| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1 微生态制剂概述 | 第11-19页 |
| 1.1 饲料添加剂简介 | 第11页 |
| 1.2 微生态制剂简介 | 第11-12页 |
| 1.3 微生态制剂分类 | 第12-14页 |
| 1.3.1 按微生态制剂的物质组成划分 | 第12页 |
| 1.3.2 按微生态制剂中益生菌种类划分 | 第12-14页 |
| 1.4 允许使用的微生态制剂菌种 | 第14-15页 |
| 1.5 微生态制剂的作用机理 | 第15-17页 |
| 1.5.1 微生态平衡理论(优势种群说) | 第15页 |
| 1.5.2 生物屏障学说 | 第15-16页 |
| 1.5.3 生物夺氧学说 | 第16页 |
| 1.5.4 增强机体免疫力 | 第16页 |
| 1.5.5 产生有益代谢产物及抗菌物质,促进营养吸收 | 第16页 |
| 1.5.6 改善体内外生态环境,减少有害物质产生 | 第16-17页 |
| 1.6 微生态制剂的生产方法 | 第17页 |
| 1.6.1 液体发酵 | 第17页 |
| 1.6.2 固体发酵 | 第17页 |
| 1.7 目前存在的问题 | 第17-18页 |
| 1.7.1 菌种问题 | 第18页 |
| 1.7.2 菌种在体内存活问题 | 第18页 |
| 1.7.3 发酵方法及成本问题 | 第18页 |
| 1.8 微生态制剂的发展方向 | 第18-19页 |
| 1.8.1 分子生态学方法的应用 | 第18-19页 |
| 1.8.2 基因工程的应用 | 第19页 |
| 1.8.3 高效稳定制剂的研制 | 第19页 |
| 1.8.4 专—制剂的研发 | 第19页 |
| 2 固体发酵 | 第19-22页 |
| 2.1 固体发酵的一般流程 | 第19页 |
| 2.2 固体发酵的原料 | 第19-21页 |
| 2.2.1 糠麸类原料 | 第19-20页 |
| 2.2.2 饼粕类原料 | 第20页 |
| 2.2.3 工业废渣类原料 | 第20-21页 |
| 2.3 影响固体发酵的因素 | 第21-22页 |
| 2.3.1 物料的营养成分及颗粒度 | 第21页 |
| 2.3.2 物料的含水量 | 第21页 |
| 2.3.3 温度 | 第21-22页 |
| 2.3.4 发酵时间 | 第22页 |
| 3 研究目的、意义与主要内容 | 第22-23页 |
| 3.1 研究的目的和意义 | 第22页 |
| 3.2 研究的主要内容 | 第22-23页 |
| 第二章 市售三种微生态制剂中芽孢、乳酸菌、酵母菌活菌计数 | 第23-35页 |
| 1 材料与方法 | 第23-25页 |
| 1.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 1.1.1 微生态制剂 | 第23页 |
| 1.1.2 培养基 | 第23页 |
| 1.1.3 药品和试剂 | 第23-24页 |
| 1.1.4 主要仪器设备 | 第24页 |
| 1.2 实验方法 | 第24-25页 |
| 1.2.1 微生态制剂储藏 | 第24页 |
| 1.2.2 芽孢计数 | 第24页 |
| 1.2.3 乳酸菌活菌计数 | 第24页 |
| 1.2.4 酵母菌活菌计数 | 第24-25页 |
| 2 结果与分析 | 第25-33页 |
| 2.1 不同储藏温度下三种微生态制剂中芽孢杆菌属芽孢的计数 | 第25-27页 |
| 2.1.1 微生态制剂HS中芽孢计数 | 第25页 |
| 2.1.2 微生态制剂JY中芽孢计数 | 第25-26页 |
| 2.1.3 微生态制剂ZY中芽孢计数 | 第26页 |
| 2.1.4 芽孢在不同温度下储藏效果的比较 | 第26-27页 |
| 2.2 不同储藏温度下三种微生态制剂中乳酸菌活菌的计数 | 第27-29页 |
| 2.2.1 微生态制剂HS中乳酸菌计数 | 第27页 |
| 2.2.2 微生态制剂JY中乳酸菌计数 | 第27-28页 |
| 2.2.3 活菌制剂ZY中乳酸菌计数 | 第28页 |
| 2.2.4 乳酸菌在不同温度下储藏效果的比较 | 第28-29页 |
| 2.3 不同储藏温度下三种微生态制剂中酵母菌活菌的计数 | 第29-31页 |
| 2.3.1 微生态制剂HS中酵母菌计数 | 第29页 |
| 2.3.2 微生态制剂JY中酵母菌计数 | 第29-30页 |
| 2.3.3 微生态制剂ZY中酵母菌计数 | 第30-31页 |
| 2.3.4 酵母菌在不同温度下储藏效果的比较 | 第31页 |
| 2.4 三种微生态制剂于25℃储藏条件中芽孢、乳酸菌和酵母菌的计数 | 第31-33页 |
| 2.4.1 三种微生态制剂25℃储藏下芽孢数变化比较 | 第31页 |
| 2.4.2 三种微生态制剂25℃储藏下乳酸菌数变化比较 | 第31-32页 |
| 2.4.3 三种微生态制剂25℃储藏下酵母菌数变化比较 | 第32-33页 |
| 2.4.4 25℃下三种微生态制剂中菌种保存情况的比较 | 第33页 |
| 3 小结与讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 复合微生态制剂菌种鉴定和筛选 | 第35-58页 |
| 1 材料与方法 | 第35-40页 |
| 1.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 1.1.1 实验菌株 | 第35页 |
| 1.1.2 培养基 | 第35-36页 |
| 1.1.3 药品和试剂 | 第36-37页 |
| 1.1.4 仪器和设备 | 第37页 |
| 1.2 实验方法 | 第37-40页 |
| 1.2.1 芽孢杆菌属初筛 | 第37页 |
| 1.2.2 乳酸菌初筛 | 第37页 |
| 1.2.3 酵母菌初筛 | 第37页 |
| 1.2.4 芽孢杆菌鉴定 | 第37页 |
| 1.2.5 乳酸菌鉴定 | 第37-38页 |
| 1.2.6 酵母菌鉴定 | 第38页 |
| 1.2.7 菌株分子生物学鉴定 | 第38-39页 |
| 1.2.8 菌株间拮抗实验 | 第39页 |
| 1.2.9 菌株胆汁盐耐受实验 | 第39页 |
| 1.2.10 菌株耐酸实验 | 第39页 |
| 1.2.11 菌株耐胰蛋白酶实验 | 第39-40页 |
| 1.2.12 菌株温度敏感实验 | 第40页 |
| 1.2.13 菌株生长曲线测定 | 第40页 |
| 2 结果与分析 | 第40-56页 |
| 2.1 未知菌株的筛选鉴定 | 第40-50页 |
| 2.1.1 芽孢杆菌的初筛 | 第40-41页 |
| 2.1.2 乳酸菌的初筛 | 第41-42页 |
| 2.1.3 芽孢杆菌和乳酸菌16SrDNA鉴定 | 第42-48页 |
| 2.1.4 酵母菌26SrDNA鉴定 | 第48-50页 |
| 2.2 菌株间拮抗作用 | 第50页 |
| 2.3 耐胆盐性 | 第50-51页 |
| 2.4 耐酸性 | 第51-52页 |
| 2.5 耐胰蛋白酶 | 第52-53页 |
| 2.6 温度敏感性 | 第53页 |
| 2.7 生长曲线测定 | 第53-56页 |
| 2.7.1 菌株R5的生长曲线 | 第53-54页 |
| 2.7.2 菌株M9的生长曲线 | 第54-55页 |
| 2.7.3 菌株Y5的生长曲线 | 第55-56页 |
| 3 小结与讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 复合微生态制剂固体发酵工艺优化 | 第58-81页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| 1.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 1.1.1 实验菌株 | 第58页 |
| 1.1.2 培养基 | 第58页 |
| 1.1.3 药品和试剂 | 第58-59页 |
| 1.1.4 仪器和设备 | 第59页 |
| 1.2 实验方法 | 第59-62页 |
| 1.2.1 二级种子液制备 | 第59页 |
| 1.2.2 混合固体发酵培养基主要组分配比初探 | 第59-60页 |
| 1.2.3 添加其他组分对三种菌菌体浓度的影响 | 第60页 |
| 1.2.4 Plackett-Burman(PB)实验 | 第60-61页 |
| 1.2.5 最陡爬坡实验 | 第61-62页 |
| 1.2.6 Box-Behnken实验 | 第62页 |
| 1.2.7 混合发酵条件的初步优化 | 第62页 |
| 1.2.8 混合发酵工艺优化后验证 | 第62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-79页 |
| 2.1 混合固体发酵培养基主要组分配比初探 | 第63页 |
| 2.2 发酵培养基组分筛选 | 第63-65页 |
| 2.2.1 添加糖蜜和碳酸钙 | 第63页 |
| 2.2.2 添加简单碳源 | 第63-64页 |
| 2.2.3 添加简单氮源 | 第64页 |
| 2.2.4 添加无机盐 | 第64-65页 |
| 2.3 PB实验设计 | 第65-67页 |
| 2.3.1 以R5菌体浓度作为响应值的回归分析 | 第65-66页 |
| 2.3.2 以M9菌体浓度作为响应值的回归分析 | 第66页 |
| 2.3.3 以Y5菌体浓度作为响应值的回归分析 | 第66-67页 |
| 2.3.4 基于三个响应值进行关键因素分析 | 第67页 |
| 2.4 最陡爬坡实验 | 第67-68页 |
| 2.5 Box-Behnken实验设计 | 第68-76页 |
| 2.5.1 以R5菌体浓度作为响应值的二次回归分析 | 第69页 |
| 2.5.2 以M9菌体浓度作为响应值的二次回归分析 | 第69-70页 |
| 2.5.3 以Y5菌体浓度作为响应值的二次回归分析 | 第70-71页 |
| 2.5.4 以R5菌体浓度作为响应值的响应面分析 | 第71-73页 |
| 2.5.5 以M9菌体浓度作为响应值的响应面分析 | 第73-75页 |
| 2.5.6 最佳组分浓度的确定 | 第75-76页 |
| 2.5.7 模型验证 | 第76页 |
| 2.6 料水比的确定 | 第76-77页 |
| 2.7 发酵温度的确定 | 第77页 |
| 2.8 接种时间差的确定 | 第77-78页 |
| 2.9 接种比例的确定 | 第78页 |
| 2.10 混合发酵工艺优化后验证 | 第78-79页 |
| 3 小结与讨论 | 第79-81页 |
| 第五章 菌株及复合微生态制剂安全性实验 | 第81-86页 |
| 1 材料与方法 | 第81-82页 |
| 1.1 实验材料 | 第81-82页 |
| 1.1.1 实验菌株 | 第81页 |
| 1.1.2 培养基 | 第81页 |
| 1.1.3 实验动物 | 第81页 |
| 1.1.4 实验仪器 | 第81-82页 |
| 1.2 实验方法 | 第82页 |
| 1.2.1 单菌株安全性实验 | 第82页 |
| 1.2.2 混合固体发酵剂安全性实验 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-85页 |
| 2.1 单菌株安全性实验 | 第82页 |
| 2.2 混合固体发酵剂安全性实验 | 第82-85页 |
| 2.2.1 体重变化 | 第83页 |
| 2.2.2 肝脏和肾脏组织切片 | 第83-84页 |
| 2.2.3 血常规检测 | 第84-85页 |
| 3 小结与讨论 | 第85-86页 |
| 第六章 总结与展望 | 第86-89页 |
| 1 总结 | 第86-88页 |
| 1.1 复合微生态制剂生产加工工艺和储藏温度的探索 | 第86页 |
| 1.2 复合微生态制剂优良菌株的选育 | 第86-87页 |
| 1.3 复合微生态制剂发酵工艺的优化 | 第87-88页 |
| 1.4 复合微生态制剂发酵安全性实验 | 第88页 |
| 2 展望 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-94页 |
| 致谢 | 第94页 |
