缩略词表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
第一章 吸烟相关的COPD患者循环miRNA表达水平研究 | 第14-29页 |
1.1 前言 | 第14-15页 |
1.2 材料与方法 | 第15-21页 |
1.2.1 临床资料及样本采集 | 第15-16页 |
1.2.2 实验仪器及试剂 | 第16-18页 |
1.2.3 miRNA microarray | 第18-19页 |
1.2.4 QPCR检测 | 第19-21页 |
1.3 结果 | 第21-25页 |
1.3.1 受试四组人群的肺功能比较 | 第21-22页 |
1.3.2 miRNA芯片分析结果 | 第22-24页 |
1.3.3 QPCR验证差异表达miRNA | 第24-25页 |
1.4 讨论 | 第25-28页 |
1.5 结论 | 第28-29页 |
第二章 MicroRNA-149-3p在吸烟相关GOPD中的作用及机制探讨 | 第29-52页 |
2.1 前言 | 第29-30页 |
2.2 材料与方法 | 第30-40页 |
2.2.1 实验仪器及试剂 | 第30-31页 |
2.2.2 细胞及其他 | 第31-32页 |
2.2.3 细胞培养及处理 | 第32页 |
2.2.4 双荧光素酶报告基因实验载体构建(TLR3'UTR) | 第32-35页 |
2.2.5 细胞转染 | 第35页 |
2.2.6 QPCR检测 | 第35-36页 |
2.2.7 Western Blotting检测 | 第36-38页 |
2.2.8 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第38-39页 |
2.2.9 免疫荧光检测 | 第39-40页 |
2.3 结果 | 第40-49页 |
2.3.1 CSE刺激引起THP-1细胞炎性因子变化 | 第40页 |
2.3.2 CSE刺激通过下调miR-149-3p促进TLR-4表达 | 第40-42页 |
2.3.3 CSE刺激促进TLR-4/NF-κB p65激活 | 第42-43页 |
2.3.4 抑制miR-149-3p激活TLR-4/ NF-κB p65通路 | 第43-46页 |
2.3.5 过表达miR-149-3p减弱CSE刺激对TLR-4/NF-κB p65通路影响 | 第46-49页 |
2.4 讨论 | 第49-51页 |
2.5 结论 | 第51-52页 |
第三章 MicroRNA-3202在吸烟相关COPD的作用及机制探讨 | 第52-84页 |
3.1 前言 | 第52-53页 |
3.2 材料与方法 | 第53-64页 |
3.2.1 细胞及动物 | 第53页 |
3.2.2 双荧光素酶报告基因实验载体构建(FAIM23'UTR) | 第53-56页 |
3.2.3 FAIM2基因3'UTR序列点突变 | 第56-58页 |
3.2.4 FAIM2基因过表达载体构建 | 第58-59页 |
3.2.5 细胞共培养 | 第59-60页 |
3.2.6 细胞转染 | 第60页 |
3.2.7 CCK-8检测 | 第60页 |
3.2.8 Hoechst 染色 | 第60-61页 |
3.2.9 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第61页 |
3.2.10 动物模型 | 第61页 |
3.2.11 苏木精-伊红染色(H&Estaining) | 第61-62页 |
3.2.12 免疫组织化学检测(IHC) | 第62-63页 |
3.2.13 酶联免疫吸附试验(ELISA)检测 | 第63页 |
3.2.14 QPCR检测 | 第63页 |
3.2.15 Western blotting | 第63-64页 |
3.3 实验结果 | 第64-81页 |
3.3.1 miR-3202减弱CSE对T淋巴细胞的刺激效果 | 第64-65页 |
3.3.2 CSE预处理的T淋巴细胞促进HBECs的细胞凋亡 | 第65-69页 |
3.3.3 miR-3202靶向调控FAIM2 | 第69-71页 |
3.3.4 敲低T淋巴细胞miR-3202的效果 | 第71-75页 |
3.3.5 敲低T淋巴细胞FAM2的效果 | 第75-78页 |
3.3.6 动物模型验证miR-3202/FAIM2 | 第78-81页 |
3.4 讨论 | 第81-83页 |
3.5 结论 | 第83-84页 |
全文总结 | 第84-85页 |
参考文献 | 第85-96页 |
综述 | 第96-119页 |
参考文献 | 第106-119页 |
读学位期间获得的学术成果 | 第119-120页 |
致谢 | 第120页 |