摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-16页 |
第一章 绪论 | 第16-29页 |
·浓核病毒的研究 | 第16-22页 |
·浓核病毒的分类 | 第16-17页 |
·浓核病毒的理化特征 | 第17页 |
·浓核病毒的基因组特征 | 第17-19页 |
·浓核病毒结构蛋白的研究 | 第19-20页 |
·家蚕浓核病毒Ⅰ型特征 | 第20-22页 |
·家蚕细小病毒样病毒的研究 | 第22-24页 |
·细小病毒样病毒的基因组特征 | 第22-23页 |
·细小病毒样病毒结构蛋白的研究 | 第23-24页 |
·质谱分析技术 | 第24-25页 |
·MALDI-TOF/MS质谱简介 | 第24页 |
·生物质谱在生命科学中的应用 | 第24-25页 |
·pMAL原核表达系统简介 | 第25-27页 |
·立题的目的和意义 | 第27页 |
·主要的研究内容和技术路线 | 第27-29页 |
·研究内容 | 第27-28页 |
·研究路线 | 第28-29页 |
第二章 家蚕细小病毒样病毒中国株结构蛋白vp多克隆抗体的制备 | 第29-44页 |
·材料 | 第29-32页 |
·主要的实验仪器设备 | 第29页 |
·主要试剂药品 | 第29-32页 |
·载体菌株及主要软件 | 第32页 |
·实验方法 | 第32-40页 |
·vp基因克隆及pMD-T载体连接 | 第32-36页 |
·vp基因原核表达载体的构建 | 第36页 |
·vp基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第36-37页 |
·vp基因原核表达产物的鉴定 | 第37-39页 |
·目的蛋白MBP-VP的大量纯化及多克隆抗体的制备 | 第39-40页 |
·结果与分析 | 第40-42页 |
·重组表达载体的酶切鉴定 | 第40-41页 |
·vp基因在大肠杆菌中的表达 | 第41-42页 |
·表达蛋白的质谱分析 | 第42页 |
·本章总结与讨论 | 第42-44页 |
第三章 家蚕细小病毒样病毒中国株(BmPLV-Z)结构蛋白的鉴定 | 第44-60页 |
·材料 | 第44-45页 |
·主要实验仪器设备 | 第44页 |
·主要实验试剂和药品 | 第44-45页 |
·家蚕细小病毒样病毒中国株BmPLV-Z的分离纯化 | 第45-46页 |
·BmPLV-Z病毒接种液制备 | 第45-46页 |
·添毒、取材 | 第46页 |
·病毒粗提液的提取 | 第46页 |
·硫酸按沉淀盐析 | 第46页 |
·CsCl梯度离心 | 第46页 |
·病毒粒子的电镜观察 | 第46页 |
·病毒粒子蛋白的SDS-PAGE电泳 | 第46-47页 |
·样品制备 | 第46-47页 |
·电泳分析 | 第47页 |
·病毒粒子的Western blot分析 | 第47-48页 |
·病毒蛋白的质谱鉴定 | 第48页 |
·胶内消化(见第二章2.2.4.2) | 第48页 |
·质谱分析(见第二章2.2.4.2) | 第48页 |
·数据分析 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-58页 |
·电镜观察结果 | 第48-49页 |
·SDS-PAGE电泳结果及Western blot分析结果 | 第49-50页 |
·质谱分析结果 | 第50-58页 |
·讨论与总结 | 第58-60页 |
第四章 家蚕细小病毒样病毒中国株结构蛋白VP的真核表达 | 第60-67页 |
·实验材料 | 第60-61页 |
·质粒和菌株 | 第60页 |
·主要的试剂和药品 | 第60-61页 |
·试验方法 | 第61-64页 |
·vp基因的克隆 | 第61页 |
·重组载体Bacmid-vp的构建 | 第61-64页 |
·穿梭载体pFastBacHTb-vp的构建 | 第61-64页 |
·杆状病毒的对真核细胞的转染 | 第64页 |
·重组蛋白的表达鉴定 | 第64页 |
·结果与分析 | 第64-66页 |
·vp基因的克隆 | 第64-65页 |
·pFastBacHTb-vp与Bacmid的转座重组 | 第65-66页 |
·表达产物的Western bolt分析 | 第66页 |
·讨论与总结 | 第66-67页 |
第五章 主要工作总结和工作展望 | 第67-69页 |
·主要工作总结 | 第67页 |
·工作展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
硕士期间发表文章 | 第75页 |