 第70-96页 |
| 3.1 材料与方法 | 第70-75页 |
| 3.1.1 材料 | 第70页 |
| 3.1.2 试剂和仪器 | 第70-71页 |
| 3.1.3 RNA提取和cDNA合成 | 第71页 |
| 3.1.4 转化酶抑制子SoInvInh1全长序列的克隆 | 第71页 |
| 3.1.5 转化酶抑制子SoInvInh2全长序列的克隆 | 第71-72页 |
| 3.1.6 生物信息学分析 | 第72-73页 |
| 3.1.7 荧光定量PCR | 第73页 |
| 3.1.8 SoInvInh2植物表达载体的构建、转化和鉴定 | 第73-74页 |
| 3.1.9 转SoInvInh2拟南芥半定量PCR扩增体系的优化 | 第74页 |
| 3.1.10 转SoInvInh2拟南芥生长特性和蔗糖代谢相关酶活性的分析 | 第74-75页 |
| 3.2 结果与分析 | 第75-93页 |
| 3.2.1 SoInvInh1基因的克隆和生物信息学分析 | 第75-78页 |
| 3.2.2 SoInvInh2基因的克隆和生物信息学分析 | 第78-82页 |
| 3.2.3 InvInhs系统进化分析 | 第82-84页 |
| 3.2.4 甘蔗工艺成熟期SoInvInh基因表达分析 | 第84页 |
| 3.2.5 甘蔗生理成熟前期SoInvInh基因表达分析 | 第84-85页 |
| 3.2.6 甘蔗生理成熟后期SoInvInh表达分析 | 第85-86页 |
| 3.2.7 SoInvInh2双子叶植物表达载体的构建 | 第86-87页 |
| 3.2.8 半定量PCR分析SoInvInh2在转基因植株中的表达 | 第87-89页 |
| 3.2.9 转SoInvInh2拟南芥检测 | 第89页 |
| 3.2.10 转SoInvInh2拟南芥苗期的形态特征、基因表达和转化酶活性分析 | 第89-91页 |
| 3.2.11 转SoInvInh2拟南芥花期的形态特征和基因表达 | 第91页 |
| 3.2.12 转SoInvInh2拟南芥糖分含量与蔗糖代谢相关酶酶活性的分析 | 第91-93页 |
| 3.3 讨论 | 第93-95页 |
| 3.4 小结 | 第95-96页 |
| 4 甘蔗蔗糖转运蛋白基因的克隆、表达特性及其与蔗茎蔗糖积累的相关性 | 第96-115页 |
| 4.1 材料与方法 | 第96-102页 |
| 4.1.1 材料 | 第96页 |
| 4.1.2 试剂和仪器 | 第96-97页 |
| 4.1.3 RNA提取和cDNA合成 | 第97页 |
| 4.1.4 甘蔗SoSUT1基因的克隆 | 第97页 |
| 4.1.5 甘蔗SoSUT2基因的克隆 | 第97-99页 |
| 4.1.6 甘蔗SoSUT3基因的克隆 | 第99页 |
| 4.1.7 甘蔗SoSUT5基因的克隆 | 第99页 |
| 4.1.8 生物信息学分析 | 第99-100页 |
| 4.1.9 荧光定量PCR | 第100页 |
| 4.1.10 甘蔗节间糖分的测定 | 第100页 |
| 4.1.11 SoSUT5酵母表达载体的构建 | 第100-101页 |
| 4.1.12 酵母感受态细胞的制备、转化和筛选 | 第101-102页 |
| 4.2 结果与分析 | 第102-112页 |
| 4.2.1 SoSUT1基因的克隆和序列分析 | 第102页 |
| 4.2.2 SoSUT2基因的克隆和序列分析 | 第102-103页 |
| 4.2.3 SoSUT3基因的克隆和序列分析 | 第103-104页 |
| 4.2.4 其他甘蔗SoSUT基因的克隆和分析 | 第104页 |
| 4.2.5 甘蔗SUT蛋白的生物信息学分析 | 第104-106页 |
| 4.2.6 植物SUT蛋白进化关系分析 | 第106-107页 |
| 4.2.7 甘蔗工艺成熟期不同节间蔗糖和还原糖含量分析 | 第107-108页 |
| 4.2.8 甘蔗工艺成熟期节间SoSUTs表达模式分析 | 第108-109页 |
| 4.2.9 节间SoSUTs基因表达与糖分的相关性分析 | 第109页 |
| 4.2.10 SoSUTs基因在甘蔗不同组织中的表达分析 | 第109-110页 |
| 4.2.11 酵母表达载体的检测 | 第110-111页 |
| 4.2.12 转SoSUT5酵母的生长特性分析 | 第111-112页 |
| 4.3 讨论 | 第112-114页 |
| 4.4 小结 | 第114-115页 |
| 5 甘蔗蔗糖代谢相关酶活性与糖分积累的相关性 | 第115-139页 |
| 5.1 材料与方法 | 第115-117页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第115-116页 |
| 5.1.2 试剂和仪器 | 第116页 |
| 5.1.3 甘蔗糖分的测定 | 第116页 |
| 5.1.4 甘蔗蔗糖代谢相关酶酶活性的测定 | 第116-117页 |
| 5.1.5 RNA提取及cDNA合成 | 第117页 |
| 5.1.6 SoInvInh实时荧光定量PCR | 第117页 |
| 5.1.7 数据分析 | 第117页 |
| 5.2 结果与分析 | 第117-135页 |
| 5.2.1 工艺成熟期ROC22和GT28蔗糖代谢相关酶活性与糖分积累的相关性分析 | 第117-125页 |
| 5.2.2 苗期高糖(GT35)和低糖(B8)品种蔗糖代谢相关酶活性与糖分含量的相关性分析 | 第125-128页 |
| 5.2.3 伸长期甘蔗高糖(GT35)和低糖(B8)品种蔗糖代谢相关酶活性与糖分含量的相关性分析 | 第128-132页 |
| 5.2.4 成熟期甘蔗高糖(GT35)和低糖(B8)品种蔗糖代谢相关酶活性与糖分含量的相关性分析 | 第132-135页 |
| 5.3 讨论 | 第135-138页 |
| 5.4 小结 | 第138-139页 |
| 6 结论 | 第139-143页 |
| 6.1 全文总结 | 第139-141页 |
| 6.2 论文创新点 | 第141-142页 |
| 6.3 问题与展望 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-162页 |
| 附录 | 第162-164页 |
