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Sirt3增加抗凋亡蛋白抑制剂ABT737诱导卵巢癌细胞凋亡作用的实验研究

中文摘要第4-6页
abstract第6-8页
中英文缩略词第11-12页
引言第12-13页
第1章 文献综述第13-23页
    1.1 肿瘤细胞与凋亡第13-17页
        1.1.1 肿瘤的生物学特性第13-14页
        1.1.2 细胞凋亡与Bcl-2家族蛋白第14-16页
        1.1.3 肿瘤细胞的凋亡抵抗机制第16-17页
    1.2 Sirt3与肿瘤第17-23页
        1.2.1 sirtuin家族第17-19页
        1.2.2 sirt3的生理学作用第19-20页
        1.2.3 sirt3与肿瘤第20-23页
第2章 实验材料与方法第23-34页
    2.1 实验材料第23-26页
        2.1.1 实验仪器第23-24页
        2.1.2 实验试剂第24-25页
        2.1.3 实验用细胞株第25-26页
    2.2 实验方法第26-34页
        2.2.1 细胞培养第26-27页
        2.2.2 细胞转染第27页
        2.2.3 MTT检测细胞活性第27-28页
        2.2.4 实时无标记动态监测细胞活性(RTCA)第28页
        2.2.5 AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率第28-29页
        2.2.6 JC-1染色检测线粒体膜电势第29页
        2.2.7 细胞总蛋白提取第29-30页
        2.2.8 WesternBlot第30页
        2.2.9 提取线粒体第30-31页
        2.2.10 免疫共沉淀第31-32页
        2.2.11 BH3检测第32-33页
        2.2.12 统计学方法第33-34页
第3章 实验结果第34-42页
    3.1 过表达SIRT3增加SKOV-3细胞对ABT737诱导的凋亡敏感性第34-38页
        3.1.1 MTT检测细胞活性第34-35页
        3.1.2 实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)检测细胞生长速率第35页
        3.1.3 AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率第35-37页
        3.1.4 JC-1染色流式细胞术检测线粒体膜电势变化第37-38页
    3.2 过表达SIRT3导致细胞线粒体处于高水平的“凋亡启动”状态第38-40页
        3.2.1 BH3分析技术检测线粒体“凋亡启动”(mitochondrialpriming)水平第38-39页
        3.2.2 WesternBlot检测线粒体上Bcl-2家族蛋白表达水平第39-40页
    3.3 过表达SIRT3降低CyclophilinD乙酰化水平介导HK2从线粒体上的解离第40-42页
        3.3.1 免疫共沉淀技术检测CyclophilinD的乙酰化水平第40-41页
        3.3.2 WesternBlot检测线粒体上HK2表达水平第41-42页
第4章 讨论第42-45页
第5章 结论第45-46页
参考文献第46-55页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第55-56页
致谢第56页

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