| 摘要 | 第5-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 英文缩写索引 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-26页 |
| 1.1 巨噬细胞 | 第15-19页 |
| 1.1.1 巨噬细胞概述 | 第15页 |
| 1.1.2 巨噬细胞功能 | 第15-16页 |
| 1.1.3 巨噬细胞极化 | 第16-19页 |
| 1.2 HMGB1 | 第19-21页 |
| 1.2.1 HMGB1概述 | 第19页 |
| 1.2.2 胞内HMGB1的功能 | 第19-20页 |
| 1.2.3 胞外HMGB1的功能 | 第20-21页 |
| 1.3 自身免疫性心肌炎概述 | 第21-23页 |
| 1.4 本研究的目的、方法、实验设计和意义 | 第23-26页 |
| 1.4.1 研究目的 | 第23页 |
| 1.4.2 研究方法 | 第23-24页 |
| 1.4.3 实验设计 | 第24-25页 |
| 1.4.4 研究意义 | 第25-26页 |
| 第二章 HMGB1下调抑制了LPS诱导的巨噬细胞向M1型极化 | 第26-45页 |
| 2.1 试剂材料与仪器 | 第26-28页 |
| 2.1.1 实验试剂与耗材 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 主要溶液配制 | 第28-29页 |
| 2.2.1 WesternBlot相关试剂的配制 | 第28页 |
| 2.2.2 PBS缓冲液的配制 | 第28-29页 |
| 2.2.3 胰酶的配制 | 第29页 |
| 2.2.4 冻存液的配制 | 第29页 |
| 2.2.5 L-DMEM培养液的配制 | 第29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-37页 |
| 2.3.1 Ad的构建与包装 | 第29页 |
| 2.3.2 细胞培养 | 第29-30页 |
| 2.3.3 小鼠骨髓来源巨噬细胞的分离与提取 | 第30-31页 |
| 2.3.4 转染 | 第31页 |
| 2.3.5 WesternBlot检测巨噬细胞iNOS、HMGB1蛋白水平表达 | 第31-33页 |
| 2.3.6 qRT-PCR测定巨噬细胞中IL-6、IL-1β、TNF-αmRNA表达水平 | 第33-36页 |
| 2.3.7 ELISA测定细胞上清中IL-6、IL-1β、TNF-α的含量 | 第36页 |
| 2.3.8 FCM检测巨噬细胞表面CD86、MHCⅡ的表达 | 第36-37页 |
| 2.4 结果及讨论 | 第37-42页 |
| 2.4.1 转染条件确定 | 第37-38页 |
| 2.4.2 下调胞内HMGB1可逆转LPS诱导的巨噬细胞向M1型极化 | 第38-40页 |
| 2.4.3 下调胞内HMGB1对巨噬细胞抗原加工提呈能力的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.4 下调胞内HMGB1对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.5 外源性HMGB1不能逆转胞内HMGB1下调而导致的巨噬细胞极化的抑制 | 第42页 |
| 2.5 本章小结 | 第42-45页 |
| 第三章 HMGB1下调可抑制ANGII诱导的巨噬细胞向M1型极化 | 第45-51页 |
| 3.1 试剂材料与仪器 | 第45-46页 |
| 3.1.1 实验试剂与耗材 | 第45-46页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-47页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第46-47页 |
| 3.2.2 WesternBlot检测巨噬细胞iNOS、HMGB1蛋白水平表达 | 第47页 |
| 3.2.3 FCM检测巨噬细胞表面CD86、MHCⅡ的表达 | 第47页 |
| 3.2.4 ELISA检测上清中IL-6、TNF-α的含量 | 第47页 |
| 3.3 结果及讨论 | 第47-49页 |
| 3.3.1 下调HMGB1后对ANGII介导的巨噬细胞极化的影响 | 第47-48页 |
| 3.3.2 下调HMGB1后对ANGII介导的巨噬细胞抗原加工提呈能力的影响 | 第48-49页 |
| 3.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第四章 胞内HMGB1调控巨噬细胞极化的分子机制 | 第51-58页 |
| 4.1 试剂材料与仪器 | 第51-52页 |
| 4.1.1 实验试剂与耗材 | 第51-52页 |
| 4.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.2.1 细胞培养 | 第52-53页 |
| 4.2.2 WesternBlot检测p-P50、p-ERK1/2和p-P38的表达 | 第53页 |
| 4.2.3 ELISA检测上清中IL-6、IL-1β和TNF-α的含量 | 第53页 |
| 4.3 结果及讨论 | 第53-56页 |
| 4.3.1 AngII诱导巨噬细胞极化依赖于NF-κB、ERK1/2、P38信号分子的激活 | 第53-54页 |
| 4.3.2 抑制NF-κB、ERK1/2、P38活化可有效干预AngII诱导的巨噬细胞极化 | 第54-55页 |
| 4.3.3 胞内HMGB1通过调控NF-κB、ERK1/2、P38影响巨噬细胞向M1极化 | 第55-56页 |
| 4.4 本章小结 | 第56-58页 |
| 第五章 重组腺相关病毒AAV-HMGB1对小鼠EAM的预防作用 | 第58-66页 |
| 5.1 试剂材料与仪器 | 第58-59页 |
| 5.1.1 实验试剂与耗材 | 第58页 |
| 5.1.2 实验仪器 | 第58-59页 |
| 5.2 实验方法 | 第59-61页 |
| 5.2.1 AAV的构建与包装 | 第59页 |
| 5.2.2 模型的建立 | 第59页 |
| 5.2.3 小鼠骨髓来源巨噬细胞分离与提取 | 第59-60页 |
| 5.2.4 检测小鼠血清中炎症因子的含量 | 第60页 |
| 5.2.5 免疫荧光检测小鼠心肌组织CD86+F4/80+细胞浸润 | 第60-61页 |
| 5.3 结果及讨论 | 第61-64页 |
| 5.3.1 重组AAV感染EAM模型小鼠 | 第61-62页 |
| 5.3.2 AAV-HMGB1缓解EAM小鼠炎症损伤 | 第62-64页 |
| 5.3.3 AAV-HMGB1抑制EAM小鼠心肌中M1型巨噬细胞的浸润 | 第64页 |
| 5.4 本章小结 | 第64-66页 |
| 第六章 主要结论与展望 | 第66-68页 |
| 6.1 主要结论 | 第66页 |
| 6.2 展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 攻读硕士学位期间发表的文章 | 第76页 |
