本论文的主要创新点 | 第5-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11页 |
第一章 引言 | 第12-58页 |
1 Paraspeckles | 第12-34页 |
1.1 Paraspeckles的发现 | 第12-14页 |
1.2 Paraspeckles的结构组成及其主要的功能 | 第14-30页 |
1.3 Paraspeckles的形成及组装 | 第30-34页 |
2 miRNA | 第34-55页 |
2.1 miRNA的发现、命名及其加工过程 | 第34-38页 |
2.2 参与miRNA通路的RNA结合蛋白(RNA Binding Proteins,RBPs)及其复合物 | 第38-44页 |
2.3 miRNA的调控 | 第44-51页 |
2.4 miRNA的功能 | 第51-55页 |
3 本课题的研究内容 | 第55-58页 |
第二章 材料与方法 | 第58-84页 |
1 材料 | 第58-70页 |
1.1 细胞、菌株及质粒 | 第58页 |
1.2 常用试剂及来源 | 第58-59页 |
1.3 细胞培养相关试剂及来源 | 第59页 |
1.4 细胞转染相关试剂及来源 | 第59-60页 |
1.5 工具酶 | 第60页 |
1.6 核酸抽提和纯化 | 第60-61页 |
1.7 仪器 | 第61页 |
1.8 Oligos | 第61-65页 |
1.9 抗体 | 第65-66页 |
1.10 绘图及分析软件 | 第66-67页 |
1.11 溶液配置 | 第67-70页 |
2 方法 | 第70-84页 |
2.1 质粒提取 | 第70-71页 |
2.2 感受态制备 | 第71页 |
2.3 克隆构建 | 第71-72页 |
2.4 点突变以及缺失突变 | 第72-73页 |
2.5 细胞培养 | 第73-74页 |
2.6 细胞转染 | 第74页 |
2.7 RNA提取、T-qPCR | 第74-76页 |
2.8 Western Blotting | 第76-77页 |
2.9 CLIP-seq | 第77-81页 |
2.10 small RNA-seq | 第81-82页 |
2.11 双荧光素酶报告系统检测 | 第82-84页 |
第三章 结果与讨论 | 第84-106页 |
1 miR-17-92a表达水平的差异源自Drosha加工环节 | 第84-86页 |
2 Praspeckles的核心组分影响miR-17-92a的加工 | 第86-92页 |
3 Praspeckle组分不影响miRNA加工调控蛋白的表达 | 第92-93页 |
4 Paraspeckles影响大部分miRNA的表达 | 第93-96页 |
5 PSF/NONO结合大多数miRNA | 第96-101页 |
6 NEAT1介导NONO/PSF与Drsoha加工复合物的结合 | 第101-103页 |
7 NEAT1功能性片段研究 | 第103-106页 |
攻博期间发表的科研成果 | 第106-107页 |
参考文献 | 第107-123页 |
致谢 | 第123-124页 |