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Paraspeckles促进pri-miRNA加工的机制研究

本论文的主要创新点第5-9页
摘要第9-11页
Abstract第11页
第一章 引言第12-58页
    1 Paraspeckles第12-34页
        1.1 Paraspeckles的发现第12-14页
        1.2 Paraspeckles的结构组成及其主要的功能第14-30页
        1.3 Paraspeckles的形成及组装第30-34页
    2 miRNA第34-55页
        2.1 miRNA的发现、命名及其加工过程第34-38页
        2.2 参与miRNA通路的RNA结合蛋白(RNA Binding Proteins,RBPs)及其复合物第38-44页
        2.3 miRNA的调控第44-51页
        2.4 miRNA的功能第51-55页
    3 本课题的研究内容第55-58页
第二章 材料与方法第58-84页
    1 材料第58-70页
        1.1 细胞、菌株及质粒第58页
        1.2 常用试剂及来源第58-59页
        1.3 细胞培养相关试剂及来源第59页
        1.4 细胞转染相关试剂及来源第59-60页
        1.5 工具酶第60页
        1.6 核酸抽提和纯化第60-61页
        1.7 仪器第61页
        1.8 Oligos第61-65页
        1.9 抗体第65-66页
        1.10 绘图及分析软件第66-67页
        1.11 溶液配置第67-70页
    2 方法第70-84页
        2.1 质粒提取第70-71页
        2.2 感受态制备第71页
        2.3 克隆构建第71-72页
        2.4 点突变以及缺失突变第72-73页
        2.5 细胞培养第73-74页
        2.6 细胞转染第74页
        2.7 RNA提取、T-qPCR第74-76页
        2.8 Western Blotting第76-77页
        2.9 CLIP-seq第77-81页
        2.10 small RNA-seq第81-82页
        2.11 双荧光素酶报告系统检测第82-84页
第三章 结果与讨论第84-106页
    1 miR-17-92a表达水平的差异源自Drosha加工环节第84-86页
    2 Praspeckles的核心组分影响miR-17-92a的加工第86-92页
    3 Praspeckle组分不影响miRNA加工调控蛋白的表达第92-93页
    4 Paraspeckles影响大部分miRNA的表达第93-96页
    5 PSF/NONO结合大多数miRNA第96-101页
    6 NEAT1介导NONO/PSF与Drsoha加工复合物的结合第101-103页
    7 NEAT1功能性片段研究第103-106页
攻博期间发表的科研成果第106-107页
参考文献第107-123页
致谢第123-124页

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