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循环miRNA参与吸烟所致COPD的作用及机制研究

缩略词表第7-8页
中文摘要第8-11页
ABSTRACT第11-13页
第一章 吸烟相关的COPD患者循环miRNA表达水平研究第14-29页
    1.1 前言第14-15页
    1.2 材料与方法第15-21页
        1.2.1 临床资料及样本采集第15-16页
        1.2.2 实验仪器及试剂第16-18页
        1.2.3 miRNA microarray第18-19页
        1.2.4 QPCR检测第19-21页
    1.3 结果第21-25页
        1.3.1 受试四组人群的肺功能比较第21-22页
        1.3.2 miRNA芯片分析结果第22-24页
        1.3.3 QPCR验证差异表达miRNA第24-25页
    1.4 讨论第25-28页
    1.5 结论第28-29页
第二章 MicroRNA-149-3p在吸烟相关GOPD中的作用及机制探讨第29-52页
    2.1 前言第29-30页
    2.2 材料与方法第30-40页
        2.2.1 实验仪器及试剂第30-31页
        2.2.2 细胞及其他第31-32页
        2.2.3 细胞培养及处理第32页
        2.2.4 双荧光素酶报告基因实验载体构建(TLR3'UTR)第32-35页
        2.2.5 细胞转染第35页
        2.2.6 QPCR检测第35-36页
        2.2.7 Western Blotting检测第36-38页
        2.2.8 酶联免疫吸附试验(ELISA)第38-39页
        2.2.9 免疫荧光检测第39-40页
    2.3 结果第40-49页
        2.3.1 CSE刺激引起THP-1细胞炎性因子变化第40页
        2.3.2 CSE刺激通过下调miR-149-3p促进TLR-4表达第40-42页
        2.3.3 CSE刺激促进TLR-4/NF-κB p65激活第42-43页
        2.3.4 抑制miR-149-3p激活TLR-4/ NF-κB p65通路第43-46页
        2.3.5 过表达miR-149-3p减弱CSE刺激对TLR-4/NF-κB p65通路影响第46-49页
    2.4 讨论第49-51页
    2.5 结论第51-52页
第三章 MicroRNA-3202在吸烟相关COPD的作用及机制探讨第52-84页
    3.1 前言第52-53页
    3.2 材料与方法第53-64页
        3.2.1 细胞及动物第53页
        3.2.2 双荧光素酶报告基因实验载体构建(FAIM23'UTR)第53-56页
        3.2.3 FAIM2基因3'UTR序列点突变第56-58页
        3.2.4 FAIM2基因过表达载体构建第58-59页
        3.2.5 细胞共培养第59-60页
        3.2.6 细胞转染第60页
        3.2.7 CCK-8检测第60页
        3.2.8 Hoechst 染色第60-61页
        3.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡第61页
        3.2.10 动物模型第61页
        3.2.11 苏木精-伊红染色(H&Estaining)第61-62页
        3.2.12 免疫组织化学检测(IHC)第62-63页
        3.2.13 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测第63页
        3.2.14 QPCR检测第63页
        3.2.15 Western blotting第63-64页
    3.3 实验结果第64-81页
        3.3.1 miR-3202减弱CSE对T淋巴细胞的刺激效果第64-65页
        3.3.2 CSE预处理的T淋巴细胞促进HBECs的细胞凋亡第65-69页
        3.3.3 miR-3202靶向调控FAIM2第69-71页
        3.3.4 敲低T淋巴细胞miR-3202的效果第71-75页
        3.3.5 敲低T淋巴细胞FAM2的效果第75-78页
        3.3.6 动物模型验证miR-3202/FAIM2第78-81页
    3.4 讨论第81-83页
    3.5 结论第83-84页
全文总结第84-85页
参考文献第85-96页
综述第96-119页
    参考文献第106-119页
读学位期间获得的学术成果第119-120页
致谢第120页

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