| 中文摘要 | 第4-8页 |
| Abstract | 第8-12页 |
| 缩略语/符号说明 | 第17-18页 |
| 前言 | 第18-22页 |
| 研究现状、成果 | 第18-19页 |
| 研究目的、方法 | 第19-22页 |
| 一、盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞增殖 | 第22-58页 |
| 1.1 对象和方法 | 第23-31页 |
| 1.1.1 实验细胞株 | 第23-24页 |
| 1.1.2 材料与试剂 | 第24页 |
| 1.1.3 仪器与设备 | 第24-25页 |
| 1.1.4 实验方法 | 第25-31页 |
| 1.1.4.1 实验药物指标及实验分组 | 第25-26页 |
| 1.1.4.2 细胞处理 | 第26页 |
| 1.1.4.3 长时间动态成像及分析系统观察细胞增殖 | 第26页 |
| 1.1.4.4 利用IncuCyteZoom比较细胞迁移能力 | 第26-27页 |
| 1.1.4.5 利用IncuCyteZoom比较细胞侵袭能力 | 第27页 |
| 1.1.4.6 免疫荧光观察肝癌细胞表面β受体表达情况 | 第27-28页 |
| 1.1.4.7 Westernblot检测肝癌细胞β受体表达情况 | 第28-29页 |
| 1.1.4.8 qRT-PCR检测肝癌细胞β-ARmRNA受体变化情况 | 第29-31页 |
| 1.1.4.9 数据处理与分析 | 第31页 |
| 1.2 结果 | 第31-54页 |
| 1.2.1 肝癌细胞系中β受体升高表达,且以ADRB2升高为主 | 第31-33页 |
| 1.2.2 盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞增殖 | 第33-38页 |
| 1.2.3 盐酸普萘洛尔对抑制肝癌细胞增殖是通过阻断β受体实现 | 第38-44页 |
| 1.2.4 盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞的侵袭和迁移 | 第44-54页 |
| 1.2.4.1 盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞迁移 | 第44-49页 |
| 1.2.4.2 盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞侵袭 | 第49-54页 |
| 1.3 讨论 | 第54-57页 |
| 1.3.1 肝癌细胞表面β2受体升高 | 第54-55页 |
| 1.3.2 盐酸普萘洛尔抑制肝癌细胞增殖、抑制肝癌细胞的侵袭和转移…… | 第55-56页 |
| 1.3.3 盐酸普盐酸普萘洛尔通过抑制β受体发挥抗肿瘤作用 | 第56-57页 |
| 1.4 小结 | 第57-58页 |
| 二、盐酸普萘洛尔促进肝癌细胞凋亡 | 第58-81页 |
| 2.1 对象和方法 | 第58-63页 |
| 2.1.1 实验细胞株 | 第58-59页 |
| 2.1.2 材料与试剂 | 第59页 |
| 2.1.3 仪器与设备 | 第59-60页 |
| 2.1.4 实验方法 | 第60-63页 |
| 2.1.4.1 DAPI染色 | 第60页 |
| 2.1.4.2 Hoechst33342/PI免疫荧光双染 | 第60-61页 |
| 2.1.4.3 线粒体膜电势检测 | 第61页 |
| 2.1.4.4 AnnexinV/PI双染流式细胞学检测 | 第61页 |
| 2.1.4.5 FCM检测细胞周期的变化 | 第61-62页 |
| 2.1.4.6 Westernblot法检测蛋白表达 | 第62-63页 |
| 2.1.4.7 数据处理与分析 | 第63页 |
| 2.2 结果 | 第63-77页 |
| 2.2.1 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞出现细胞凋亡 | 第63-68页 |
| 2.2.1.1 DAPI和Hoechst33342/PI染色结果 | 第63-66页 |
| 2.2.1.2 AnnexinV/PI流式细胞术定量检测细胞凋亡率 | 第66-68页 |
| 2.2.2 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞周期S期阻滞 | 第68-70页 |
| 2.2.3 盐酸普萘洛尔诱导细胞凋亡的机制 | 第70-77页 |
| 2.2.3.1 线粒体膜电势 | 第70-73页 |
| 2.2.3.2 Caspase-8、Caspase-3、Bcl-2和PARP蛋白表达 | 第73-75页 |
| 2.2.3.3 β2受体信号通路对盐酸普萘洛尔诱导的细胞凋亡的影响 | 第75-77页 |
| 2.3 讨论 | 第77-79页 |
| 2.3.1 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞凋亡 | 第77-78页 |
| 2.3.2 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞周期出现S期的阻滞 | 第78页 |
| 2.3.3 盐酸普萘洛尔通过线粒体途径诱导肝癌细胞凋亡 | 第78-79页 |
| 2.4 小结 | 第79-81页 |
| 三、盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞自噬 | 第81-109页 |
| 3.1 对象和方法 | 第82-85页 |
| 3.1.1 实验细胞株 | 第82页 |
| 3.1.2 材料与试剂 | 第82-83页 |
| 3.1.3 仪器与设备 | 第83页 |
| 3.1.4 实验方法 | 第83-85页 |
| 3.1.4.1 LC3免疫荧光染色 | 第83-84页 |
| 3.1.4.2 线粒体膜电势检测 | 第84页 |
| 3.1.4.3 Westernblot法检测蛋白表达 | 第84-85页 |
| 3.1.4.4 数据处理与分析 | 第85页 |
| 3.2 结果 | 第85-103页 |
| 3.2.1 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞自噬 | 第85-89页 |
| 3.2.1.1 盐酸普萘洛尔使自噬特征性蛋白LC3的表达增加 | 第85-87页 |
| 3.2.1.2 盐酸普萘洛尔引起自噬流的增加 | 第87-89页 |
| 3.2.2 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞自噬的分子机制 | 第89-92页 |
| 3.2.2.1 β2肾上腺素能信号通路对细胞自噬的影响 | 第89-90页 |
| 3.2.2.2 盐酸普萘洛尔引起的自噬相关蛋白变化 | 第90-92页 |
| 3.2.3 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞凋亡和自噬之间的关系 | 第92-103页 |
| 3.2.3.1 自噬抑制剂3MA和激活剂RAP对线粒体膜电势的影响 | 第92-95页 |
| 3.2.3.2 凋亡抑制剂Z-VAD促进盐酸普萘洛尔导致的细胞自噬 | 第95-100页 |
| 3.2.3.3 肝癌细胞凋亡和细胞自噬之间的分子机制探讨 | 第100-103页 |
| 3.3 讨论 | 第103-108页 |
| 3.3.1 盐酸普萘洛尔诱导肝癌细胞自噬 | 第103-104页 |
| 3.3.2 盐酸普萘洛尔诱导的肝癌细胞凋亡和自噬之间的相互制约 | 第104-108页 |
| 3.4 小结 | 第108-109页 |
| 全文结论 | 第109-111页 |
| 论文创新点 | 第111-112页 |
| 参考文献 | 第112-121页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第121-123页 |
| 附录 | 第123-124页 |
| 综述 β2肾上腺能受体通路在肝癌发生发展中的作用 | 第124-147页 |
| 综述参考文献 | 第137-147页 |
| 致谢 | 第147-150页 |
| 个人简历 | 第150页 |
