| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-20页 |
| 1. 日本乙型脑炎的病原学特征 | 第11-13页 |
| 1.1 JEV的基本特征 | 第11-12页 |
| 1.2 JEV毒力基因的研究进展 | 第12-13页 |
| 2. 日本乙型脑炎病毒的分子生物学特征 | 第13-15页 |
| 2.1 结构蛋白 | 第13-14页 |
| 2.2 非结构蛋白 | 第14-15页 |
| 3. 日本乙型脑炎的流行病学 | 第15页 |
| 4. 乙型脑炎疫苗的研究进展 | 第15-17页 |
| 4.1 灭活苗 | 第15-16页 |
| 4.2 减毒活疫苗 | 第16页 |
| 4.3 基因工程疫苗 | 第16-17页 |
| 5. 病毒的致弱方法 | 第17-18页 |
| 6. 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
| 第二部分 试验研究 | 第20-51页 |
| 第一章 猪源乙型脑炎病毒弱毒株的培育 | 第20-36页 |
| 1. 材料 | 第20-21页 |
| 1.1 试验材料 | 第20-21页 |
| 1.2 主要仪器设备 | 第21页 |
| 2. 方法 | 第21-27页 |
| 2.1 病毒的传代培养 | 第21-22页 |
| 2.2 病毒的纯化 | 第22页 |
| 2.3 病毒滴度的测定 | 第22页 |
| 2.4 一步生长曲线的绘制 | 第22-24页 |
| 2.5 病毒毒力测定 | 第24-25页 |
| 2.6 F86代病毒与商品化减毒活疫苗(SA14-14-2株)的毒力对比试验 | 第25页 |
| 2.7 免疫原性的测定 | 第25-26页 |
| 2.8 小鼠免疫攻毒保护试验 | 第26-27页 |
| 3. 结果与分析 | 第27-33页 |
| 3.1 SCYA201201株的细胞传代培养及纯化 | 第27页 |
| 3.2 SCYA201201株病毒滴度的变化 | 第27页 |
| 3.3 病毒一步生长曲线的绘制 | 第27-29页 |
| 3.4 病毒毒力测定结果 | 第29-31页 |
| 3.5 F86代病毒与商品化减毒活疫苗毒株的毒力对比结果 | 第31页 |
| 3.6 免疫原性测定结果 | 第31-32页 |
| 3.7 小鼠免疫攻毒保护试验结果 | 第32-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-35页 |
| 4.1 JEV毒株的选择与致弱 | 第33-34页 |
| 4.2 F86代病毒的免疫原性 | 第34-35页 |
| 5. 小结 | 第35-36页 |
| 第二章 猪源乙型脑炎病毒弱毒株致弱分子突变分析 | 第36-51页 |
| 1. 材料 | 第36-37页 |
| 1.1 主要毒株、菌株与质粒 | 第36页 |
| 1.2 主要试剂 | 第36页 |
| 1.3 试剂配制 | 第36-37页 |
| 1.4 主要仪器 | 第37页 |
| 2. 方法 | 第37-44页 |
| 2.1 引物设计 | 第37-38页 |
| 2.2 RNA提取 | 第38页 |
| 2.3 RT-PCR反应 | 第38-40页 |
| 2.4 目的片段的回收 | 第40页 |
| 2.5 平末端片段加A反应 | 第40-41页 |
| 2.6 核酸产物的纯化 | 第41页 |
| 2.7 目的片段的克隆 | 第41-43页 |
| 2.8 序列结果分析 | 第43-44页 |
| 3. 结果与分析 | 第44-47页 |
| 3.1 F1到F86代病毒E基因的测序结果分析 | 第44-45页 |
| 3.2 F1、F46、F86代病毒编码区序列结果分析 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 传代病毒E基因的变异分析 | 第47-48页 |
| 4.2 传代病毒编码区基因序列分析 | 第48-50页 |
| 5. 小结 | 第50-51页 |
| 全文结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 附录 | 第60-67页 |
