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家蚕细小病毒样病毒(中国镇江株)结构蛋白的鉴定与解析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-16页
第一章 绪论第16-29页
   ·浓核病毒的研究第16-22页
     ·浓核病毒的分类第16-17页
     ·浓核病毒的理化特征第17页
     ·浓核病毒的基因组特征第17-19页
     ·浓核病毒结构蛋白的研究第19-20页
     ·家蚕浓核病毒Ⅰ型特征第20-22页
   ·家蚕细小病毒样病毒的研究第22-24页
     ·细小病毒样病毒的基因组特征第22-23页
     ·细小病毒样病毒结构蛋白的研究第23-24页
   ·质谱分析技术第24-25页
     ·MALDI-TOF/MS质谱简介第24页
     ·生物质谱在生命科学中的应用第24-25页
   ·pMAL原核表达系统简介第25-27页
   ·立题的目的和意义第27页
   ·主要的研究内容和技术路线第27-29页
     ·研究内容第27-28页
     ·研究路线第28-29页
第二章 家蚕细小病毒样病毒中国株结构蛋白vp多克隆抗体的制备第29-44页
   ·材料第29-32页
     ·主要的实验仪器设备第29页
     ·主要试剂药品第29-32页
     ·载体菌株及主要软件第32页
   ·实验方法第32-40页
     ·vp基因克隆及pMD-T载体连接第32-36页
     ·vp基因原核表达载体的构建第36页
     ·vp基因在大肠杆菌中的诱导表达第36-37页
     ·vp基因原核表达产物的鉴定第37-39页
     ·目的蛋白MBP-VP的大量纯化及多克隆抗体的制备第39-40页
   ·结果与分析第40-42页
     ·重组表达载体的酶切鉴定第40-41页
     ·vp基因在大肠杆菌中的表达第41-42页
     ·表达蛋白的质谱分析第42页
   ·本章总结与讨论第42-44页
第三章 家蚕细小病毒样病毒中国株(BmPLV-Z)结构蛋白的鉴定第44-60页
   ·材料第44-45页
     ·主要实验仪器设备第44页
     ·主要实验试剂和药品第44-45页
   ·家蚕细小病毒样病毒中国株BmPLV-Z的分离纯化第45-46页
     ·BmPLV-Z病毒接种液制备第45-46页
     ·添毒、取材第46页
     ·病毒粗提液的提取第46页
     ·硫酸按沉淀盐析第46页
     ·CsCl梯度离心第46页
   ·病毒粒子的电镜观察第46页
   ·病毒粒子蛋白的SDS-PAGE电泳第46-47页
     ·样品制备第46-47页
     ·电泳分析第47页
   ·病毒粒子的Western blot分析第47-48页
   ·病毒蛋白的质谱鉴定第48页
     ·胶内消化(见第二章2.2.4.2)第48页
     ·质谱分析(见第二章2.2.4.2)第48页
     ·数据分析第48页
   ·结果与分析第48-58页
     ·电镜观察结果第48-49页
     ·SDS-PAGE电泳结果及Western blot分析结果第49-50页
     ·质谱分析结果第50-58页
   ·讨论与总结第58-60页
第四章 家蚕细小病毒样病毒中国株结构蛋白VP的真核表达第60-67页
   ·实验材料第60-61页
     ·质粒和菌株第60页
     ·主要的试剂和药品第60-61页
   ·试验方法第61-64页
     ·vp基因的克隆第61页
     ·重组载体Bacmid-vp的构建第61-64页
       ·穿梭载体pFastBacHTb-vp的构建第61-64页
     ·杆状病毒的对真核细胞的转染第64页
     ·重组蛋白的表达鉴定第64页
   ·结果与分析第64-66页
     ·vp基因的克隆第64-65页
     ·pFastBacHTb-vp与Bacmid的转座重组第65-66页
     ·表达产物的Western bolt分析第66页
   ·讨论与总结第66-67页
第五章 主要工作总结和工作展望第67-69页
   ·主要工作总结第67页
   ·工作展望第67-69页
参考文献第69-74页
致谢第74-75页
硕士期间发表文章第75页

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